蕨类植物抱石莲的化学成分及抗氧化活性研究-中药学专业毕业论文

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1、广州中医药大学学位论文原创，l生声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是个人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经特别加以注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名猛竭盔受日期：20匹年S月2占日关于学位论文使用授权的声明本人完全了解广州中医药大学有关保留使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门机构送交论文的复印件

2、和电子版，允许被查阅和借阅。本人授权广州中医药大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。(保密论文在解密后应遵守此规定)论文作者签名砸论文新签名塑到多日期：20fS年S月嬲日摘要目的：蕨类植物(Pteridophyte)，又名羊齿植物，是植物发展史上一个特殊的分支，它们在种质和代谢方面表现出多样性。在植物分类系统中，蕨类植物是介于苔藓植物和种子植物之间的一个类群，既是维管束植物又是孢子植物。蕨类植物在世界各地分布广泛，目前全

3、世界约有蕨类植物1．2万种，我国约有2600多种，约占世界总数的1／5，是世界上蕨类植物种类较多的地区之一，其中有396余种可供药用。蕨类植物应用领域广泛，特别是在医药保健、食品、观赏、绿化、工业等方面，其经济利用价值受到人们的广泛关注。药用蕨类植物富含多种天然活性成分，其所具有的生物活性如抗菌、抗病毒、抗氧化和抗肿瘤等作用近年受到国内外学者的重视，具有极大的开发前景。文献研究表明，目前仍有一些种类的活性成分尚未被充分认识，且临床应用较少，为了更好地开发利用药用蕨类植物资源，对其进行化学成分及生

4、物活性的研究具有十分重要的意义。抱石莲(Lepidogrammitisdrymoglossoides(Bak．)Ching)为水龙骨科(Polypodiaceae)骨牌蕨属(Lepidogrammitis)的蕨类植物，广泛分布于长江流域以南各省区。它为贵州苗族、侗族民间常用药物，常用于治疗毒蛇咬伤、跌打损伤、内外伤出血、疔疮疱疹等病症。以抱石莲为主药之一制成的制剂“复方蛇鳞草”及“复方蛇鳞草膏”，在临床中治疗毒蛇咬伤、甲沟炎等均取得了确切疗效。但目前关于抱石莲活性成分研究的报道较少，本课题组对抱

5、石莲的化学成分及其生物活性进行了系统深入的研究，为抱石莲药材的质量控制及其药用植物资源的进一步开发利用提供依据。方法：本文对抱石莲的化学成分进行了系统的研究，并对其各提取部位及分离得到的单体化合物进行了体外抗氧化活性的筛选；运用HPLC法对分离得到的新化合物进行了含量测定。抱石莲干燥全草21Kg，以95％乙醇溶液加热回流提取2次，每次2小时，合并2次提取液，减压浓缩得浸膏(1．2kg)。浸膏以适量蒸馏水分散，依次以等体积的石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取，减压回收溶剂分别得石油醚(239．5g

6、)、氯仿(132．0g)、乙酸乙酯(56．0g)、正丁醇(122．5g)四个提取部位。采用硅胶、SephadexLH．20、大孔吸附树脂等柱色谱及高效液相色谱技术对上述四个部位进行分离纯化，得到单体化合物。综合运用紫外光谱(UV)、红外光谱(IR)、质谱(MS)及核磁共振光谱(1H-NMR、¨C-NMR、DEPT、‘H．1HCOSY、HSQC、HMBC、NOESY)等波谱学技术，结合化合物的理化性质对所得单体化合物的化学结构进行鉴定。选用外源性自由基清除实验和体外细胞实验对抱石莲的各提取部位及所

7、得单体化合物进行体外抗氧化活性的筛选。外源性自由基清除实验包括DPPH自由基清除实验、ABTS’+自由基清除实验、羟基自由基(·OH)清除实验；体外细胞实验采用永生系小鼠海马神经元HT22细胞，通过MTT法检测对谷氨酸(Glu)诱导的HT22细胞损伤的抑制活性来评价抱石莲部分单体化合物的抗氧化活性。采用高效液相色谱(HPLC)法，对新化合物(filic．3．ene一28oicacid，化合物1)进行含量测定。色谱条件如下：Agilent1260Infinity高效液相色谱仪系统；Diamonsi

8、lTMC】8(250mm×4．6mm，5肛m)色谱柱；流动相：乙腈(B)一0．5％磷酸水(A)(87：13)；流速：1．0mL·min～；进样量：20此：检测波长：205nm。成果：从抱石莲全草的石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇部位共分离得到31个化合物，鉴定了其中29个成分，包括1个新化合物(1)：filic．3一ene．28oicacid(ZLD—1)、矗一蜕皮甾酮(ZLD．2)、豆甾醇(ZLD一3)、伊谷甾醇(ZLD-4)、伊胡萝卜苷(ZLD．5)、里白醇(ZLD一6)、乌苏酸(ZLD．7)