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1、生物化学实验指导——试用版19血清成分分析(家鸡、乌鸡血清)作者:王志豪李东导师:吴明江(温州大学生命与环境科学学院浙江温州325027)摘要:本次血清成分分析总共分三个试验进行操作。血清胆固醇的定量测定(邻苯二甲醛法),血清清蛋白与γ-球蛋白的分离与鉴定,血清谷丙转氨酶活性的鉴定及活力测定。通过试验了解并掌握邻苯二甲醛法测定血清总胆固醇,盐析法分离提纯蛋白质,并对蛋白质进行透析与浓缩,采用凝胶层析法分离重铬酸钾和蓝葡聚糖混合液,利用醋酸纤维素薄膜电泳法分离与鉴定血清清蛋白与γ-球蛋白,凝胶过滤层析
2、及透析法脱盐与蛋白质浓缩的原理和方法。并以肝脏为原料,进行了谷丙转氨酶活力的鉴定。利用对鸡的血清分析来了解血清成分的区别,我们主要采用乌鸡与家鸡对照来进行试验。关键词:血清、肝脏、成分分析、蛋白质、谷丙转氨酶Serumcomponentanalysis(chicken,chickenserum)Author:WangZhihaoLidongTutor:WuMingjiang(CollegeofLifeandEnvironmentSciences,WenzhouUniversity,Wenzhou,Z
3、hejiang325027)Abstract:Theanalysisofserumcomponentsinatotalofthreetestoperation.Quantitativedeterminationofserumcholesterol(adjacentbenzenetwoformaldehyde),serumalbuminandgammaglobulinseparationandidentification,serumalanineaminotransferaseactivityiden
4、tificationandactivitydeterminationof.Throughtheexperimenttounderstandandmastertheadjacentbenzenetwoformaldehydedeterminationoftotalcholesterolinserumbysaltingoutmethod,separationandpurificationofproteins,andproteinsfordialysisandconcentrationbygelchrom
5、atography,potassiumdichromateandbluedextransolution,usingcelluloseacetatemembraneelectrophoresisseparationandidentificationofserumalbuminandgammaglobulin,gelfiltrationchromatographyanddialysisdesalinationwiththeprincipleandmethodofproteinconcentration.
6、Andtotheliverasrawmaterial,thealanineaminotransferaseactivitydeterminationof.Utilizationofchickenserumanalysistounderstandthedifferencebetweenserumcomponents,wemainlyusethechickenandchickencontrolstotest.Keywords:Serum;liver;componentanalysis、protein、a
7、lanineaminotransferase前言:血清总胆固醇测定是血脂分析的常规项目,测定方法很多,目前国内大多数实验室的常用方法有酶法、硫酸一磷酸一高铁显色法、硫酸一醋醉直接显色法、硫酸一醋酐煮沸显色法及邻苯二甲醛一硫酸显色法。本次实验用邻苯二甲醛酸法进行测定19生物化学实验指导——试用版19。1而通过血清清蛋白与γ-球蛋白的分离可以了解蛋白质等生物大分子的一些特性。血清谷丙转氨酶以下简称谷丙酶,谷丙酶活力测定对于病毒性肝炎的诊断价值已被一致肯定以,。它肝病早期诊断,疗效观察,以及流行病学调查等
8、方面均有一定意义。2通过本次实验将让我们了解到基本的血清成分测定方法。一、血清胆固醇的定量测定(邻苯二甲醛法)1.1目的了解并掌握邻苯二甲醛法测定血清总胆固醇的原理和方法。1.2原理胆固醇及其酯在硫酸存在下与邻苯二甲醛作用。产生紫红色物质,此物质对550nm波长的光有最大吸收,可用比色法定量测定。100mL样品中胆固醇含量在400mg之内与吸光度呈良好线性关系。本法优点是操作简便(无须将样品中的胆固醇抽提出来或去除样品中的蛋白质),灵敏,稳定。1.3器材1、血清2、试