雷公藤甲素通过抑制逆转录病毒herv

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1、重公鏖里塞通过控剑逆莹丞痘圭旦壁盟：K盟卫窆基因莹丞透昱厶K量鱼2盘血￡丛熏鱼鱼痘缉胞凋圭⑧论文作者签名：强4蛰聋指导教师签名：主金盏垒叁评阅人2：评阅人3：评阅人4：评阅人5：答辩委员会主席：赵型!墓』塾援』浙江太堂医堂院附属箍三医医委员1：韭瞳红』主任医』!巫』逝江太堂医堂瞳附属笠三医院委员2：郄蟹菌』主任医垣』逝江省虫医院委员3：委员4：委员5：万方数据浙江大学研究生学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得逝姿盘堂或其他教育机构的

2、学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：1尔刁％砗签字日期：矽>’年多月／日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解逝望盘堂有权保留并向国家有关部门或机构送交本论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权逝婆盘堂可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名：1季慵缉导师签名：貉虿谨签字日期：∥y年多月f日签字日期：歹刀s7年；月／日万方数据浙江大学硕士学位论文致谢致谢两

3、年半的硕士研究生阶段学习即将结束，回顾这期间的学习生活，感触颇深。收获了很多，其中经历的挫折与失败，高兴与喜悦，值得回味。然能够答辩，多亏导师、同学、朋友和家人们的帮助和支持。借此机会，向这段时间中给予了我帮助的人表示感谢。首先感谢我的导师徐荣臻教授，您渊博的知识，严谨的实验态度和踏实的工作作风令我非常崇敬。感谢您给我提供一个学习的机会，让我完成硕士研究生的学习生涯，谢谢您的包容!感谢浙二医院血液科赵小英教授、张晓红主任、徐根波主任、黄连生主任、徐呖主任、许晓华主任，梁赞老师，袁相贵等各位学长在我临床学习阶段给予的帮助。感谢张旭照师兄在实验中耐心的帮我解决问题，并提供一切力所能及的

4、帮助。感谢甘宜超师兄，唐劲奋师姐传授我实验技术，感谢郑维威师兄和周虹师姐、姜旭东、陆晓雅、柴守杰、金雪力等在实验中的帮助。感谢郑树教授为我们提供了良好的实验平台，以及吕庆华老师、方永明老师、黄彦卿老师以及肿瘤研究所的其他老师给对我的实验帮助和支持。感谢肿瘤研究所一起实验和学习的同学胡烨婷、谢非、谭静怡、梁祖宇、魏芬、何鑫以及其他的同学的帮助。最后感谢我的家人和好友的帮助与支持，你们给我提供了物质和精神的支持。万方数据浙江大学硕士学位论文中文摘要雷公藤甲素通过抑制逆转录病毒HERV．KNp9基因转录诱导人K562和Jurkat白血病细胞凋亡浙江大学医学院内科学(血液病学)硕士研究生陈

5、将华导师徐荣臻教授中文摘要目的：1、明确HERV-KNp9病毒基因在白血病细胞系和原代白血病细胞中的转录水平。2、探讨雷公藤甲素(TPL)对人K562和J咄at白血病细胞HER-V-KNp9基因转录及其下游信号分子影响。3、探讨雷公藤甲素诱导K562和Jurkat白血病细胞凋亡与其抑制Np9转录相关性。方法：1、以(0．5．64111110Ⅵ。)浓度雷公藤甲素(TPL)分别处理Jurkat，K562，K562／ADR，IⅫi，NB4，Ⅺ订3，cML—BC，KU812，KG-1，T唧-1，KasuIIli一1，KcL-22细胞72h和临床白血病病人样本48h，然后用MTT法检测细胞存

6、活率并计算出相应的半数增殖抑制浓度(Ic50)值。2、半定量ImPCR检测12种血液肿瘤细胞系和临床样本中HERV-KNp9的表达情况。3、按照0，2，4，8，16咖。此浓度雷公藤甲素处理J咄at和K562细胞48h，流式细II万方数据浙江大学硕士学位论文中文摘要胞仪检测它们凋亡细胞的变化。4、半定量RT．PcR检测加雷公藤甲素处理Jurkat和K562细胞以及原代病人样本后，各组Np9基因II删A的表达水平变化，并用Kodak1D3．6软件进行定量分析。5、采用统计软件SPSsl9．O分析雷公藤甲素对Np9基因转录抑制与细胞凋亡之间的相关性。6、应用wrestemblot检测加雷

7、公藤甲素后Jural【t和K562细胞中Np9下游信号分子c-myc，p-cate血，p-ERK，p-A虹和Notchl蛋白水平的变化情况。7、应用w．estemblot检测经雷公藤甲素处理后Jur出和K562细胞中凋亡相关分子PAI冲，caSpase．3表达水平变化结果：l、雷公藤甲素呈剂量依赖方式抑制J眦at，K562，K562／ADR，R旬i，NB4，KM3，CML．BC，l叫812，KG．1，T肿．1，KaSuIlli．1和KcL．2212种血液系统肿瘤细胞的