微柱凝胶法在血型鉴定和交叉配血中的应用

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1、微柱凝胶法在血型鉴定和交叉配血中的应用（江西省上高县人民医院检验科江西上高336400）L摘要】目的探讨微柱凝胶技术在血型鉴定和交叉配血中的应用。方法应用微柱凝胶法和传统试管法进行血型鉴定4630例，交叉配血1760例。结果微柱凝胶法和传统试管法血型鉴定不一致3例。交叉配血受冷凝集素影响2例，次侧不合1例。结论微柱凝胶试验可作为血型和交叉配血的常规检测方法。【中图分类号】r446.6L文献标识码】a【文章编号】1004-5511（2012）04-0057-01血型鉴定在急诊抢救、手术治疗、贫血治疗

2、、刑事鉴定等过程中是不可缺少的检验，它的正确与否关系到病人生命安危。口前国内各级医院血型鉴定绝大多数都是手T操作，而且在一般情况下仅做正向定型法。由于手工操作不易标准化，且干扰因素较多，血型错检时有发生。因此，为了确保血型的准确性，实行血型鉴定的标准化，我科血库口2010年9刀开始采用微柱凝胶法和传统试管法进行血型鉴定4630例，微柱凝胶法交叉配血1760例，现报告如Ko1材料与方法1.1仪器孵育器：长春博研专用孵育器；离心机：长春博研专用离心机;移液器:lu1>50111、50111和1000u

3、lo1.2试剂：（1）仪器试剂长春博讯生物微柱凝胶血型鉴定卡，不规则抗体检测卡；（2）手工试剂抗a、抗b血清为上海血液生物医药有限公司生产，生产批号20100310,单克隆抗d为长春博德生物技术有限公司生产，生产批号19290401.3标本来源2010年9月起我院住院和门诊送检血型4630例，交叉配血1760例,抽取病人静脉血2ml,edta抗凝。1.4方法：（1）微柱凝胶检测法按长春博讯微柱凝胶血型鉴定和不规则抗体检测说明书进行：取abo/rh血型鉴定卡一个，在空片位置写上病人姓名，病历号等，撕

4、去卡上部的锡纸膜。在a、b、d孔分别加入已配制的0.5%病人红细胞悬液50PE专用离心机离心。离心完成后取出卡片按说明书提示标准判读结果。取不规则抗体检测卡一个，在空白位置写上病人姓名，病历号等，撕去卡上部的锡纸膜。主侧加入供血者0.5%红细胞悬液次管50111和受血者血浆50u1,次侧加入0.5%病人红细胞悬液50u1和供血者血浆50u1,专用离心机离心。离心完成后取岀卡片按说明书提示标准判读结果。（2）手工操作止向定型试管法按《全国临床检验操作规程》规定进行。2结果2.1血型鉴定共4630例微

5、柱凝胶法和传统试管法不一致3例（其中两例为0~6月婴儿）。2.2交叉配血共1760例其中主侧良好，次侧凝集一例，在微柱中仅加入受血者0.5%红细胞悬液50ul,孵育后离心，结果显示阳性。冷凝集索影响交叉配血的2例，这2例中主、次侧微柱均出现不同程度的弱凝集，把这些卡放在37°C孵育器孵育15min后离心，凝集有不同程度的减弱。3讨论《全国临床检验操作规程》［1］对血型鉴定耍求同时通过正、反向定型來准确鉴定abo血型，并规定操作中红细胞悬液的浓度、加样的顺序、试剂用量、离心速度、时间等。但目前国内大

6、多数医院血型鉴定均只采用止向定型法，省略了反向定型，且操作较随意，难以标准化，故易导致血型错检的发生。微柱凝胶试验是法国dr.yveslapierre在1986年首先发明的一项免疫学检测新技术，是微柱凝胶技术与以往所有血型鉴定技术相结合的产物。1994年此项技术获得了美国fda的认可。经过不断改进和临床大量应用，目前，在多数发达国家，此项技术已作为常规的红细胞血型血清学检测技术应用于临床[2-5]o微柱凝胶检测法是抗原抗体反应与凝胶分子筛技术相结合的产物。通过调节葡聚糖凝胶的浓度來控制分子筛孔径大

7、小，使分子筛只允许游离分子通过，从而达到分离凝集红细胞和游离红细胞的0的。即将红细胞和血清加在凝胶的上部反应离心以后，凝集红细胞将受到凝胶的阻碍而停留在凝胶的上部或凝胶中，则证明发生凝集反应为阳性，反之，所有红细胞都停留在凝胶底部，证明未发生凝集反应，则可判为凝集反应阴性。在4630例血型鉴定中，微柱凝胶法与传统试管法不一致3例，其中2例年龄小于6月，一例为抗凝效果不佳至微柱凝胶法假阳性。新生儿及部分老年人rbc抗原较青壮年弱，一些白血病或恶性肿瘤也会使rbc抗原变弱，在手工操作鉴定时，凝集较弱难

8、以判别血型。而微柱凝胶检测法，分离柱中的凝胶孔隙大小只让未凝集的rbc通过，而凝集的rbc则被阻碍于分离柱外，使检测具有较高的灵敏性[6-8]o某些自身免疫性疾病或新生儿溶血病患者的rbc会自发的发生凝集，另外，如果rbc膜有遗传性或获得性异常，也易发生凝集，在人工血型正定型中，出现假凝集易造成血型错检。微柱凝胶法屮加入了抗人球蛋白，以促进红细胞的特异性凝集，因此，特异性高于手工正定型法。在血型鉴定中遇到纤维蛋口含量过高影响配血结果，是rti于患者血液标本抗凝效果不佳，内含不易察觉