外周血内皮祖细胞三维血管新生模型建立及其特性的分析

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1、题目：外周血内皮祖细胞三维血管新生模型的建立及其特性分析　作者：施森　学位：硕士　学校：泸州医学院　施森　何延政　刘勇　葛红卫　胡波　文雪刚　曾宏　钟武　杨辉　目的　　随着血管组织工程技术的不断完善，内皮祖细胞在组织工程中的应用也引起了研究者的重视。我们设计本试验来立体观察内皮祖细胞在血管新生中的作用，同时对模型进行分析进一步了解细胞培养后有何生物学作用。方法取大鼠外周血，分离出内皮祖细胞，观察大鼠外周血内皮祖细胞的体外培养和扩增，对培养的内皮祖细胞进行表面标记和功能检测，同时建立三维立体模型，对模型进行分析。结果　１．内皮祖细胞在以Ⅰ型胶原为主的三维基质内分别从上、下两

2、个方向向胶原基质内生长，２４　ｈ内即可出现向胶原内的出芽及浸润。随着时间的推移，逐渐形成垂直于胶原基底面的分支样结构，并相互交织成网。对照组细胞生长慢，出芽慢，管状结构细小，向胶原内浸润的深度浅，网状结构稀疏，不完整。血管数在第９天前逐渐增加，随后未见增加并出现部分萎缩。２．ＶＥＧＦ实验组与对照组新生血管数目对比有显著统计学差异（Ｐ＜０．０１），ＶＥＧＦ能动员和诱导内皮祖细胞促进血管新生。结论　　１．鼠尾胶原凝胶可以为内皮祖细胞提供良好的细胞外基质微环境，再加上必要的生理、病理信号刺激，将能够诱导内皮祖细胞表现出血管新生中的迁移、增殖，发芽等步骤。内皮祖细胞三维凝胶模型可

3、用来研究血管新生。２．ＶＥＧＦ实验组与对照组血管新生数目有显著统计学差异（Ｐ＜０．０１），说明ＶＥＧＦ能动员和诱导内皮祖细胞促进血管新生。　关键词　内皮祖细胞　　三维血管新生模型　　ＶＥＧＦ　鼠尾胶原凝胶　　　1Objective:Withthedevelopmentofthetechnologyoftissue-engineeredvascular,researchershavepayedattentiontotheapplicationofendothelialprogenitorcells(EPC)inthetissue–engineering.weestablis

4、hedthethreediamension-modeltoobservethecontributionofEPCintheangioneogenesis,andanalyzedthemodeltofindthebiologyeffectafterculturing.Methods:1.ObtainEPCfromtheperipheralblood,observetheculturationandamplificationinvitoofEPC,andsighedthemarketanddetectthefunctionoftheculturedEPC.Atthesamet

5、ime,weestablishedthethreediamension-modeltoanalyzethemodeltofindthebiologyeffectafterculturing.Result:1.Inthethree-diamensionmaterialwhichcomposedmostbycollagenⅠ，ＥＰＣ　growintocollagen-materialfromupanddown.In24htherecanbeseenpullulationandinfiltrationintothecollagen.Withthetimeflying,

6、therewerebranch-likeconstructionwithverticaltheundersurfaceofcollagenandinterlacetoneteachother.Incontrolgroup,theEPCsgrowslowly、pullalateslowly、thebranch-likeconstructionistinyandthedepthofinfiltrationintocollagenissuperficial,thenetsraritasandunintegrated,thenumberofangioneogensis

7、increasegraduallybeforethe9thday.Fromthenon,wecan’tseethenumbertoraiseandpartofthemwouldbeatrophied.2.ThereweresignificantstatisticscontrastbetweenthenumberofVEGFgroupandcontrolgroup(p<0.01),VEGFcanmobilizedandinduceEPCtopromotetheangioneogensis.Conclusion:1.Rattail