folin-酚试剂法测定蛋白质含量实验报告

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1、为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划folin-酚试剂法测定蛋白质含量实验报告　　Folin-酚试剂法测定蛋白质含量一、实验目的　　1，掌握Folin-酚试剂法测定蛋白质含量的原理及其具体实验操作技术；2，掌握制作标准曲线的要领；　　3，学会通过标准曲线求样品溶液中待测定物质含量的方法。　　二、实验原理　　1，蛋白质分子中含有的肽键在碱性条件下可以与Cu2+螯合形成蛋白质-Cu2+复合物，即发生双缩脲反应。而此复合物中的含酚羟基的酪氨酸或色氨酸残基可以还原Folin-酚试剂的磷

2、钼酸盐-磷钨酸盐，产生蓝色化合物，即发生Folin-酚显色反应。同时，在碱性条件下Folin-酚试剂极不稳定，从而易被蛋白质还原而呈蓝色反应。　　2，在一定浓度范围内，蓝色化合物的蓝色深浅与蛋白质浓度呈正比。故通过测定相应浓度梯度的蛋白质标准溶液吸光度可依其作出标准曲线，以此绘制的标准曲线和供试品中蛋白质溶液吸光度可求出供试品中蛋白质的含量。　　三、材料和方法目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定

3、安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　样品：健康人血清；正常人血清蛋白质含量：60~80g/L试剂：牛血清白蛋白标准液；碱性硫酸铜溶液；Folin-酚试剂　　仪器与器材：V-1100分光光度计；恒温水浴箱；试管6支、试管架；加样枪、加样枪架；坐标纸　　实验步骤示意　　详细步骤　　A，配置一定浓度梯度溶液:取6支试管分别编号1至6，按下表加样。　　1，加样时按横向顺序加样，并在加入碱性硫酸铜时：于一号试管加入碱性硫酸铜溶液2ml后等待一分钟再往下一支试管加入同量的碱性硫酸铜溶液，摇匀。如此类推混匀并将其静置在室温下。　　2，在全部试管加完碱性硫酸

4、铜试剂之至距第一支试管加样10分钟后，于第1支试管立即加入Folin-酚试剂，并于2s内摇匀。1分钟后第2支试管加入Folin-酚试剂，2分钟后加第3支试管，以此类推。　　空白管　　试剂牛血清蛋白标准液样品液　　蒸馏水碱性硫酸铜Folin-酚试剂蛋白质浓度　　1--　　0　　2-　　40　　3-　　80　　标准管目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　4

5、-　　120　　5-　　160　　样品管6-　　未知　　B，加样完毕后将各试管每隔1min按1-6顺序放一只试管入水浴箱，分别40℃水浴10min后取出冷却至室温。　　C，以500nm波长比色，以1号管作空白对照，按2-6顺序每隔一分钟测定一支试管内溶液吸光度并重复测三次，记下读数，求出平均值，记录数据并计算结果。　　四、结果与讨论：　　结果：　　A，实验过程现象：　　1，在向试管中加入2ml碱性硫酸铜溶液并摇匀后，溶液澄清，无明显现象；2，在向试管中加入Folin-酚试剂并立即摇匀时观察到：溶液由浅绿立即先变黄后变浅蓝，且蓝色随时间延长而有所加深。　

6、　B，吸光度数据：500nm波长吸收度值记录　　测定次数　　123各管平均值A500　　—　　各管吸光度值A500　　2　　　　3　　目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　4　　　　5　　　　6　　　　根据吸光度数据绘制图表：　　试管　　牛血清蛋白标准液浓　　度A500平均值　　100　　240　　380　　4120　　5160　　6-　　将测得样品管

7、吸光度代入标准曲线公式y=+中，得出样品浓度为μg/ml。即：　　C=C×2×300　　=μg/ml×600=μg/ml　　=/L　　正常人血清蛋白浓度参考范围为：60~80g/L　　以上依赖所得实验数据分析得出的待测蛋白浓度落在正常范围内，可认为本次实验成功。讨论：目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　A：本次实验中操作严格按照实验要求进行，故所测样

8、品结果/L落在正常范围内。与同实验室另一小组所测结果相比差距很小，故可认为本次实验成功。　　B