abo血型鉴定和交叉配血实验

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1、ABO血型鉴定和交叉配血实验[实验目的] 　　观察红细胞凝集现象。 　　学习ABO血型鉴定方法，掌握血型鉴定原理。  [实验原理] 　　ABO血型是根据红细胞表面存在的凝集原决定的。存在A凝集原的称为A血型，存在B凝集原的称为B血型。而血清中还存在凝集素。当A凝集原与抗A凝集素相遇或B凝集原与抗B凝集素相遇时，会发生红细胞凝集反应。一般A型标准血清中含有抗B凝集素，B型标准血清中含有抗A凝集素，因此可以用标准血清中的凝集素与被测者红细胞反应，以确定其血型。 　　同种动物不同个体的红细胞凝集称为同族血细胞凝集作用。不同动物的血液互相混合有时也可产生红细胞凝集，称为异族血细

2、胞凝集作用。对于动物的天然血型抗体了解不多，而且免疫效价也很低，所以同种动物第一次输血，一般不会引起严重后果。但第二次输血就必须进行交配试验，才能决定是否能相互输血。  [实验对象]   　　正常人。 [实验药品]   　　A型B型标准血清。 [仪器器械]   　　双凹玻片，采血针，竹签，75%酒精棉球，干棉球，玻璃蜡笔（记号笔），尖头滴管，显微镜。 [实验方法与步骤] 　　1.ABO血型的鉴定： 　　（1）取双凹玻片一块，在两端分别标上A和B，中央标记受试者的号码。 　　（2）在A端和B端的凹面中分别滴上相应标准血清少许。 　　图6.9-1ABO血型鉴定示意图 　　（

3、3）75%酒精棉球消毒无名指端，用采血针刺破指端，用消毒后的尖头滴管吸取少量血（也可用红细胞悬浮液，见下述），分别与A端和B端凹面中的标准血清混合，放置1～2min后，能肉眼观察有无凝血现象，肉眼不易分辨的用显微镜观察。 　　（4）根据凝集现象的有无判断血型（图6.9-1）。 　　2.交叉配血实验： 　　（1）分别对供血动物和受血动物消毒、静脉取血，制备成血清和红细胞悬浮液。红细胞悬浮液是将受检者的血液一滴，加入装有生理盐水约1ml的小试管中，即为2%的红细胞悬浮液。加盖备用。 　　（2）取双凹玻片一块，在两端分别标上供血动物和受血动物的名称或代号，分别滴上它们的血清少

4、许。 　　（3）将供血者的红细胞悬浮液吸取少量，滴到受血者的血清中（称为主侧配血,图6.9-2）；将受血者的红细胞悬浮液吸取少量，滴入供血者的血清中（称为次侧配血），混合。放置10～30 min后，肉眼观察有无凝集现象，肉眼不易分辨的用显微镜观察。如果两次交叉配血均无凝集反应，说明配血相合，能够输血。如果主侧发生凝集反应，说明配血不合，不论次侧配血如何都不能输血。如果仅次侧配血发生凝集反应，只有在紧急情况下才有可能考虑是否输血。  [注意事项] 　　1.指端、采血针和尖头滴管务必做好消毒准备。做到一人一针，不能混用。使用过的物品（包括竹签）均应放入污物桶，不得再到采血部

5、位采血。 　　2.精消毒部位自然风干后再采血，血液容易聚集成滴，便于取血。取血不宜过少，以免影响观察。 　　3.采血后要迅速与标准血清混匀，以防血液凝固。 　　4.在进行交叉配血实验时，一定要防止将主侧配血和次侧配血搞混了。 [实验结果] 　　报告你的血型。