组织 细胞基因组dna快速提取试剂盒操作方法及步骤说明书

《组织 细胞基因组dna快速提取试剂盒操作方法及步骤说明书》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、组织细胞基因组DNA快速提取试剂盒操作方法及步骤说明书杭州昊鑫生物科技股份有限公司htpp://www.hzhxbio.com组织/细胞基因组DNA快速提取试剂盒目录号：DN07目录编号DN0701DN0702DN0703DN0711DN0712DN0713?适用范围：适用于快速提取各种动植物细胞/组织基因组DNA?试剂盒组成、储存、稳定性：保存室温室温室温室温室温室温-20℃室温室温包装单位50次100次200次50次(带蛋白酶K粉)100次(带蛋白酶K粉)200次(带蛋白酶K粉)试剂盒组成平衡液裂解液TL结合液CB抑制物去除液IR漂洗液WB

2、洗脱缓冲液EB蛋白酶K粉（可选）20mg/ml吸附柱AC收集管（2ml）50次5ml11ml11ml25ml100次10ml20ml20ml50ml200次20ml40ml40ml100ml15ml25ml50ml第一次使用前按说明加指定量乙醇15ml20mg50个50个15ml2×20mg100个100个15ml×24×20mg200个200个本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果-1-杭州昊鑫生物科技股份有限公司htpp://www.hzhxbio.com储存事项:1.结合液CB或者抑制物去除液IR低温时可能出现析出和沉淀，可以在37℃水

3、浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。2.为避免降低活性、方便运输，提供蛋白酶K为冻干粉状，收到后，可短暂离心后，加入1ml灭菌水溶解，因为反复冻融可能会降低酶活性，因此溶解后立即按照每次使用量(20微升)分装冻存，－20℃保存。3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。?产品介绍：独特的结合液/蛋白酶K迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶，然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜，再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤，抑制物去除液和漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除，最

4、后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱。?1.产品特点：离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。2.3.4.不需要使用有毒的苯酚等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。快速，简捷，单个样品操作一般可在30分钟内完成。多次柱漂洗确保高纯度，OD260/OD280典型的比值达1.7～1.9，长度可达30kb-50kb，可直接用于PCR，Southern-blot和各种酶切反应。-2-杭州昊鑫生物科技股份有限公司htpp://www.hzhxbio.com

5、?1.注意事项所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机，如Eppendorf5415C或者类似离心机。2.3.4.需要自备1XPBS(磷酸盐缓冲液),和异丙醇。实验前将需要的水浴先预热到70℃备用。结合液CB和抑制物去除液IR中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。5.洗脱液EB不含有螯合剂EDTA，不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱，但应该确保批pH大于7.5，pH过低影响洗脱效率。用水洗脱DNA应该保存在－20℃。DN

6、A如果需要长期保存，可以用TE缓冲液洗脱（10mMTris-HCl，1mMEDTA，pH8.0），但是EDTA可能影响下游酶切反应，使用时可以适当稀释。?1.关于平衡液的使用介绍：核酸吸附硅胶膜柱子长期放置过程中会同空气中的电荷/尘埃发生反应而影响其核酸的结合能力。硅胶柱经平衡液预处理后可大大减少柱子中硅胶膜的憎水基团，提高核酸的结合能力。从而提高硅胶柱子回收效率或者产量。平衡液是强碱性溶液，若不小心碰到，请用大量自来水清洗。用完后需盖紧瓶盖，以免接触空气。室温保存。在保存过程中可能有沉淀生成，请加热至37℃使沉淀完全消失。2.使用方法：取一个

7、新的硅胶膜吸附柱子装在收集管中，吸取100μl的平衡液至柱子中。13000rpm离心1分钟，倒掉收集管中废液，将吸附柱子重新放回收集管。此时平衡液预处理柱子完毕。接后续的操作步骤。-3-杭州昊鑫生物科技股份有限公司htpp://www.hzhxbio.com?操作步骤：（实验前请先阅读注意事项）提示：第一次使用前请先在漂洗液WB中加入指定量无水乙醇，充分混匀，加入后请及时在方框打钩标记已加入乙醇，以免多次加入!提示：平衡液预处理吸附柱备用：使用平衡液预处理硅胶膜吸附柱为必做步骤，具体方法参见前文“关于平衡液的使用”。1.组织培养细胞a.收集约1

8、05-106悬浮细胞到一个1.5ml离心管；对于贴壁细胞，应该先用胰蛋白酶消化后吹打下来收集。b.13,000rpm离心10秒，使细胞沉淀下来。弃上清