自体骨髓间质干细胞移植治疗急性脑卒中49例临床研究

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1、自体骨髓间质干细胞移植治疗急性脑卒中49例临床研究[摘要]目的观察自体骨髓间质干细胞移植治疗急性脑卒中患者的临床效果及安全性。方法选择2010年1月〜2012年12月江西省人民医院神经内科收治的急性脑卒中患者49例，其中脑出血16例，脑梗死33例。患者在病情稳定后予以粒细胞集落刺激因子进行骨髓干细胞动员，采自体骨髓间质干细胞进行鞘内注射移植治疗，骨髓间质干细胞数量为（1.0〜10.0）X107,1次/周，共治疗2次。参照美国国立卫生研究院脑卒中量表（NIHSS）、简化Fugl-Meyer运动评分法（FMA）。改良Barth

2、e1指数（MBI）,对患者术前、术后神经功能缺损程度、运动功能和日常生活能力进行评定，观察患者的不良反应和副作用。结果49例患者均进入结果分析，中途无脱落。与治疗前比较，患者移植后1、6、12个月后NIHSS评分显著降低，差异有统计学意义（P[Keywords]Autologousbomemarrowmesenchymalstemcell；Transplantation；Cerebralinfarction；Cerebralhemorrhage脑血管病是我国中老年的常见病、多发病。目前的外科手术和药物治疗使脑卒中患者病死率

3、下降，但多数幸存患者都遗留有程度不等的神经功能缺陷，给患者、家庭及社会带来了沉重的负担。近年来在神经系统可塑性和神经再生方面的深入研究，成体干细胞具有多向分化潜能和自我更新的特性，干细胞移植有望成为脑血管病治疗提供了新手段［2-4］o本研究在急性脑卒中常规治疗病情稳定后采用自体骨髓间质干细胞（MSCs）经蛛网膜下腔移植治疗，观察急性脑卒中患者的临床疗效和安全性。1资料与方法1.1一般资料选择2011年1月〜2012年12月江西省人民医院神经内科收治的急性脑卒中患者49例，其中脑出血16例（基底节区9例、脑干3例、额叶2例、

4、顶叶2例），脑梗死33例（基底节区22例、脑干8例、顶叶3例）；男29例，女20例，年龄58〜69岁，平均65.3岁。所有患者均符合1995年全国第四届脑血管病会议制订的诊断标准［1］。患者均住院治疗行包括血、尿、便三大常规、肝肾功能以及胸片、心电图均正常，多项肿瘤标志物均阴性。患者签署治疗知情同意书。治疗方案经医院医学伦理委员会批准。1.2方法患者入院后按《中国脑血管病防治指南》常规治疗，脑出血患者多在发病14〜21d后复查头颅CT平扫血肿吸收。脑梗死患者多在发病3〜7d后复查头颅CT平扫中线结构无移位。所有患者在生命体

5、征平稳、意识清楚的情况下才行术前准备。自体骨髓MSCs通过蛛网膜下腔输注进行移植治疗。具体操作如下：①骨髓MSCs动员：采用粒细胞集落刺激因子进行动员，剂量为5mg/（kg•d）,连续2do②采集自体骨髓液：第3天上午在手术层流室采集骨髓液，取俯卧位，盐酸利多卡因局麻，依次在患者左右侧骼后上棘穿刺各抽取骨髓液约50mLo③骨髓MSCs分离、鉴定和计数：在干细胞实验室去除红细胞，密度梯度离心法结合贴壁法获取骨髓单个核细胞。流式细胞检测CD44+、CD90+,制成约5mL干细胞悬液备用，细胞数为（1.0〜10.0）X107,每

6、例患者均进行细菌、真菌、支原体和内毒素检测。④自体骨髓MSCs移植：第3天下午在手术层流室患者取侧卧位，取L3、L4椎间隙为穿刺点，9号腰椎穿刺针进行穿刺，穿刺成功后引流脑脊液约7mL；注射器抽取干细胞悬液，缓慢地推注至蛛网膜下腔；最后抽取0.9%氯化钠注射液约2mL,使穿刺针道中的残留细胞完全进入蛛网膜下腔。⑤患者去枕平卧位6h,观测生命体征。1周后按上述步骤再次行自体骨髓MSCs移植。共移植治疗2次。禁忌证：①高度过敏体质或者有严重过敏史者。②并发重要脏器（心、肺、肝、肾等）功能衰竭。③出凝血机制障碍，如血友病等。④合

7、并恶性肿瘤。⑤血清学检查阳性者，如艾滋病、梅毒等传染性疾病。⑥局部或全身重症感染。1.3观察指标患者在移植前和移植1、6、12个月后进行疗效评定。神经功能缺损程度评定采用美国国立卫生研究院脑卒中量表(NIHSS),共11小项，总分42分，得分越髙，神经功能缺损越严重。肢体运动功能采用简化Fugl-Meyer运动功能评分法(FMA),上肢33项，下肢17项，每项0〜2分，满分100分，得分越高，提示肢体运动功能越好。日常生活活动能力评定采用改良Barthe1指数(MBI),包括大便、排尿、修饰、用厕、吃饭、移动、步行、穿衣、

8、上楼梯和洗澡共10小项，总分100分，分数越高，提示生活自理能力越强。同时观察患者术后不良反应和副作用，移植12个月后行头颅MRI和肿瘤标志物检测。1.4统计学方法采用SPSS13.0软件进行统计处理，计量资料以均数土标准差(x±s)表示，组间比较采用t检验，两两比较采用LSD-1检验。以P脑出血和脑梗