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《lc纬2銆丳kc伪銆丳kb鍦═pa璇卞鑳冪檶缁嗚優鍑嬩骸涓殑鐩镐簰浣滅敤鏈虹悊》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、Y学校编码：10384分类号密级学号：200026006UDC履孝勺t文霉博士学位论文PLC吖2、PKCa、PKB在TPA诱导胃癌细胞凋亡中的相互作用机理TheMechanismsofInteractionforPLC-72，PKCaandPKBinTPA—InducedApoptosisinGastricCancerCells张兵指导教师姓名．I吴乔教授专业名称：动物学论文提交日期：2006年11月3日论文答辩时间：2006年l2月6日学位授予日期：2006年月日答辩委员会主席：陈奕欣教授评阅人：，●●Lr卜●}}■■●■■■■■r，200

2、6年11月／，●、、、，，I＼(究成果。本人以明确方式标声明人(签名)：孑弛w秒莎年l≯，月f2日"'j厦门大学学位论文著作权使用声明本人完全了解厦门大学有关保留、使用学位论文的规定。厦门大学有权保留并向国家主管部门或其指定机构送交论文的纸质版和电子版，有权将学位论文用于非赢利目的的少量复制并允许论文进入学校图书馆被查阅，有权将学位论文的内容编入有关数据库进行检索，有权将学位论文的标题和摘要汇编出版。保密的学位论文在解密后适用本规定。本学位论文属于／-、1、保密()，在多年解密后适用本授权书。2、不保密()(请在以上相应括号内打“4”)f作者

3、签名：；搓岳日期：础胗月房日导师签名：夏+香日期：2印乡年似月眇日目录中文摘要．．1英文摘要．．5第一章前言1．1蛋白激酶C．．101．2磷酯酶C吖．．201．3蛋白激酶B．．281．4本文研究目的与意义36第二章材料与方法2．1材料．．402．2实验方法2．2．1细胞培养．432．2．2质粒构建．442．2．3瞬时转染．462．2．4免疫印迹472．2．5免疫荧光分析482．2．6核浆分离．482．2．7免疫共沉淀．．492．2．8蛋白激酶活性测定492．2．9BrdU检测．502．2．10泛素化检测502．2．11免疫组化51III第三章

4、结果与分析3．1PLC吖2和PKC0【在TPA诱导细胞凋亡中的相关性3．1．1TPA诱导胃癌细胞凋亡533．1．2TPA上调PLC-丫2表达和诱导其核浆转运．．553．1．3PLC吖2蛋白表达与TPA诱导的胃癌细胞凋亡的关系583．1．4PKCot参与TPA诱导的细胞凋亡．．613．1．5PKCa介导PLC吖2对胃癌细胞凋亡的作用663．2PKCc兄在TPA诱导PKB磷酸化和降解中的调节作用3．2．1TPA通过泛素．蛋白酶体途径诱导PKB降解713．2．2TPA降解PKB与磷酸化的相关性．．753．2．3PKCcc参与TPA诱导的PKB降解和

5、磷酸化．．803．2．4PKCcz在细胞核调节PKB．893．2．5PKCa抑制PKB调节胃癌细胞的生物学功能1013．2．6人胃痈组织中PKCa与PKB蛋臼表达的利关性．．104第四章讨论4．1PLC．Y2和PKCa在TPA诱导细胞凋亡中的相关性1094．2PKCct在TPA诱导PKB磷酸化和降解中的调节作用．．．．．115参考文献127致谢160IVTableofContentsAbstractinChinese．1AbstractinEnglish．5ChapterIIntroduction1．1ProteinkinaseC．1()1．

6、2Phosphoinositide—specificphospholipase-7201．3ProteinkinaseB．．．．．．．．．．．．．．．．：!l；1．4Purposeofstudyforthisthesis．．36ChapterIIMaterialsandMethods2．1Materials．．．．．．．．．．．．．．．．．．402．2Methods2．2．1Cellculture．．．432．2．2Plasmidconstruction．．．．442．2．3Transienttransfection462．2．4Wester

7、nblotting．472．2．5Immunofluorescentanalysis．．．482．2．6Preparationofnuclearandcytoplasmicfractions．．482．2．7Immunoprecipitationassay．492．2．8Proteinkinaseactivityassa．492．2．9BrdUassay．502．2．10Ubiquitinationassay．．502．2．11Immunohistochemistry．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．51VCha3．13．2phosph

8、orylationofPKB3．2．1TPAinducesPKBdegradationbytheUbiquitin-proteasomepathway7l3．2．2