bcl2shrna稳定转染联合γ射线对胃癌sgc7901细胞凋亡的影响

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1、优秀毕业论文青岛大学硕士学位论文Bcl--2shRNA稳定转染联合γ射线对胃癌SGC--7901细胞凋亡的影响姓名：王宁宁申请学位级别：硕士专业：肿瘤学指导教师：沈方臻20110601精品参考文献资料优秀毕业论文于两要目的：观察Bcl．2shRNA稳定转染联合Y线照射对胃癌细胞SGC．7901凋亡的影响。方法：构建针对Bcl．2基因的干扰质粒pGPHl／GFP／Neo，经脂质体介导转染SGC．7901细胞，G418筛选稳定表达的细胞株，Y线照射后形成4组细胞分别命名为SGC-7901(A组)，照射／SGC一7901(

2、B组)，Bc卜2shRNA／SGC一7901(C组)，照射／Bcl一2shRNA／SGC-7901(D组)。CCK．8检测细胞增殖，AO／PE观察细胞凋亡，流式细胞仪检测细胞凋亡，Western．blot测定Bcl。2蛋白表达量的改变。结果：Bcl．2shRNA、照射均可抑制Bcl．2蛋白表达，且二者有协同作用，差异有统计学意义(P<0．05)；D组细胞生长慢于B组、C组细胞，B、C、D组细胞增殖抑制率分别为(27±5．27)％，(30．1±6．49)％，(98．4±11．35)％。A、B、C、D组细胞凋亡率分别为(

3、3．80±0．22)％、(20．8±4．15)％、(23．2±4．34)％、(92．9±25．9)％，差异有统计学意义(尸

4、triccarcinomacelllineSGC一7901objective：Toobservetheeffectofbcl-2gene—specificRNAinterferenceonapotosisandradiosensitivityofgastnccarcinomacelllineSGC7901．Methods：TherecombinanteukaryoticexpressionvertorpGPH1／GFP／Neoanddesignedtotargetbcl-2genebylipofectaminmedi

5、atedgenetransfectionintoSGC7901．ThepositivecloneswereselectedwithG418，afterYirradiation．4．groupcellswereformed：SGC．7901(Agroup)．irradiation／SGC．7901．(Bgroup)，Bcl一2shRNA／SGC-7901(Cgroup)，irradiation／Bel一2shRN～SGC．7901(Dgroup)．CellproliferationwasdetectedbyCCK一8．

6、CellapoptoticwasobservedbyAO／PE．Theapoptoticratewasdeterminedbyflowcytometry．朊stemblotwasusedtocomparetheexpressofproteinbetweentransfectioncellsandnontransfectioncells．Results：Westernblotanalysesindicatedthattheexpressionofbcl-2wassuppressedbytheshRNAandirradi

7、ation．ThegrowthofgroupDwasobviouslyslowerthanothergroups(P<0．05)，CellinhibitoryrateofB、C、Dgroupswere(27+5．27)％，(30．1±6．49)％，(98．4±11．35)％。theapoptosisrateofA、B、C、Dwere(3．8±0．22)％．(20．8±4．15)％，(23．2±4．15)％，(92．9±25．9)％．(P

8、Aiandirradiationcaninducecellapoptosis，andobviouslyincreasetheradiosensitivityinhumangastriccelllines．Keywords：Gastriccarcinoma；Bcelllymphoma／lewkmia-2；RNAinterference；Cella