高产γ-氨基丁酸乳酸菌的等离子诱变选育毕业论文

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1、高产γ-氨基丁酸乳酸菌的等离子诱变选育叶杨（安徽工程大学生物化学工程学院，芜湖241000）摘要γ-氨基丁酸（γ-aminobutyricacid，简称GABA)是广泛分布于自然界的一种非蛋白质氨基酸，具有镇痛、促进生长激素分泌及预防老年痴呆等生理功能。为提高GABA产量，本实验应用常温室压等离子体（AtmosphericandRoomTemperaturePlasma，简称ARTP）对实验室已有菌株HX-3-6进行诱变，挑选致死率达到90%以上的菌株进行发酵验证，并通过梯度平板按GABA浓度的高低以及菌落的大小进

2、行初筛，再利用发酵培养基进行复筛并进行遗传稳定性试验。获得的稳定突变株L-120-1且产量达到5.828g/L，较诱变前产量（4.904）提高18.84%。以突变株L-120-1为出发菌株进行ARTP诱变，得的稳定突变株90s-高2产量达到6.178g/L，较诱变前产量(5.319g/L)提高16.15%。最终得到稳定高产GABA的乳酸菌突变菌株90s-高2产GABA比诱变前的HX-3-6菌株产量提高25.98%。关键词：乳酸菌；GABA；ARTP；发酵；遗传稳定Lacticacidyieldγ-aminobuty

3、ricacidplasmaBreedingYeYang(BiochemicalEngineering,CollegeofEngineering,AnhuiUniversity,Wuhu241000)ABSTRACTγ-aminobutyricacid(γ-aminobutyricacid,abbreviatedGABA)isanon-proteinaminoacidsarewidelydistributedinnature,ithasanalgesicandtopromotegrowthhormonesecreti

4、onandpreventionofAlzheimer'sandotherphysiologicalfunction.ToimprovetheproductionofGABA,theAtmosphericandRoomTemperaturePlasma(ARTP)wasusedtomutagenesisHX-3-6(thestrainkeepintheexperiment),andthenmutationswasusedforfuturefermentationwhosefatalityratewereabove90

5、%,thegradientplatewithGABAandthesizeofthecolonywereusedforthefirstscreening,andthenfermentationmediumwasusedforthenextscreeningtotestthegeneticstabilityofmutantstrainsoflacticacidbacteria.ObtainedstablemutantsL-120-1andtheyieldreached5.828g/L,thanthepre-mutage

6、nicproduction(4.904g/L)improved18.84%,andthentheL-120-1wasmutagenesis,astablemutants90s-high2wasgotandproductionreached6.178g/L,comparedwithbeforemutagenesisproductionincreasein6%.Finallythehighproductionmutant90s-2comparedtothestrainofHX-3-6improved25.98%.Key

7、word:Lactobacillus;GABA;Ferment;Geneticstability目录插图清单图2-1GABA的酶标仪标准曲线…………………………………………………12图3-1HX-3-6的生长曲线……………………………………………………13图3-2HX-3-6的诱变致死率曲线图…………………………………………14图3-3HX-3-6诱变后GABA的产量……………………………………………15图3-4L-120-1的生长曲线和Ph值曲线………………………………………16图3-5L-120-1的诱变致死率

8、曲线……………………………………………17图3-6L-120-1诱变后菌株的GABA产量和OD值的曲线…………………18表格清单表1-1实验药品（试剂）……………………………………………………6表1-2试验仪器……………………………………………………………7表4-1乳酸菌HX-3-6所测OD600值………………………………………22表4-2乳酸菌HX-3-6