elisa检测hiv抗体室内质控血清的制备与应用分析

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1、ELISA检测HIV抗体室内质控血清的制备与应用分析摘要：目的探讨分析ELISA检测HIV抗体室内质控血清的制备与临床应用。方法应用ELISA对我血库收集的血液标本32000份进行HIV抗体检测；同时选择正常人群血清与试剂盒内HIV阳性血清混合稀释，混合恰当比例，冷藏保存使用；同时将自制的质控血清保存1〜12个月，对其均匀性、精确性及稳定性进行评价。结果ELISA法检测结果显示阳性115例，阳性率为0.36%，实际上HIV抗体为阳性共120例，漏诊率为0.016%；研究结果显示正常人群的血清与试剂盒内HIV阳性血清以10:

2、1的比例进行混合最为恰当；对自制的质控血清为期1〜12个月的观察，发现其均匀性、S/CO值、准确性12个月的差异不显著(P0.05)，无统计学意义，见表1。3讨论自从1981年在美国发现首例由人类免疫缺陷病毒(HIV)引起的艾滋病以来，人类一直在与其进行着不懈的斗争。各类检测方法及检测手段都在不断改进和更新。目前，在HIV初筛实验中使用的第三代酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂，不仅包被的抗原高度纯化，且采用重组和多肽相结合的技术。双抗原夹心法的应用使HIV抗体需两次选择，大大提高了敏感性，使漏检率明显下降。但该检测方法对

3、检测人员的操作技术及试验条件要求较高，易出现假阳性等。因此，开展实验室质量控制是保证实验室分析结果准确性的必要基础，也是保证实验间有可比性的关键。随着艾滋病流行形势的日趋严峻，新发现的感染者数量不断增加，艾滋病检测也显得越来越重要。目前国内检测HIV抗体的方法主要是酶联免疫法（ELISA）。2004年版的《全国艾滋病检测技术规范》要求采用ELISA法时必须要包含内部和外部对照质控血清，其中外部对照质控血清是为了监控检测的重复性和稳定性以及试剂盒批间或孔间差异，通常为弱阳性对照，以该试剂盒临界值（Cut-off值）的2〜3倍

4、为宜。HIV病毒主要侵入机体的T淋巴细胞［2］，与细胞结合而存在于血液之中，HIV抗体分布于患者的血液、精液、阴道分泌物、唾液、尿液之中，然而在血液、精液、阴道分泌物中浓度最高。近些年，感染HIV病毒的患者逐年上升，影响患者的身心健康、对生命安全产生威胁［3］，现阶段仍无有效的治疗方法，主要停留在预防控制阶段，因此及时的诊断并加以控制十分关键［4］。临床上对HIV抗体的检测需要通过建立HIV抗体检测质量系统，有其特殊性，因此做好实验室的质量管理从而确保检测结果的准确可靠［5］。卫生部门的规章制度明确规定临床上对HIV抗体的

5、检测需包含外部与内部质控血清两部分，主要是由于处于临界值上下的弱阳性外部对照质控血清，使得反应强度改变较易察看；然而为了保证HIV抗体检查结果的可靠准确，在应用ELISA法检测过程中需要有弱阳性对照质控血清，但是在临床检测中，医院由于较难获取HIV阳性抗体标本而需要通过自制质控血清。本文主要对ELISA检测HIV抗体室内质控血清的制备与应用分析[6]，研究发现显示正常人群的血清与试剂盒内HIV阳性血清以10:1的比例作为自制质控血清的浓度最为合适，且于对自制的质控血清进行1〜12个月的评估，结果显示其均匀性、S/C0值、准

6、确性12个月无显著变化，表明自制质控血清较为稳定，能够作为HIV抗体室内质控血清，但是其存在挥发的可能性，因此质控血清使用次数需〈7次，分装合理。综上所述，ELISA在HIV抗体的检测中具有较高的准确度，且检测结果能够在短时间内反映，值得临床推广应用；同时发现自制质控血清经济方便，且具有稳定性高的优点，具有较大的应用前景。参考文献：[1]韦雪芳.ELISA检测HIV抗体室内质控血清的制备[J].检验医学与临床，2011，8(20)：2527-2528.[2]罗雯斌.探讨ELISA法检测HIV抗体的影响因素[J].检验医学与

7、临床，2010，7(20)：2252-2253.[3]乔健健.直接ELISA法与间接ELISA法检测HIV抗体的对比分析[J].中国实用医药，2012,7(21)：111-112.[1]刘建军，李永明.ELISA检测HIV抗体的影响因素及质量控制措施[J].基层医学论坛，2012，16(17)：2231-2232.[2]胡静云，陈善昌.ELISA检测HIV抗体室内质控血清的制备与应用[J].实验与检验医学，2009,27(5)：553,568.[3]赵建明.ELISA法检测HIV抗体的质量控制[J].医学信息：上旬刊，20

8、10，23(15)：2962.[4]陈慧英，张锦锋，岑小鹏.ELISA检测乙型肝炎HBsAg室内质控血清的试制和使用[J]-上海医学检验杂志2000(04)：56-57[5]丛令，蒋虹，金光，等.SHIV1157ipd3N4中国恒河猴细胞适应株静脉感染中国恒河猴有效浓度的确定[J].中国比较医学杂志，2