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1、贵阳学院毕业论文(设计) 本科毕业论文(设计)题目:药材甲HSP70和HSP90基因的克隆及序列分析__院系:生物与环境工程学院专业:生物工程姓名:孙元烽学号:111501402055指导教师:杨文佳教师职称:副教授填写日期:2015年月日贵阳学院毕业论文(设计)贵阳学院本科毕业论文(设计)诚信责任书本人郑重声明:本人所呈交的毕业论文(设计),是在指导老师的指导下独立进行研究所完成。毕业论文(设计)中凡引用他人已经发表或未发表的成果、数据、观点等,均已明确注明出处。特此声明。论文(设计)作者签名
2、:日期:贵阳学院毕业论文(设计)贵阳学院毕业论文(设计)任务书题目药材甲HSP70和HSP90基因的克隆及序列分析专业生物工程学号111501402055姓名孙元烽一、主要内容本实验以中药材储藏期严重危害的药材甲为研究对象,以转录组测序为基础,利用RT-PCR技术克隆获得了2条HSP基因的全长序列,并对其生物信息学进行了分析。研究结果将为药材甲热激蛋白基因功能研究提供基础。二、基本要求1、实验前需查阅关于基因克隆及序列分析的相关文献,知道国内外研究进展、研究方法、数据处理以及结果分析等。2、熟悉掌握高压灭
3、菌器、移液器、电泳仪、PCR、凝胶成像仪、常温离心机等仪器的使用方法。3、熟悉药材甲总RNA的提取方法、基因克隆及序列分析的方法。4、按计划完成各阶段的研究工作。5、通过对药材甲的HSP基因克隆及序列分析得出相关的结论。6、查阅相关文献,按相关的规范与写作要求完成论文写作。三、主要参考资料[1]王建义.热激蛋白的研究进展[J].山西林业科技,2008,(1):26-28.[2]王欢.蝶蛹金小蜂热激蛋白家族基因表达与热保护功能[J].昆虫学报,2012,55(8):903-905.[3]杨丽红.柑橘全爪螨P
4、anonychuscitri(McGregor)对热胁迫的响应机制研究[D].重庆:西南大学,2011:10-12.[4]余昊,万方浩.B型烟粉虱和温室白粉虱热激蛋白90基因(HSP90)的全长cDNA克隆与系统发育分析[J].昆虫学报,2009,52(4):364-366.[5]崔旭红,谢明,万方浩.高温胁迫下B型烟粉虱热激蛋白基因HSP70表达量的变化[J].昆虫学报,2007,50(11):1087-1091.[6]李灿.中药材储藏物害虫优势种药材甲形态及生活史[J].植物保护,2007,33:12
5、3-124.完成期限:指导教师签章:专业负责人签章:贵阳学院毕业论文(设计)目录摘要1ABSTRACT2第一章文献综述31.热激蛋白概述31.1热激蛋白的分类及主要功能31.2HSP基因的表达调控42.热激蛋白在昆虫中的研究进展42.1热激蛋白的诱导表达能提高昆虫的耐热性52.2热激蛋白的表达能使昆虫快速获得耐热性52.3热激蛋白的表达量与昆虫耐热能力正相关63.药材甲研究概述64.本研究目的和意义7第二章药材甲HSP70和HSP90基因的克隆及序列分析81.材料与方法81.1供试虫源81.2试剂与仪器8
6、1.3总RNA提取91.4基因组DNA的去除91.5反转录合成第一条cDNA链101.6PCR引物设计101.7PCR扩增101.8PCR产物回收、连接、转化、测序111.9药材甲HSP基因的序列分析112结果与分析112.1药材甲HSP70和HSP90基因的克隆112.2药材甲HSP90和HSP70基因系统发育分析15第三章小结与讨论16致谢16参考文献18贵阳学院毕业论文(设计)摘要摘要:【目的】本研究旨以探讨热激蛋白的功能以及药材甲对环境适应的分子机理。【方法】本研究采用RT-PCR技术克隆了药材甲
7、热激蛋白HSP70和HSP90基因的全长,利用各种生物信息方法分析其基因组和蛋白质的特征。【结果】分别获得了HSP70和HSP90基因的cDNA全长序列,分别命名为SpHSP70和SpHSP90。SpHSP70基因的开放阅读框长度为1950bp,编码650个氨基酸。通过ProtParam软件在线分析,SpHSP70基因推导的蛋白质分子式为C3121H5003N863O992S21,理论分子量为71.16kDa,等电点为5.36,氨基酸序列中含有HSP70家族的3个保守基序和细胞质型HSP70C-端基序(E
8、EVD),系统进化关系分析表明它与多种昆虫的HSP70序列有较高的同源性。SpHSP90基因的开放阅读框长度2169bp,编码723个氨基酸。通过ProtParam软件在线分析,SpHSP90基因推导的蛋白质分子式为C3650H5816N968O1161S27,理论分子量为82.70kDa,等电点为5.01,氨基酸序列中含有HSP90家族的5个保守基序,以及细胞质型HSP90C-端基序(MEEVD),结构预测表明SpHSP90
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