soilpure超纯土壤基因组dna快速提取试剂盒操作方法及步骤说明书

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1、杭州昊鑫生物科技股份有限公司htpp://www.hzhxbio.com◆TRIpureReagent抽提指南◆目录号RP02◆使用手册◆实验室使用，仅用于体外◆TRIpureReagent抽提指南◆目录号RP02◆使用手册◆实验室使用，仅用于体外◆TRIpureReagent抽提指南◆目录号RP02◆使用手册◆实验室使用，仅用于体外SoilPure超纯土壤基因组DNA快速提取试剂盒目录号：DN27目录编号包装单位DN270150次v适用范围：适用于快速提取各种土壤基因组DNAv试剂盒组成、储存、稳定性：试剂盒组成保存50次溶液SU

2、S室温25ml溶液LYS室温6ml溶液S1室温15ml溶液S2室温15ml溶液S3室温30ml第一次使用前，请加2倍体积无水乙醇抑制物去除液IR室温25ml漂洗液WB室温15ml第一次使用前，请加60ml无水乙醇洗脱缓冲液EB室温10ml蛋白酶K粉（可选）20mg/ml-20℃20mg吸附柱AC和收集管室温50套本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。-5-杭州昊鑫生物科技股份有限公司htpp://www.hzhxbio.com储存事项:1.溶液LYS或者抑制物去除液IR低温时可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解

3、，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用,注意不要剧烈摇晃，以免产生大量气泡。2.为避免降低活性，方便运输，提供蛋白酶K为冻干粉状，收到后，可短暂离心后，加入1毫升灭菌水溶解，因为反复冻融可能会降低酶活性，因此溶解后立即按照每次使用量(20微升)分装冻存，－20℃保存。3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。v产品介绍：普通的手提或者试剂盒提取的土壤基因组DNA由于常常残留有PCR的强烈抑制物如腐殖酸、棕黄酸等杂质造成实验失败，此外，由于采用了剧烈的玻璃珠击打来破裂菌体，常常造成DNA剪切和降

4、解。本公司经过长期研发开发出了具有自主知识产权的土壤基因组DNA，通过专利配方的腐殖酸和棕黄酸去除试剂配合特殊处理的纯化柱，可以最大程度的去除这些杂质，同时加上多次柱漂洗，确保得到的DNA具有极高纯度，此外独特的抽提和裂解体系可以迅速裂解细胞（壁）和灭活细胞内核酸酶，不需要借助玻璃珠破壁，有效保证了基因组DNA的完整性。v产品特点：1.本公司独有的专利配方和纯化柱能有效去除腐殖酸等杂质。2.不需要借助玻璃珠破壁，有效保证了基因组DNA的完整性，长度可达30kb-50kb，可直接用于PCR，Southern-blot和各种酶切反应。3

5、.兼容性强，适用于各种不同的土壤包括淤泥等提取困难的土壤。4.多步骤去除各种杂质和抑制物，保证了极高纯度，OD260/OD280典型的比值达-5-杭州昊鑫生物科技股份有限公司htpp://www.hzhxbio.com1.7～1.9。1.不需要使用有毒的苯酚等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。2.快速，简捷，单个样品操作一般可在60分钟内完成。v注意事项1.所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机，如Eppendorf5415C或者类似离心机。2.开始实验前根据需要将水浴预热到37℃或者70℃备用。

6、3.溶液S3和抑制物去除液IR中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。4.洗脱液EB不含有螯合剂EDTA，不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱，但应该确保批pH大于7.5，pH过低影响洗脱效率。用水洗脱DNA应该保存在－20℃。DNA如果需要长期保存，可以用TE缓冲液洗脱（10mMTris-HCl，1mMEDTA，pH8.0），但是EDTA可能影响下游酶切反应，使用时可以适当稀释。v操作步骤：（实验前请先阅读注意事项）提示：第一次使用前请先在漂洗液W

7、B和溶液S3中加入指定量无水乙醇，充分混匀，加入后请及时在方框打钩标记已加入乙醇，以免多次加入!1.取0.2克土壤放入离心管，用牙签或者枪头捣碎后加入0.5ml溶液SUS，用枪头搅拌后短暂涡旋帮助重悬。如果预计土壤里面含有较多难裂解的菌类如革兰氏阳性菌，可先在0.5ml溶液SUS里面加入10mg的溶菌酶，吹打混匀后再加入，并加做步骤2。2.（可选步骤）:37℃温育30分钟，每10分钟颠倒混匀几次。对于难裂解的菌类如革兰氏阳性菌-5-杭州昊鑫生物科技股份有限公司htpp://www.hzhxbio.com含量丰富的土壤，并在上一步骤加

8、入了溶菌酶的样品，需要加做此步骤来帮助裂解。1.加入20μl蛋白酶K(20mg/ml)溶液，短暂涡旋帮助混匀。可选做步骤:为提高产量，可以在37℃振荡10分钟或者涡旋振荡2分钟。（注意涡旋振荡可能剪切DNA）2.加入120μl溶液LY