苹果mddrb1基因及2个相关mircornas编码基因的功能鉴定-果树学专业毕业论文

《苹果mddrb1基因及2个相关mircornas编码基因的功能鉴定-果树学专业毕业论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、关于学位论文原创性和使用授权的声明本人所呈交的学位论文，是在导师指导下，独立进行科学研究所取得的成果。对在论文研究期间给予指导、帮助和做出重要贡献的个人或集体，均在文中明确说明。本声明的法律责任由本人承担。本人完全了解山东农业大学有关保留和使用学位论文的规定，同意学校保留和按要求向国家有关部门或机构送交论文纸质本和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权山东农业大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文，同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文

2、全文数据库》，并向社会公众提供信息服务。保密论文在解密后应遵守此规定。论文作者签名：幺概疑导师签名：触5，日期：≯沙，反ff万方数据符号说明Amp：Ampicillin，氨苄青霉素Bp：Basepair,碱基对CaMV35S：35Spromoterofcaliflowermosoicvirus，花椰菜花叶病毒35S启动子cDNA：ComplementaryDNA，互补DNAddH20：Distilledanddeionizedwater,超纯水dNTP：Deoxyribonucleosidetriphosphat，脱氧核糖核苷三磷酸DC

3、L1：DICER-LIKE1，RNaselII酶DNA：Deoxyribonucleicacid，脱氧核糖核酸DEPC：Diethylpyrocarbonate，焦碳酸二乙酯DRB1：doubleRNAbindingprotein，双链RNA结合蛋白E．coli：Escherichiacoli，大肠杆菌EB：Ethidiumbromide，溴化乙锭IPTG：IsopropylthiobDgalactoside，异丙基bD硫代半乳糖苷Kan：Kanamycin，卡那霉素LB：Luria-Bertanimedium，LB培养基MicroRN

4、A：miRNA，小分子RNAMd：Malusdomestic，苹果mg：Milligram，毫克min：Minute，分钟NACl：NAM／ATAF／CUC，含有NAM／ATAF／CUC结构域的基因OD：Opticaldensity,光密度ORF：Openreadingframe，开放阅读框pH：Pondushydrogenii，氢氧离子浓度指数PCR：Polymerasechainreaction，聚合酶链式反应RISC：RNA·inducedsilencingcomplex，RNA诱发的基因沉默复合体RNA：Ribonucleica

5、cid，核糖核酸Rpm：Revolutionsperminute，转／分钟RT-PCR：ReversetranscriptionPCR，反转录PCR万方数据Rif：Rifampicin，利福平SE：C2H2Zn．fingerproteinSERRATE，C2H2锌指型锯齿状蛋白gg：Microgram，微克WT：Wild．type，野生型YEP：Yeastextractandpeptonemedium，YEP培养基万方数据目录中文摘要I英文摘要III1前言11．1生长素的相关研究．．11．1．1生长素的重要性一11．2HYLl(DIml

6、)以及相关miRNAs的研究．11．2．1植物中HYLl调控的miRNAs的研究．11．2．2果树MircoRNAs的研究进展．．31．2．3HYLl(DRBl)对生长素的响应31．2．4miRl56和miRl72的相关研究41．2．5苹果中HYLl基因的初步分析。51．3本研究的目的和意义．．62材料和方法一82．1实验材料．．82．1．1植物材料82．1．2菌株及载体82．1．3酶、试剂盒、引物合成及测序82．1．4试剂材料82．1．5实验仪器92．2实验方法．．92．2．1植物基因组DNA的提取92．2．3反转录cDNA第一链的合

7、成102．2．4苹果MdDRBl基因克隆与载体构建112．2．4．1拖缈尺8J序列的扩增．．112．2．4．2MdDRBl表达载体的构建．．112．2．4．3PCR扩增产物的回收．122．2．2．4PCR回收产物连接载体．122．2．5大肠杆菌感受态细胞DH5a转化13万方数据2．2．6根癌农杆菌LBA4404感受态细胞的制备与转化132．2．6．1电击法制备农杆菌感受态细胞．．132．2．6．2电击法转化农杆菌．．142．2．7农杆菌介导的番茄转化142．2．8农杆菌介导的苹果转化142．2．9转基因植株的基因组DNA鉴定．142．2

8、．10转基因植株的RT-PCR分析．．152．2．1l相关生理指标测定．．163结果与分析．．173．1MdDRBl基因过量表达载体的构建173．2番茄中MdDRBl过量表达转基因植株的获得．．173．3生