炙甘草对哮喘大鼠气道炎症及stat-6信号通路的影响分析

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1、学号：201110681lIIIIIIIIIIIIIIIIlllllIIIY2673993硕士学位论文炙甘草对哮喘大鼠气道炎症及STAT-6信号通路的影响作者姓名杨兴嫣申请学位级别硕士学位指导教师姓名史锁芳职称教授、主任医师学科专业中医内科学研究方向肺脏病研究学习时间自2011年09月04日起至2014年06月01日止论文提交日期2014年06月01日论文答辩日期2014年06月06日学位授予单位南京中医药大学学位类型医学科学硕士学位万方数据原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除

2、文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者(需亲笔)签名：摘畈睡、)。，绰一‘月一占日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权南京中医药大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保

3、密口，在一年解密后适用本授权书。本学位论文属于不保密耐。(请在以上方框内打“√”)学位论文作者(需亲笔)签名：桐畈珂良．如，侈年护占月。占日导师(需亲笔)签名：如c哞“月“日万方数据南京中医药大学硕士学位论文目录摘要．iiiAbstract．、，前言．11支气管哮喘流行病学．．12我国哮喘控制现状．．13展望．．2第一部分研究背景．31文献回顾．．31．1国外认识。31．2国内认识52选择甘草作为研究对象。92．1选择甘草的依据．92．2甘草历代文献回顾102-3甘草现代药理研究：。112．4甘草用量探讨113选择STAT6信号通路作为

4、研究的靶点123．1JAKs／STATs信号通路的结构特点．123．2JAK／STAT的激活及反应类型133．3STAT-6信号通路与支气管哮喘．．143．4S吖m6信号通路的可调控因素。15第二部分实验部分191材料和方法191．1实验材料191．2实验方法．202检测步骤2l2．1血清IgE、IL-13、IFN吖的检测2l2．2肺组织病理检测222．3支气管pSTAT-6免疫组化检测222．4肺组织STAT-6RT-PCR检测．22{万方数据目录2．5统计分析243结果分析．243．1一般情况及模型评价243．2药物干预后引喘潜伏期

5、的变化263．3各组大鼠血浆炎因子变化273．4各组大鼠支气管病理改变293．5大鼠气道Sn玎6的表达．303．6各组大鼠肺组织STA．T-6差异表达的RT-PCR分析．31第三部分结果讨论341．支气管哮喘大鼠模型评价．342．实验结果讨论342．1炙甘草对哮喘大鼠气道炎症的影响342．2炙甘草对哮喘大鼠外周血炎症因子的影响352．3炙甘草对哮喘大鼠肺组织p-STAT6及STAT6不同亚型mRNA的影响363．甘草治疗哮喘的中医学理论探讨．363．I其性为和363．2其用在缓383．3勿忘本功383．4使用方法383．5中医文化394

6、．结论．40参考文献4l附录．48研究生期间取得成果53致谢．54万方数据南京中医药大学硕士学位论文摘要目的：本研究基于导师史锁芳教授临床配伍运用大剂量甘草治疗哮喘取得较好疗效的基础，从实验角度进一步验证不同剂量炙甘草对OVA致大鼠哮喘模型症状积分、气道反应性、支气管病理、血清细胞因子、肺组织pSTAT-6免疫组化及肺组织STAT-6、commonSTAT-6、SW尽6cR1’-PCR表达的影响。一方面，通过观察炙甘草对哮喘的治疗作用，试析炙甘草治疗哮喘的作用机理；另一方面，为导师善于运用大剂量甘草治疗哮喘提供分子生物学佐证，也为藉“量

7、效关系”理论提高平喘疗效提供实验依据。方法：清洁级雄性SD大鼠50只，随机分为：空白组(Controlgroup)、哮喘模型组(OVAgroup)、泼尼松组(Predrtisonegroup)、炙甘草低剂量组(Lowdoseglycyrrhizaedecoctiongroup)、炙甘草高剂量组(Highdoseglycyrrhizaedecoctiongroup)，每组10只。除空白组外，其余各组通过腹腔注射OVA、A103I-13、灭活百日咳杆菌致敏，及OVA雾化诱喘，建立哮喘大鼠模型；空白组给予生理盐水腹腔注射及蒸馏水雾化作为对照。

8、建立模型后，各组分别给予相应的药物灌胃。通过哮喘行为学评分评估模型症状，乙酰胆碱雾化诱喘间接评价气道反应性，肺组织HE染色观察病理损伤程度，ELISA法检测血清IgE、IL．13、IFN．Y浓度变化，通过免