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时间:2018-12-23
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1、血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理包括:一、血型相容性检测二、ABO血型正反定型型不一致的原因分析及处理三、交叉配血中常见问题分析及处理四、意外抗体筛选的意义和检测方法五、弱D检测的的意义和检测方法一、血型相容性检测1、受血者和供血者AB0血型是否相容。2、受血者和供血者RhD血型是否相容。3、主次侧交叉配血是否相容。4、受血者血清中是否有临床有意义的意外抗体。二、ABO正反定型不符的原因分析和处理(一)原因1.实验者操作技术的错误:导致假阴性的有:①未加入抗体或血清。②未识别溶血。③血清与红细
2、胞比例不当④离心速度或时间不够。⑤使用失效或错误试剂。⑥实验结果记录或解释错误导致假阳性的有:①离心速度过大或时间过长、②使用了受到细菌污染的试剂、③试验器皿不干净、④实验结果记录或解释错误2、红细胞标本问题:①患者近期接受了大量ABO血型相容但不同型的红细胞,如骨髓移植患者,或非O型人接受O型红细胞 ②某些ABO基因变异的个体或ABO亚型红细胞,一些白血病或其他恶性疾病患者的红细胞ABO抗原太弱,应用抗-A、抗-B试剂未能出现预期的凝集反应 ③红细胞获得性或遗传性的异常,如获得性B抗原红细胞
3、或Tn/T多凝集红细胞,人血清抗-A、抗-B试剂可能与这些异常的红细胞反应④使用未洗涤的红细胞标本,其表面黏附的血浆或血清中含针对抗-A、抗-B试剂中染色剂或其他成分的抗体,出现假阳性反应⑤患者血清中高活性、高浓度冷自身抗体严重致敏(包被)自身红细胞,以至自发地发生凝集,而不是抗体试剂的特异性免疫反应所致⑥红细胞表面包被IgG类抗体3、血清标本的问题:①小的纤维蛋白凝集的红细胞凝块被误认为是血液凝集,如使用血浆标本或未完全去除纤维蛋白的血清标本时。 ②免疫抑制疾病患者血清中AB
4、O抗体减少或消失。老年人ABO抗体减弱③4-6月龄内婴儿血清中ABO抗体阴性或很弱,一般只测正定型④血清中不正常浓度和比例的蛋白质成分或高分子蛋白增多可引起非特异凝集,如缗钱状红细胞的非特异凝集⑤血清中含抗-A、抗-B以外的其他红细胞抗体,如抗-M、抗-I等。⑥患者接受了ABO血型不同的骨髓移植⑦患者血清中含有针对红细胞保护剂的抗体⑧大量C1分子由于异常高效价的补体结合抗体抗-A、抗-B作用,结合到红细胞膜上,遮蔽了A、B抗原位点,不发生凝集(二)、分析和处理基本程序:1.重新采集标本,以避免采集、
5、标记、污染等错误2.查询患者既往病史、输血史、用药史、骨髓移植史3.彻底洗涤标本或试剂红细胞4.应用抗-AB、抗-A1、或抗-H检测红细胞5.分析抗筛结果,确定结果是否受同种异型或自身冷抗体干扰6.室温孵育30min后,离心观察结果,以检测弱的抗原抗体反应7.做自身红细胞做对照,以确定自身抗体的干扰ABO正反定型型不符的分类:1.抗原表达减弱所致的ABO正反定型型不符2.抗-A、抗-B血清的意外反应所致的ABO正反定型型不符3.意外的血清学反应所致的ABO正反定型型不符1.抗原表达减弱所致的ABO正
6、反定型型不符:①血型抗原表达减弱的常见原因:↑ABO亚型红细胞↑白血病或其他恶性疾病患者的红细胞ABO抗原太弱,应用抗-A、抗-B试剂未能出现预期的凝集反应↑新生儿②抗原表达减弱所致ABO正反定型型不符的处理:↑将抗-A、抗-B和抗-A,B试剂与洗涤过的红细胞在室温或4℃孵育30min,以增强抗原、抗体的结合↑用木瓜酶、无花果酶和菠萝蛋白酶处理红细胞,以增强抗原、抗体的结合↑应用抗-AB、抗-A1、或抗-H检测红细胞↑用人血清抗-A、抗-B进行吸收放散试验,检测弱A、B抗原,但不是所有单克隆抗体试剂
7、都适宜做吸收放散试验,单克隆抗-A、抗-B必须经过系统验证,且同时要做O型血吸收放散试验作对照↑检测唾液中A、B和H血型抗原物质2.抗-A、抗-B血清的意外反应所致的ABO正反定型型不符①引起抗-A、抗-B血清意外反应的因素:获得性B红细胞:获得性B红细胞(特征)↗常出现在有肠道细菌进入血循环的疾病,也可发生在正常人↗通常只有A型人能出现获得性B抗原↗常伴有T和Tn多凝集红细胞出现(细菌感染时)↗自身抗-B不与自身获得性B抗原反应(无自凝现象)获得性B红细胞(鉴定)↗调整人血清抗-B试剂pH至6.0
8、时,即不与获得性B细胞反应↗分泌型者唾液中无B血型物质↗乙酸酐处理能明显减弱其反应,但正常B细胞不受影响 获得性类A抗原↗造血干细胞的体细胞突变可造成部分红细胞持续性Tn抗原激活,类同A抗原↗Tn和T一样属隐蔽行院抗原,激活暴露后与所有血型的血清和人血清血型抗体出现凝集反应(全凝后多凝)↗蛋白酶能降解Tn分子,消除与抗A凝集反应性,而正常A抗原不受影响,也可通过AB血清证实 混合视野凝集↗非O型人近期输用O型血↗骨髓移植后↗A3细胞与抗-A呈典型的混合视野凝集现象↗
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