合浦珠母贝遗传选育及两种免疫基因分析

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2、Y1947010上海海洋大学学位论文原创性声明本人郑重声明：我恪守学术道德，崇尚严谨学风。所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经明确注明和引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体●已经发表或撰写过的作品及成果的内容。论文为本人亲自撰写，我对所写的内容负责，并完全意识到本声明的法律结果由本人承担。’!’学位论文仨者签名：鲥伽闩期：乞如，年多月，，2FII上海海洋大学学

3、位论文版权使用授权书学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，●同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅或借阅。本人授权上海海洋大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印，缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密口，在年解密后适用本版权二}5。靴论姗者学名：锹佣坛本学位论文属于●ft期：扣年Z月店日J冀币L1签训名#、p力.，'•上海海洋大学硕士学位论文答辩委员会成员名单姓名工作单位职称备注●穗怠厶上涵≯毛》蕃文≥存矿￡．主席撇≥土别

4、L／髟∥承报委员麦【夏￡鳞物彀堋移蝮委员-委员委员委员●委员考瞄L枷奶于确钢影鲫岩多、秘书答辩地点南海水产研究所答辩日期2011．6．12●•••合浦珠母贝遗传选育及免疫基因研究摘要●合浦珠母贝(Pinctadafucata)又称马氏珠母贝，是世界上培育海水珍珠的丰耍种类之一，在我国主要分布于广东、广西、海南及台湾省沿海，我国合浦珠母贝所产珍珠即为国际上享誉盛名的“南珠”。海水珍珠养殖产业是我国华南沿海地区的特色经济支柱产jlk之一。近年来，南于海区污染、养殖病害频发和种质资源衰退，致使养殖合浦珠母贝出现了死产率高

5、、生长缓慢等现象，造成了巨大的经济损欠，成为制约海水珍珠养殖产业可持续发展的技术瓶颈之一。因此，急需开展合浦珠母贝遗传选育和分子免疫调控机制研究，培育具有优良性状的新品种，发展新的免疫防治策略，促进合浦珠母贝养殖产业的健康发展。本研究在前期选育的基础上，以F3代不同壳色品系合浦珠母贝为亲本，构建了F4代不同壳色选育家系，利用伞同胞家系评价了生长性状的遗传力水平；筛选克隆了合浦珠母贝过氧化氢酶(Catalase，PoCAT)和抗菌肽theromacin●(antimicrobialpeptides，PoAP)基冈，研

6、究了其组织表达和调控模式，检测了重组抗菌肽的抗菌活性，证实了其对革兰氏阴性菌具有强烈的抑菌作用，而对革兰氏阳性菌无抑菌作用。具体结果如下：1、合浦珠母贝壳色家系的建立及生长性状的比较采用雌雄单个配对，成功建立合浦珠母贝壳色全同胞家系20个。对其6个月龄的生长性状进行了比较，结果表明，BSF4．3、RSF4．1、RSF4．2和RSF4．5具有明显的生长优势，可作为进一步定向培育生长快速、个体大的合浦珠母贝的材料。壳宽系数的比较发现，BSF4．3壳宽系数最大，RSF4．5、WSF4．2、WSF4．3则次之。RSF4—1

7、与RSF4．2相对较低。对不同壳色选系生长比较发现红色选系和黑色选系存在明显的生长优势，显著性大于其他壳色选系。其次为金色选系，而●白色选系的生长最慢。2、合浦珠母贝幼体生长性状的遗传力及其相关性分析以海南陵水新村港养殖的金壳(Gp)、黑壳(Bp)、白壳(Wp)和红壳(Rp)合浦珠母贝不同壳色选育群体为亲贝，采用雌雄单个配对和人工授精的方法，获得金壳家系4个，黑壳家系5个，白壳和红壳家系各3个。分别在受精后5天、15天、•••25天和40天，从各个家系中随机取样50个幼体，测量其壳长及壳高，利用方差分析比较壳色系的

8、牛长差异。同时利用非求导约束最大似然法(DF．REML)，对合浦珠母贝在5、15、25、40日龄下的壳长和壳高性状进行遗传参数的估计。结果表明，实验期间，4种壳色系的平均壳长和壳高均存在显著性差异(∥0．05)，40个同龄下，●白色选系均具有最大壳长及壳高，金色选系均存在最小壳长和壳高。5"--40日龄幼体壳高狭义遗传力估计值为0．17"-0．23，壳长狭义遗传力估计值为0．12"-0．22。合浦珠母贝幼体不同生长时期壳高和壳长的遗传相关和表型相关均为正相关，相关系数的范围分别为0．825"--0．989，0．83

9、2一,0．965，表明以壳i苗或壳长为参数进行选育时，均可达到改良生长性状的效果。3、合浦珠母贝过氧化氢酶基因特征和表达分析过氧化氢酶(Catalase)是机体内一类重要的抗氧化酶，能保护细胞免受活性氧的破坏，在牛物体抗氧化能力以及免疫防御方面起到重要作用。本文研究了合浦珠母贝过氧化氢酶基因结构特征和在应激状态下的表达调控机制，合浦珠母贝过氧化氢酶基因PoC