血型鉴定与交叉配血

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1、血型鉴定与交叉配血医学检验系陈丽华一、ABO血型鉴定盐水凝集法玻片法试管法凝胶微柱法检测红细胞上存在的血型抗原，以及血清中存在的血型抗体，依据抗原抗体存在的情况判断血型。常规的方法包括正向定型与反向定型正向定型※：已知抗体特异性的血清检查红细胞抗原反向定型※：已知血型红细胞检查血清抗体血型鉴定原理＋表示凝集，－表示无凝集对抗血清的要求※①高度特异，只能与相应的红细胞抗原发生凝集，无非特异性凝集，②高效价，抗A血清效价在1:128以上，抗B血清效价在1:64以上。③高亲和力，15秒内出现凝集，其强

2、度为3分钟时凝块>1mm。④无冷凝集素。⑤无菌。分离血清后56℃，30min灭活。ABO血型鉴定1．生理盐水凝集法①ABO血型抗体一般是IgM，属于完全抗体②IgM抗体分子链较长，能克服红细胞表面排斥力，同时分子量较大，它能与相应抗原特异性结合，在生理盐水中发生肉眼可见的凝集现象。ABO血型鉴定原理IgM抗体凝集红细胞示意图IgM在盐水介质中产生凝集①玻片法：操作简单，不需要离心，适于大规模血型普查。反应时间长，易忽略较弱的凝集而导致定型错误。不适于反定型。ABO血型鉴定镜检证实ABO血型鉴定（

3、玻片法）抗A血清1滴抗B血清1滴加5％红细胞悬液1滴，混匀连续转动玻片1～5min凝集无凝集抗A+B血清1滴②试管法：需时间短，适用于急诊定型。可正反定型。可发现亚型或较弱抗原抗体反应，结果判断可靠，为常规检查方法。ABO血型鉴定正反定型结果不一致的解决办法①首先重复试验，如果仍然不符继续下列试验。②重新采集新鲜血液标本，以纠正因污染或样本错误造成的不符合。③多次洗涤被测红细胞和标准红细胞，除去可能会影响试验结果的血浆中或红细胞保存试剂中的化学成分。④用抗A1、抗A+B检测红细胞。ABO血型鉴定

4、（盐水法）注意事项⑤如怀疑血清中有抗A1，可用数份A2红细胞标本进行检验。⑥如果试验结果未见凝集，应将反应管至少在室温和40℃分别放置30min，用显微镜检查。⑦若怀疑是由于抗原减弱造成的正反定型不符，可进一步做木瓜酶试验、直接抗球蛋白试验、吸收放散试验等加以鉴别。正反定型结果不一致的解决办法ABO血型鉴定（盐水法）注意事项2．凝胶微柱法凝胶具有分子筛效应和亲合效应亲合效应：红细胞抗原与相应抗体结合分子筛效应：低速离心后，凝集红细胞悬浮在凝胶中，而未被抗体结合的红细胞则沉于凝胶底部（管底尖部）。

5、结果观察：肉眼/血型分析仪ABO血型鉴定操作标准化，结果特异、准确可靠，重复性好、灵敏度高。可手工、半自动及全自动操作不足之处：需要特殊试剂和离心机成本较高。ABO血型鉴定（凝胶微柱法）【原理】凝胶具有分子筛效应和亲合效应，在微株凝胶介质中红细胞抗原与相应抗体结合，经低速离心，凝集的红细胞悬浮在凝胶上层，而未和抗体结合的红细胞则沉于凝胶底部（管底尖部）※。【器材】微量吸样枪，一次性吸头，微柱凝胶卡专用水平离心机。【试剂】特异性凝胶微柱卡ABO血型鉴定（凝胶微柱法）【操作】（1）将被检者红细胞（不

6、用洗涤）配成2％～3％生理盐水悬液，向已标记好的特异性凝胶微柱卡的微管反应腔内加50μL.（2）立即水平离心1000r/min,10min.（3）观察及判断血型结果①阳性：对照管细胞沉淀在管底，检测管凝集块在胶上或胶中。②阴性：对照管和检测管细胞沉淀均在管底。③试验失败：对照管细胞在胶上或胶中，应重新做试验。（4）报告方式：同生理盐水法。ABO血型鉴定（凝胶微柱法）注意事项离心机选择：一般使用微柱凝胶卡专用水平离心机。使凝集复合物不偏向一侧，特别是阴性结果不偏向管底之一侧，以免造成弱阳性假象。操

7、作：蒋待检者的稀释后的悬红用微量加样枪分别加在A.B.D和阴性对照孔各50ul离心：为了应用不同离心半径和不同离心机进行凝胶试验，应通过试验设定每台离心机的最佳时间和速度。ABO血型鉴定（凝胶微柱法）ABO血型鉴定错误可以引起严重的后果。鉴定结果错误因素主要有技术问题及ABO血型本身的问题。二、交叉配血交叉配血是在输血前必须做的试验。交叉配血中最重要的是ABO血型配合，必需ABO血型相同，且交叉配血无凝集才能输血。（一）交叉配血的重要性（二）交叉配血一些基本概念概念：是检查供血者与受血者是否含有

8、不相合的抗原和抗体成分的试验，主要是检查受血者血清中有无破坏献血者RBC的抗体。供血者红细胞与受血者血清反应（主侧交叉配血※）受血者红细胞与供血者血清反应（次侧交叉配血※）献血者受血者红细胞红细胞血清血清主侧次侧交叉配血目的①发现ABO血型鉴定的错误。②发现不规则凝集素。如冷凝集素。③发现其他血型抗体和一些不规则抗体。（三）交叉配血方法1、室温盐水配血法（只能检出IgM型血型抗体）2、聚凝胺法3、抗人球蛋白法4、蛋白酶法5、微柱凝胶法方法选择原则①无输血及妊娠史者，只需作盐水配血。※②有输血史，