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1、天津农学院课程论文产锰过氧化物酶菌株的筛选,诱变选育及固体发酵条件优化StudiesonScreeningwithLasermutagenesisandOPtimi2ayionofSolidFermentationofConditionsofManganesePeroxidaseHighProducingFungi学生姓名陈虹宇二级学院农学与资源环境学院系别生物技术系专业班级2014级生物技术专业1班指导教师黄亮成绩评定2014年11月目录中文摘要……………………………………………………………………………………1英文摘要……………………………………………………………………………………21
2、绪论………………………………………………………………………………1.1木质素的生物降解……………………………………………………………………1.2黄抱原毛平革菌简介…………………………………………………………………1.3锰过氧化物酶(MnP)的基本特性及作用机理………………………………………1.4微生物原生质体技术…………………………………………………………………2材料与方法………………………………………………………………………………2.1实验材料与仪器………………………………………………………………………2.1.1实验材料………………………………………………………………………………2.1
3、.2培养基…………………………………………………………………………………2.1.3试剂与药品…………………………………………………………………………2.1.4主要仪器………………………………………………………………………………2.2菌种的筛选及鉴定……………………………………………………………………2.3菌株诱变选育……………………………………………………………………………2.3.1原生质体的制备………………………………………………………………………2.3.2原生质体的再生……………………………………………………………………2.4He-Ne激光对原生质体诱变作用…………………………………
4、……………………2.4.1激光诱变………………………………………………………………………………2.4.2诱变效果分析……………………………………………………………………2.4.3酯酶同工酶分析……………………………………………………………………2.5固态发酵条件优化……………………………………………………………………2.5.1菌种的活化与驯化……………………………………………………………………2.5.2固态发酵培养基的优化…………………………………………………………2.5.3固态发酵条件的优化…………………………………………………………3结果与讨论……………………………………………………
5、…………………………3.1高产MnP菌株的筛选及菌种鉴定……………………………………………………3.2菌株的诱变选育………………………………………………………………………3.2.1原生质体的制备和再生…………………………………………………………3.2.2激光辐照原生质体……………………………………………………………………3.2.3变异株的选育及鉴定………………………………………………………………3.3发酵条件的优化……………………………………………………………………4实验结论………………………………………………………………………………5本文进一步需解决的问题………………………………………
6、…………………参考文献……………………………………………………………………………………摘要木质素是地球上廉价、丰富的可再生资源,其生物降解是自然界碳素循环关键的-步,但由于它是-种高度复杂的、不定型的芳香环聚合物,很难被降解,因此给全球造成了严重的环境污染。由于传统的物理和化学方法并不能从根本上解决这-问题,生物技术便成为环境界和生物界愈发关注的新生力量。如何利用微生物产生的木质素降解酶系来分解和转化木质素成了新的研究课题,并引发了-轮又-轮的研究热潮。由于从自然界筛选出的黄抱原毛平革菌其产锰过氧化物酶(ManganesePeroxidase,MnP)较低,无法直接应用于生产实践,故对黄
7、抱原毛平革菌进行改良,使其获得更高的酶活是广泛应用的前提。同时,迄今为止,大多关于黄抱原毛平革菌发酵的研究多为液体发酵,成本较高且对环境条件有-定要求,无法有效应用在大规模生产中。因此,对黄抱原毛平革菌的固体发酵条件进行研究更具有重要的现实意义。本文通过筛选高产菌株,通过激光诱变等多次实验探寻出了固体发酵优化最佳方案。关键词:高产锰过氧化物酶菌株;筛选;激光诱变;固体发酵ABSTRACTLigninisakindofinexpens
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