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时间:2018-12-08
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1、几种不同检验方法用于阴道细菌检验临床对比分析(山东省威海市立医院南院IX,威海264200)【摘要】目的:对比几种检验方法用于阴道细菌检验检测效用,评价不同方法临床应用价值。方法:前瞻性研宄,以2015年1月〜2016年7月,医院收治并进行阴道分泌物检查的对象174例,以无菌面试子采集3份阴道壁样品,一份进行细菌培养,一份进行革兰染色,一份进行PCR检查。结果:细菌培养、革兰染色、PCR检验阳性率分别为58.0%、78.2%、75.9%;革兰染色法阳性率低于细菌培养法、PCR法,差异有统计学意义(P<0.05),PCR检查法细菌培养法阳性率差异无统计学意义(P〉0.0
2、5);格兰染色法与细菌培养法一致性系数K=0.632、与PCR检验法k=0.573,细菌培养法与PCR检验法k=0.847,属于高度一致。结论:革兰染色法敏感有待提高,建议采用PCR法,速度快、效率高,一定程度上可提到细菌培养法,可信度高,可作为阴道细菌检验首选方法。【关键词】阴道细菌;临床检验;鉴定阴道感染是一种常见病,与阴道炎、流产、不良妊娠结局等关系密切,开展阴道细菌检验,是进行相关疾病诊断、治疗的基础。细菌检验的方法较多,主要伍括格兰染色法、细菌培养法以及PCR法,不同方敏感性、效用不尽相同。木次研究实对比几种检验方法检测效用,评价不同方法临床应用价值。1资料
3、及方法1.1一般资料前瞻性研究,以2015年1月〜2016年7月,医院收治并进行阴道分泌物检查的对象174例,年龄24〜55岁。平均(34.4±10.2)岁。纳入标准:①有进行阴道细菌检验需要,如妊娠、阴道炎患者;②知情同意;③未合并支原体、衣原体感染;④有一项或多项细菌检验指征,括出现细膜分泌物、阴道后穹窿分泌物pH≥4.5、氨臭味实验阳性等。排除标准:①质控不到位;②已进行抗生素治疗;②月经期;③2d内性生活。1.2方法进行详细的妇科检查,以无菌面试子采集3份阴道壁样品,送检。必要吋进行PH值检查。一份进行细菌培养,一份进行革兰染色,一份进行P
4、CR检査。(1)革兰染色:选择光滑、无污染、无汕渍、厚度1.5cm以下载玻片,将分泌物均匀涂抹于玻片,用力均匀,固定自然晾干,在火焰上通过3次成型。,精心初染色,95%酒精脱色,摇动10-30S,至无紫色脱落,静置1〜1.5min,水冲洗,进行复染,水冲洗,自然干燥,镜检。(2)细菌培养:37°C常温下胚芽48h,选择半透膜、灰色、光滑水滴形状的菌落,采用细菌鉴定仪检测。(3)PCR:置于生理盐水,离心lOOmin,转速12000r/min,去上清液,加入碱性裂解液,98%环境中加热,十分钟后理性,转速12000r/min,离心速度5min,取上层液,制作阴道分泌物D
5、NA模板,将没有添加脱氧核糖核酸视为阴性组,PCR扩增实验,进行检查扩增时,还需提取25μl无菌去离子水,30μl石蜡覆盖表面,进行聚合酶链反应循环,32环,lmin85°C以下,lmin72°C以下,lmin94°C以下,32次循环后,72°C下最后一个循环延伸,吋间5min[l]。1.3统计学处理使用Excel表记录数据,SPSS20.0统计学软件进行计算,采用(±s)反映计量资料,两组间比较前,采用Kolmogorov-Sminmov法检验是否符合正态分布,采用0或%反映计数资料,两组间比较采用检验或Fisher精确性检验,一致性检验采
6、用Kappa检验,以P<0.05表示差异具有统计学意义。2结果革兰染色法阳性率低于细菌培养法、PCR法,差异有统计学意义(P<0.05),PCR检查法细菌培养法阳性率差异无统计学意义(P〉0.05)。见表1。格兰染色法与细菌培养法一致性系数K=0.632、与PCR检验法k=0.573,细菌培养法与PCR检验法k=0.847,属于高度一致。表1三种细菌检测法结果对比[n(%)]3讨论本次研究显示革兰染色法、细菌培养法、PCR法检验阳性率存在显著差异,革兰染色法敏感性相对较低,与细菌培养法一致性系数K=0.632,而细菌培养法、PCR检测法k=0.847,属于高度一•致,
7、提示PCR可提到细菌培养法,一致性强。当然,格兰染色法也有其应价值,操作简单、廉价,其对真菌性阴道炎效用更高,可明确判断病原体类型,考虑到真菌感染是阴道病特别是难治性阴道病的主要病原体,革兰染色法仍有较大的价值,其对细菌感染不敏感。相较于细菌培养法、PCR法,革兰染色法采用积分判断是否为阳性,参差划分更科学,通过对纤毛菌、滴虫分层染色,经处理病原体失活,利于观察,仍有较高的应用价值。细菌培养法是进行细菌检验的金标准,本次研究显示其阳性率达到78.2%高于革兰染色法。但其也有一定的缺陷,主要体现在:①需要花费较长的吋间,这可能是部分患者特别是临吋检验患
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