山羊igfbp-6基因的克隆及其组织表达的发育性变化-游杰

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1、山羊IGFBP-6基因的克隆及其组织表达的发育性变化动物科学（特种经济动物养殖方向）2008级游杰指导教师张红平教授摘要：IGFBPs在体内循环系统中能与IGFs结合，延长IGFs的半衰期，调节IGFs的代射清除率，提高IGFs的生物学效应。肝脏和局部组织分泌的IGFBPs共同调控各个组织的生长与发育，从而促进动物机体的生长。本研究以培育品种南江黄羊为试验材料，应用RT-PCR和克隆技术克隆山羊IGFBP-6基因的全编码区序列，采荧光定量PCR技术研究该基因在南江黄羊生后5个时间点（0d、30d、60d、90d、120d）和6个组织（肝脏、肺、心脏、背最长肌

2、、半膜肌和臂三头肌）的发育性变化。结果表明：克隆得到南江黄羊IGFBP-6基因的CDS全序列长度为711bp，编码235个氨基酸，该基因的核苷酸、氨基酸序列同绵羊的一致性为97%，与其他物种间的一致性也较高；在各个时间点的各个组织中都检测到IGFBP-6基因的表达，但相对表达量存在一定的差异。IGFBP-6在背最长肌的基因表达量远远高于肝脏、心脏、脾脏、肺脏和其它肌肉等组织的表达量（0.01

3、ditsDevelopmentalChangeinTissueExpressionYouJie,Animal science(Special economical animalbreeding),Grade2008SupervisedbyProfessorZHANGHongpingAbstract:IGFBPs(insulin-likegrowthfactors,IGFs)familyplayanimportantroleinmaintainingnormalphysicalactivitiesandprocesses,includingembryodiff

4、erentiation,bodydevelopment,sugar,lipidandproteinmetabolism.IGFBPscanprolongthehalf-lifeofIGFs,enhanceitsbiologicalactivityandregulateitsmetabolismclearancebybindingIGFsincirculationsystem.IGFBPssecretedfromliverandotherlocaltissuescanregulateandstimulategrowthoftissuescorporately.

5、Inthisstudy,Nanjiangyellowgoatwaschooseasexperimentalmaterial.RT-PCRandcloningtechnologywereemployedtoclonethefullcodingsequenceofIGFBP-6genesoutthetotalRNAsextractedfromlivertissue16at0dafterbirth,followedbyusingofQ-PCRtoidentifytheprofileofgeneexpressionindifferenttissues(liver,l

6、ung,heart,longissimusdorsi,semimembranosus,musculustriceps)andatdifferenttimepoints(0d、30d、60d、90d、120dafterbirth).Theresultsindicate:(1)WehaveclonedtheCDSfullsequenceofIGFBP-6(711bp),whichencodingapeptideconsistsof235aminoacidresidues.ThenucleotideandaminoacidsequenceofIGFBP-6poss

7、esshighhomogeneitywithsheep-about97%ofitssequence-aswellasotherspices;(2)WehavedetectedtheexistenceofIGFBP-6mRNAinalltissuesandateachtimepointswechoose,buttheexpressionleveldifferfromeachother.Itexpressmorehigherinlongissimusmusclethanliver,heart,lungandothermuscletissues(0.01

8、05orP<0.01),whileinliver,i