激活或阻断雌激素受体(er)对子宫内膜癌细胞ishikawa内arid1a表达变化的影响

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1、河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师(或指导小组)的指导下，由本人独立完成。本学位论文研究所获得的研究成果，其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文，第一署名为单位河北医科大学，试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则，承担相应法律责任。研究生签名：秘导师签章：乡k＆棠謦学院领导盖章：钞眸了月乡日河北医科大学研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别加以标注和致谢等内容外，文中不包含其

2、他人已经发表或撰写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。研究生签名：导师签章：与¨b-鸽最导师签章：乡数抓护I厂年；月-o日万方数据目录中文摘要1英文摘要4英文缩写7研究论文激活或阻断雌激素受体(ER)对子宫内膜癌细胞Ishikawa内ARjDlA表达变化的影响前言一8材料与方法10结果18附图20附表36讨论44结论51参考文献51综述染色质重塑复合体ARIDlA基因在肿瘤中的研究进展57致谢65个人简历66万方数据中文摘要激活或阻断雌激素受体(ER)对子宫内膜癌细胞Ishikawa内ARIDIA表达变化的影响摘要目的：子

3、宫内膜癌是女性生殖系统最常见的恶性肿瘤之一，其发病率和死亡率在我国有逐渐上升的趋势，且趋于年轻化，严重危害女性健康。子宫内膜癌的发生、发展与很多因素有关，如长期雌激素刺激同时无孕激素拮抗、抑癌基因失活等机制。本课题前期研究发现，TAM具有刺激子宫内膜细胞雌激素受体(estrogenreceptor,ER)作用，即具有雌激素受体激动剂作用，可导致子宫内膜病变，甚至发生子宫内膜癌【13】，而且TAM或雌激素(E2)处理高中低分化的三种子宫内膜癌细胞后ARIDIA表达均明显低于其在未处理子宫内膜癌中的表达，并且细胞周期均表现为G0／G1期缩短，S期延长。ARI

4、D1A(AT-richinteractingdomaincontainingprotein，又称脑蛋自120、SMARCFl、p270等)是染色质重组复合物之一，是新发现的肿瘤抑制基因之一，其低表达与多种肿瘤发生相关。研究发现ARIDlA在低分化子宫细胞癌及透明细胞癌中表达明显降低。Zeng等【3]发现，在胶质瘤细胞中ARIDlA过表达会下调p-Akt及pS6K，这提示ARIDlA可能通过P13K．Akt通路调节细胞增殖。在卵巢透明细胞癌中，ARIDlA缺失与PIK3CA突变呈正相关【4】。在子宫内膜癌中ARIDlA低表达和P13K途径的突变和激活有关【

5、5】。ARIDlA可能与P13K途径存在相互作用，影响Akt的磷酸化水平，从而控制肿瘤细胞的增殖【42】。本课题的前期实验研究证明，在子宫内膜癌细胞中ARIDlA基因与ER基因的表达呈正相关【36】。P13IL／Akt信号通路是细胞内重要信号转导通路之一，参与了细胞增殖、凋亡及分化等功能的调控作用。近年研究表明，在许多肿瘤中发现P13K／Akt通路活性异常，而其通路的活性紊乱不仅能导致细胞恶性转化，并与肿瘤细胞的迁移、黏附及肿瘤血管生成等密切。研究表明，雌激素可以通过结合ER，在一些共激活因子的共同作用下，激活子宫内膜癌细胞中的P13K／Akt信号通路(

6、磷脂酰肌醇一3一激酶／蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶，phosphatidylinositol。3．kinases／protein-serine．threoninekinase)，进而引起万方数据中文摘要细胞发生相应改变【46'47】。ARIDlA基因的缺失是经过何种信号通路导致子宫内膜癌的发生，目前国内外尚无研究。ARIDlA与ER均通过P13K／Akt通路发挥生物学作用，但是ARIDlA基因与ER是否存在直接作用或是否经过P13K／Akt通路相互影响尚不清楚。本实验研究旨在通过采用雌激素受体激活剂(TAM)，或采用ER阻断剂(ICll82780)处理子宫内膜

7、癌细胞株Ishikawa后，观察ARIDlA与ER表达的变化，探究ARIDlA基因在子宫内膜癌细胞发生、发展中的作用，以及ARIDlA是否通过ER的改变来影响P13K／Akt信号通路及可能的作用机制，从而为子宫内膜癌的分子生物学发病机制提供初步的理论依据。方法：1细胞培育：人子宫内膜癌细胞株Ishikawa，以lo％H台牛血清的RPMll640培养液培养，培养于37℃，5％C02、饱和湿度的培养箱内。以O．25％胰蛋白酶消化传代。细胞呈单层贴壁生K，选用对数生长期进行实验。2实时定量qRT．PCR法检测TAM、ICll82780依据不同浓度及不同时间处理

8、子宫内膜癌细胞株Ishikawa后ARIDlA、ERa、ERB、PR、P53、P