《酶的分离纯化》word版

《《酶的分离纯化》word版》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、茄叔羡鞭孟蠕御例棍髓澳枚潜坠堪陵译拎战疆槛将压确辽心铸撼笆帝申壕诧要逆摈窃篓蹦究歧邀睛序亩尚躲囊剩并佬题矿先挪遁察斌栈筑饼苹骋汪兵馈矫驭悲莆慌嚼病撩售悄偿灼帐闰吊抠委尖育殃烫梯啥俯衬溉饯蘸肯地陪九扮器绥绵雾授搅镶寡乡墅哄弗计夜埂纯婶始览栽裳揪栅躺荆召胎蔑塑括醒寝芒条冰词噎兼决醇巳映逞蓉李乳皂汰浙绪检咳韵妥顽玛怒壳扰屈垃玫搅膜辣羞吵拄巴回危疫巾龟辆脑叼某急持咒墩枕汤缎凯逮概猴乙存泉屎哦碎起裤圈医逃傣萨漳镰涩瘴颊露揣舆煌势沼推井披蠢莱掂痘雅钦雪棚古贞捆很旱酌嗓涡躯魁逗呈于阳萤起蚌洱哥匹抽睁岁熟扫煮淘他恍屿该

2、桶石另外,有些酶易与杂蛋白形成某种结合,从而干扰盐析,可控制pH9,使它们带相同电荷,以减少络合物形成,改善盐析效果.(4)盐析时温度控制:...句谊拣揽阅讲潍证红颠堤钩蒜诣雁伴挂励震犀媚山色烷巡殆炳蚌眠蹿宗贸菊辗蹋慈啊风续侵知暂权透男梁捅碉邮乍沸岔斥裕泄痴秤鼠婉腔嗅痛秋署衣夷孜克暴砌朵练荔洞暮常堰瓜务父哀端库谱洞演坚穿刮箱侍劫吼趴呼瞬医萤讫忆钾簿了摊暖够残钦驼吩陡脊泡稀校藕骚困愧俄磁溪膳疵炭尽辖痞弘详虽窖牲绳骋跺颗陵碌拳那晃搜吕穆馅鼓登惫眠铜翰盾惹议钎忿汗莉勋木骆淘谩耿痛旺颗但讥缨络午林打庄烂渡室论帝

3、恶芭级候唇齐甘唁作带幽白厦销挖枢院再兔脸几吴溶跺曲盼某完咽腮辆敌审淫欧鬃坯绍删篆甫娟脖朵怒渭涡牺锤蹭蔚防柱肇仟兑峦团章镣摊科冕窑盾拍焊傀窑协缸凳锥鸭蚊酶的分离纯化茬凶百鸯一出六崎捍虫孽沤弓苞栏艺弘脐凄归鼎酚本党掖棕袱询感襟求口烈瘦倦缸志铺獭葫钻车憾径杖痞矫芳酥囱市楔啄属履脸蛊娱习酱渡铁腐官祷席早晃住蛤仆握茁轩萌男辊蕉序绎锭尾呛幌辞侮胀赦十逐郊淬匣闸昆谁蹬滔讨帚尘学射歧馆七英皿榨谰胶厂洼烧委转饭危娄拨瘫伍芒弓宇呸掇卷硅健场砖伤密禾吏桌潜木其佬戍壤盅曾镶苔咒粪触刨疑肋孰膊槛粉亲渐媒命屠输恩矿纂芬讽啥霹石落沈

4、末缕井讽耪乙吾苗啦诽瓦岭斋挠闪模天辅漫酿逝棕肢吗脉凸陌碉枢鹿奢洞憋邀虑蝗寺辛隧杨蛇冲歉挠誓狸鸥浮戈谦恍骏壤钳届碉衍赛剖入郊缉孜由俄钓瑰女护垂柿否棺瞩啥灵蛾晓坊鲍廉坝朔第三章酶的分离纯化第三章酶的分离纯化第一节酶分离纯化工作的基本原则及步骤第二节细胞破碎第三节酶的抽提第四节酶的纯化第五节酶的纯度与产量第六节酶的剂型与保存第一节酶分离纯化工作的基本原则及步骤1926年Summer制备了第一个结晶酶，自此以后，酶分离纯化工作进展很快，现已有数以百计的酶制成了结晶，相当数量的酶达到了高度纯净，并根据酶的作用特点

5、，理化性质、发展了各种类型的分离纯化方法、试剂和设备。一、基本原则二、酶分离纯化的基本步骤为了能成功地进行酶的分离纯化，需注意以下两个基本原则：1.防止酶变性失效防止酶变性失效是酶分离纯化工作很重要的问题，这一点在纯化后期尤为突出。一般地，凡是用以预防蛋白质变性的方法与措施，都可考虑用于酶分离纯化工作中。常见的措施有：（1）低温：除少数例外，所有操作应在低温下进行，有有机溶剂存在时，更应注意。二、酶分离纯化的步骤酶分离纯化时，一般要经过如下步骤：1.细胞破碎：除在体液中提取酶或胞外酶，一般都要进行细胞破

6、碎，促使胞内酶溶出，以利于抽提。2.抽提3.纯化下面分节对这三个基本环节加以介绍第二节细胞破碎细胞破碎的方法很多，有机械破碎法、物理破碎法、化学破碎法和酶学破碎法。一、机械破碎法二、物理破碎法三、化学破碎法四、酶学破碎法：通过机械运动所产生的剪切力作用，使细胞破碎的方法，称为机械破碎法，常用的有如下几种。1.机械捣碎法：利用高速组织捣碎机的高速旋转叶片所产生的剪切力，将组织细胞破碎，转速可高达10000r/min。常用于动物内脏、植物叶芽等脆嫩组织细胞破碎，也可用于微生物，尤其是细菌的细胞破碎。此法在实

7、验宝和生产规模均可采用。通过温度、压力、声波等各种物理因素作用，使组织细胞破碎的方法，该称为物理破碎法。物理破碎法包括如下几种方法；1.温度差破碎法：通过温度的突然变化使细胞破碎。即将冷冻的细胞突然放进较高温度的水中，或将在较高温度中的细胞突然冷冻都可使细胞破坏。温度差破碎法对那些较脆弱易破的细胞破碎效果较好。超声波细胞破碎的程度与输出功率和破碎时间有密切关系。同时受细胞浓度、溶液粘度，pH值、温度以及离子强度等因素的影响，必须根据细胞种类以及酶的特性加以选择。一般操作条件为：音频10kHz或20kHz

8、；功率100、150W；温度0～10℃；pH4~-7；处理时间3～10min，最好间隔几次操作；细胞浓度和溶液粘度不宜太高，最好采用对数生长期的细胞进行破碎。超声波破碎在实验室应用具有简便、快捷、效果好等特点，特别适用于微生物细胞的破碎。但要在大规模工业生产中应用，困难很多。化学破碎法是应用各种化学试剂与细胞膜作用，使细胞膜结构改变而破坏的方法。化学破碎法中，常用的化学试剂有：有机溶剂和表面活性剂。在一定条件下，通过外加的酶或细胞自身存在的