半夏人工种茎的组织培养优化与栽培及半夏子芽发生分析

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1、半夏人工种茎的组织培养优化与栽培及半夏子芽发生研究摘要半夏Pinelliaternat(Thunb．)Breit为天南星科多年生草本植物。半夏以地下块茎入药，块茎扁球形，有毒，炮制后方可入药，具有化痰燥湿，降逆止呕，散结消痞的功效，是我国常用中药材。由于半夏野生环境的破坏和人们的过度挖掘，野生产量锐减；人工种植因其繁育系数低，严重限制半夏栽培面积扩大和经济效益的提高。目前关于半夏组培快繁已有报道，然组培苗移栽麻烦，成苗率低。本实验室叶双凤通过组织培养获得了半夏人工种茎，克服了组培苗的不足，然愈伤组织到人工种茎全程固体培养基的培养使每瓶组培物长势不一致，需

2、要获得成熟度一致的人工种茎就需要增加转瓶次生，导致操作繁琐，不利于生产推广。本论文就半夏人工种茎组织培养流程进行了优化，采用悬浮培养扩繁得到长势一致的愈伤组织再进行人工种茎诱导，只需一次转瓶就可收获成熟期较为一致的人工种茎；本论文对组培的半夏无菌苗和人工种茎进行了盆栽试验，通过植株长势、物质积累及碳水化合物、叶绿素含量的变化比较，发现人工种茎的盆栽品质略优于无菌苗；本论文对田间发现的某些半夏块茎长有子芽现象进行研究，在实验室内对半夏块茎进行各种创伤处理，使其产生子芽。主要试验结果如下：1．采用悬浮扩繁愈伤组织，组培流程中组培物的生长较为一致为了获得成熟期

3、较为一致的人工种茎，需要将固体培养基上诱导获得的愈伤组织分批次的转瓶到人工种茎培养基上，每瓶愈伤要经过3_4次的转瓶，而采用悬浮扩繁愈伤组织可获得生长一致的愈伤组织，经过1次转瓶即可获得成熟期较为一致的人工种茎。2．悬浮培养液配方及愈伤组织来源影响悬浮培养的结果胚性愈伤专用培养基(MS+0．1mg／L认A+0．2mg／LABA+20g／LPEG+3％蔗糖)诱导获得的愈伤组织经低蔗糖浓度(10g／L)蔗糖的营养液悬浮培养发育为质地较柔软的微块茎颗粒，经高蔗糖浓度(50ejL)的营养液悬浮培养扩繁获得长势一致的愈伤；无菌苗专用培养基诱导获得的愈伤组织经高蔗糖

4、浓度的营养液悬浮培养发育为较坚硬的微块茎小颗粒，胚性愈伤专用培养基(MS+O．1mg／LIAA+O．2mg／LABA+20g／LPEG+3％蔗糖)诱导获得的愈伤组织经悬浮培养扩繁出长势一致的愈伤组织。3．不同创伤处理影响半夏子芽的产生刀切处理产生的子芽数多与其他创伤处理，其中横切处理比纵切处理为优；将半夏横切为上、中、下三部分，在培养皿中进行子芽诱导，发现中部产子芽最多达11．50粒，下部次之仅1．43粒，上部不产子华中农业大学2011届硕士研究生学位论文芽，然上部不切或纵切为若干小块后，可以发芽直接发育成完整的半夏小植株，且试验统计顶芽纵切成32小份后

5、仍然有62．0％的发芽率；上、中、下三部分显微观察发现上部顶芽部细胞最活跃，中部次之，下部小块茎细胞活性最低；半夏子芽的发生受顶端优势的抑制，除去半夏块茎顶芽可激发半夏产子芽的能力；半夏子芽的产生方向具有向性，100％向着顶芽方向产生子芽。4．基质、含水量等外部因子影响半夏子芽的产生以沙子为基质的产子芽数随含水量的增高而降低，以细土为基质的子芽数随含水量的增高而先升高后降低，，以蛭石为基质的子芽数随含水量的增高而增高；含水量30％的蛭石产子芽最多为6．2粒，其次为含水量30％的细土产子芽数为4．7粒，含水量30％的沙子产子芽最少为0粒。5．子芽形成的时间

6、越久，发芽率越高田间剥离的半夏子芽发芽率最高，室内产生的子芽在母体块茎上形成3个月、2个月后剥离母体的发芽率显著高于1个月，形成3个月的子芽发芽率高达84．00％，形成2个月的子芽也有70．67％的发芽率，形成仅1个月的子芽只有36．00％的发芽率。6．半夏人工种茎的栽培品质略优于半夏无菌苗盆栽试验发现半夏人工种茎的生长式、物质积累量、碳水化合物量及叶绿素含量等指标均略优于半夏无菌苗植株；盆栽6个月后，人工种茎块茎鲜重1．0570g／粒，直径为1．124cm／粒，无菌苗茎鲜重0．4148∥粒，直径为O．860c扛l／粒。关键词：半夏；人工种茎；子芽；无菌

7、苗；栽培n半夏人工种茎的组织培养优化与栽培及半夏子芽发生研究AbstractPinelliaternata(Thunb．)Breit,Araceae，perennialherb，andit’Stubersareusedasmedicines，whichhastheeffectsofremovingdampness，againstemesis，removingmassanddispersingtheaccumulationoftheformula,isaChinesetraditionalmateriamedica．1f11ccurrentresearch

8、on只ternataiSfocusonartificialcultivation