雷洛昔芬对gh3细胞sela

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1、山东大学硕士学位论文雷洛昔芬对GH3细胞Seladin-1基因表达与细胞增殖和凋亡的影响专业神经外科研究生李彦斌导师滕良珠吴洪喜教授中文摘要目的：探讨选择性雌激素受体拮抗剂雷洛昔芬对大鼠垂体瘤GH3细胞株seladin-1基因表达及其对肿瘤细胞增殖和调亡的影响，分析seladin-1基因的功能及其在垂体瘤发生和发展中的调控机制，进一步为垂体腺瘤的药物干预，以seladin-1为靶点的基因治疗和药物治疗提供试验依据。方法：大鼠垂体瘤GH3细胞常规在37°C、5%C02、100%湿度的孵箱中培养，以不同浓度（0.1nmol/L、1nmol/

2、L、lOnmol/L、100nmol/L、1000nmoi/L)的雷洛昔芬作用于大鼠垂体瘤GH3细胞，培养48小时后检测雷洛昔芬的作用效果；以westernblot检测seladin-1基因在不同浓度药物下蛋白表达、焚光定量RT-PCR检测seladin-1基因在不同浓度药物下seladin-1mRNA表达、CellCountingkits-8(CCK-8)试剂盒检测不同浓度药物对肿瘤细胞增殖的影响和TUNEL试剂盒检测不同浓度药物对大鼠垂体瘤GH3细胞凋亡的不同影响。结果：1.雷洛昔芬在10nmol/L-1000nmol/L的浓度范围

3、抑制seladin-1mRNA表达（P<0.05)，在10nmol/L~100nmol/L，GH3细胞seladin-1mRNA表达下降最显著，0.1nmol/L、1nmol/L组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。2.雷洛昔芬在所有实验组均抑制seladin-1基因蛋白表达（PC0.05),在0.1nmol/L>1nmol/Ln10nmol/L、lOOnmol/L组表现为，随着药物浓度的升高，GH3细胞seladin-1蛋白表达呈现下降趋势（PC0.05)，而在100nmol/L、1000nmol/L表现为，随着药物浓度的升

4、髙，GH3细胞seladin-1蛋白表达呈上升趋势（P<0.05),在100nmol/L实验组，GH3细胞seladin-1蛋白表达下降最为山东大学硕士学位论文明显。3.雷洛昔芬在10?1000nmol/L实验组能够抑制GH3细胞生长(P<0.05)，在10~100nmol/L实验组抑制最显著，0.1?1nmol/L实验组未见明显抑制，与阴性对照组比较差异无统计学意义（尸〉0.05)4.TUNEL试剂盒检测雷洛昔芬在10?1000nmol/L浓度对大鼠垂体瘤GH3有效诱导细胞凋亡（PC0.05)。结论：1.雷洛昔芬能够抑制大鼠垂体瘤GH

5、3细胞株seladin-1mRNA和蛋白的表达，并且在10?1000nmol/L浓度范围均受到抑制，抑制程度二者表现有一致性；2.雷洛昔芬能够抑制大鼠垂体瘤GH3细胞株的生长，抑制肿瘤细胞增殖;3.雷洛昔芬能够诱导肿瘤细胞凋亡增加，且凋亡率高于瘤细胞的增殖抑制率；4.雷洛昔芬通过作用于大鼠垂体瘤GH3细胞selandin-1能够抑制垂体瘤的生长，增加瘤细胞的凋亡，从而抑制垂体腺瘤的发生和发展，seladin-1有望成为垂体瘤药物治疗和基因治疗的新靶点。关键词：垂体腺瘤；seladin-1;雷洛昔芬；GH32山东大学硕士学位论文Effec

6、tsofraloxifeneonexpressionofseladin-1aswellasproliferationandapoptosisinGH3cellsSpecialtyNeurosurgeryPostgraduateLiYanbinTutorProf.TengLiangzhuABSTRACTObjectives:Tostudytheeffectsofraloxifene,aselectiveestrogenreceptorantagonist,onproliferation,apoptosisandseladin-1genee

7、xpressioninratGH-secreting(GH3)cells,Theseladin-1genemaybeanewtargetforgeneanddrugtherapy.Thesestudiesmayprovidetheoreticalfoundationforgenetherapyofpituitaryadenomas.Methods:At48hafterraloxifenewasaddedataseriesofconcentrations(0.1nmol/L、1nmol/L、10nmol/L、100nmoI/L、1000n

8、mol/L)toGH3cells,theexpressionlevelofseladin-1genewasexaminedbyquantitativerealtimeRT-PCRandWesternblot