e3泛素连接酶fbw7α通过下调cmyc和cycline的蛋白表达抑制胆管癌细胞的增殖

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1、优秀毕业论文厦门大学学位论文著作权使用声明flUYllll3llllll。llllll2llllll4llllll7llllllllll9llllllll本人同意厦门大学根据《中华人民共和国学位条例暂行实施办法》等规定保留和使用此学位论文，并向主管部门或其指定机构送交学位论文(包括纸质版和电子版)，允许学位论文进入厦门大学图书馆及其数据库被查阅、借阅。本人同意厦门大学将学位论文加入全国博士、硕士学位论文共建单位数据库进行检索，将学位论文的标题和摘要汇编出版，采用影印、缩印或者其它方式合理复制学位论文。本学位论文属于

2、：()1．经厦门大学保密委员会审查核定的保密学位论文，于年月日解密，解密后适用上述授权。()2．不保密，适用上述授权。(请在以上相应括号内打“√”或填上相应内容。保密学位论文应是已经厦门大学保密委员会审定过的学位论文，未经厦门大学保密委员会审定的学位论文均为公开学位论文。此声明栏不填写的，默认为公开学位论文，均适用上述授权。)声明人(签名)：I勺冉年月日精品参考文献资料优秀毕业论文万方数据精品参考文献资料优秀毕业论文目录目录摘要。1Abstract．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．

3、．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．2第一章前言．31．1胆管癌．31．1．1胆管癌的流行病学特征31．1．2胆管癌的分类31．1．3胆管癌的致病因素31．1．4胆管癌发生的分子机制41．1．5胆管癌的治疗41．2FBW7(F-boxandWDrepeatdomain·containing7)51．2．1泛素-蛋白酶体系统(Ubiquitin-proteasomeSystem．UPS)51．2．2FBW7的发现．61．2．3FBW7的生物学特征．71．2．4FBW7与肿瘤．81．2．4．1FBW

4、7对细胞周期进程的调控．81．2．4．1．1c-myc91．2．4．1．2cyclinE．91．2．4．1．3Notch．101．：!．4．1．4(：-Jun．．1【)1．2．4．2FBW7对细胞凋亡的调控··1l1．2．4．3FBW7对肿瘤转移的调控．．1l1．2．4．4FBW7在肿瘤中的突变··111．2．5FBW7的调节121．3立题背景．．13第二章材料与方法．142．1实验材料．142．1．1菌株l4精品参考文献资料优秀毕业论文万方数据精品参考文献资料优秀毕业论文目录2．1．2细胞142．1．3质粒142

5、．1．4小鼠．142．1．5主要试剂一l42．1．6主要仪器．．152．2实验方法。162．2．1分子克隆相关实验．162．2．1．1大肠杆菌感受态细胞制备·162．2．1．2质粒构建·172．2．1．2．1PCR反应．172．2．1．2．2酶切反应．172．2．1．2．3连接反应．182．2．1．3琼脂糖电泳分离质粒DNA182．2．1．4质粒或DNA片段的胶回收．．182．2．1．5质粒DNA的转化．．192．2．1．6质粒DNA小量抽提(碱裂解法)．202．2．1．7质粒DNA中量提取(Qiagen-tip1

6、00)·202．2．1．8质粒DNA大量提取(CsCI超速离心法)．．2l2．2．2细胞培养．．222．2．2．1细胞培养．222．2．2．2细胞传代222．2．2．3细胞复苏．222．2．2．4细胞冻存．222．2．3细胞转染．．232．2．3．1细胞瞬时转染．232．2．3．2si．RNA转染242．2．3．3慢病毒包装和感染．252．2．4MTT测细胞生长．252．2．5克隆形成实验．．262．2．6RNA提取与实时荧光定量PCR262．2．6．1RNA提取262．2．6．2RNA反转录合成eDNA．26II

7、精品参考文献资料优秀毕业论文万方数据精品参考文献资料优秀毕业论文目录2．2．6．3实时荧光定量PCR．272．2．7蛋白质相关实验及方法．272．2．7．1蛋白样品制各．272．2．7．2蛋白质浓度测定(BCA法)282．2．7．3蛋白质的SDS．PAGE电泳282．2．8裸鼠成瘤模型．．29第三章结果与分析．313．1胆管癌细胞株中过表达FBW7a313．2FBW7a抑制胆管癌细胞的增殖3l3．3FBW7a抑制胆管癌细胞的克隆形成能力323．4FBW7a抑制胆管癌细胞中c．myc和cyclinE的蛋白表达．333

8、．5FBW7ail]过泛素蛋白酶体途径调控c．myc和cyclinE的蛋白表达．343．6过表达FBW7a抑制QBC939细胞的裸鼠成瘤能力36第四章讨论．38参考文献40致谢．50IlI精品参考文献资料优秀毕业论文万方数据精品参考文献资料优秀毕业论文CONTENTSCONTENTSAbstract(InChinese)．．．．．．．．．．．．．．．．．．．