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时间:2017-07-18
《高产γ-氨基丁酸乳酸菌的等离子诱变选育毕业论文》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、高产γ-氨基丁酸乳酸菌的等离子诱变选育叶杨(安徽工程大学生物化学工程学院,芜湖241000)摘要γ-氨基丁酸(γ-aminobutyricacid,简称GABA)是广泛分布于自然界的一种非蛋白质氨基酸,具有镇痛、促进生长激素分泌及预防老年痴呆等生理功能。为提高GABA产量,本实验应用常温室压等离子体(AtmosphericandRoomTemperaturePlasma,简称ARTP)对实验室已有菌株HX-3-6进行诱变,挑选致死率达到90%以上的菌株进行发酵验证,并通过梯度平板按GABA浓度的高低以及菌落的大小
2、进行初筛,再利用发酵培养基进行复筛并进行遗传稳定性试验。获得的稳定突变株L-120-1且产量达到5.828g/L,较诱变前产量(4.904)提高18.84%。以突变株L-120-1为出发菌株进行ARTP诱变,得的稳定突变株90s-高2产量达到6.178g/L,较诱变前产量(5.319g/L)提高16.15%。最终得到稳定高产GABA的乳酸菌突变菌株90s-高2产GABA比诱变前的HX-3-6菌株产量提高25.98%。关键词:乳酸菌;GABA;ARTP;发酵;遗传稳定Lacticacidyieldγ-aminobu
3、tyricacidplasmaBreedingYeYang(BiochemicalEngineering,CollegeofEngineering,AnhuiUniversity,Wuhu241000)ABSTRACTγ-aminobutyricacid(γ-aminobutyricacid,abbreviatedGABA)isanon-proteinaminoacidsarewidelydistributedinnature,ithasanalgesicandtopromotegrowthhormonesecr
4、etionandpreventionofAlzheimer'sandotherphysiologicalfunction.ToimprovetheproductionofGABA,theAtmosphericandRoomTemperaturePlasma(ARTP)wasusedtomutagenesisHX-3-6(thestrainkeepintheexperiment),andthenmutationswasusedforfuturefermentationwhosefatalityratewereabo
5、ve90%,thegradientplatewithGABAandthesizeofthecolonywereusedforthefirstscreening,andthenfermentationmediumwasusedforthenextscreeningtotestthegeneticstabilityofmutantstrainsoflacticacidbacteria.ObtainedstablemutantsL-120-1andtheyieldreached5.828g/L,thanthepre-m
6、utagenicproduction(4.904g/L)improved18.84%,andthentheL-120-1wasmutagenesis,astablemutants90s-high2wasgotandproductionreached6.178g/L,comparedwithbeforemutagenesisproductionincreasein6%.Finallythehighproductionmutant90s-2comparedtothestrainofHX-3-6improved25.9
7、8%.Keyword:Lactobacillus;GABA;Ferment;Geneticstability目录插图清单图2-1GABA的酶标仪标准曲线…………………………………………………12图3-1HX-3-6的生长曲线……………………………………………………13图3-2HX-3-6的诱变致死率曲线图…………………………………………14图3-3HX-3-6诱变后GABA的产量……………………………………………15图3-4L-120-1的生长曲线和Ph值曲线………………………………………16图3-5L-120-
8、1的诱变致死率曲线……………………………………………17图3-6L-120-1诱变后菌株的GABA产量和OD值的曲线…………………18表格清单表1-1实验药品(试剂)……………………………………………………6表1-2试验仪器……………………………………………………………7表4-1乳酸菌HX-3-6所测OD600值………………………………………22表4-2乳酸菌HX-3-6
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