龙眼dimocarpus longan lour.成花逆转cdna

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1、缩写词缩写词英文全称中文名称ATPAdenosine‘。triphosphate腺苷三磷酸APSAmmoniumpersulfate过硫酸铵AcrAcrylamide丙烯酰胺BisN，N’一methylene—bisacrylamideN，N一甲叉双丙烯酰胺BLASTBasicLocalAlignmentSearchTool局部相似性基本查询工具bpbasepair碱基对cDNA-AFLPcDNA-amplicationfragmentlengthcDNA一扩增片段长度多态性polymorphismDEPC，DiethylPyrocar

2、bonate焦炭酸二乙酯／DNaseDeoxyribonuclease脱氧核糖核酸酶dNTPDeoxyribonucleosidetripHospHate脱氧核苷三磷酸dNTPSdATPdcTPdGTPdTTPD1阿Dithiothreitol二硫苏糖醇EDTAEthylenediaminetertraceticacid乙二胺四乙酸二钠盐EBEthdiumbromide溴化乙啶g重力加速皮ODoptiacaldensity光密度值Oligo(dT)脱氧胸腺苷酸寡聚体PCRPolymerasechainreaction聚合酶链式反应’PV

3、PPpolyvinylpolypyrrolidone聚乙烯聚吡咯烷铜RNaseRibonuclease核糖核酸酶rpmRevolutionsperminute每分钟转速SDSSodiumdodecylsulfate十二烷基苯磺酸钠TaqThermusaquaticusDNApolymerase嗜热水生菌DNA聚合酶TriSTri—hydroxymethylaminomethane三羟基氨基甲烷．5．TEMEDN，N，N’，N’-TetramethylethylenediamineN，N，N’，N’一四甲基乙二胺TriSTri—hydro

4、xymethylaminomethane三羟基氨基甲烷TBETrisbaseH3803EDTAbuffer缓冲液TETrisbaseEDTAbuffer缓冲液TDFsTranscript—derivedfragments转录本片段B-MeB—Mercaptoethan01B一巯基乙醇．6．独创性声明本人声明，所呈交的学位(毕业)论文，是本人在指导教师的指导下独立完成的研究成果，并且是自己撰写的。尽我所知，除了文中作了标注和致谢中已作了答谢的地方外，论文中不包含其他人发表或撰写过的研究成果。与我一同对本研究做出贡献的同志，都在论文中作了明

5、确的说明并表示了谢意，如被查有侵犯他人知识产权的行为，由本人承担应有的责任。学位(毕业)论文作者亲笔签名：花名厂一日期：挪．厶·f厂论文使用授权的说明，本人完全了解福建农林大学有关保留、使用学位(毕业)论文的规定，即学校有权送交论文的复印件，允许论文被查阅和借阅；学校可以公布论文的全部或部分内容，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。’保密，在年后解密可适用本授权书。口不保密，本论文属于不保密。口学位c毕业，论文作者亲笔签名：磊乏厂日期：删．‘·，，指导教师亲笔签名：日期：摘要龙眼成花逆转(floralreversion)被认为是造

6、成龙眼大小年结果的主要原因之一，而小年产量往往不及大年的一半，成为龙眼生产上的老大难问题。因此，进一步明确龙眼成花逆转的分子机理，阐明龙眼成花逆转过程中从基因到性状表达的规律，对于龙眼成花逆转的调控及良种培育，减少经济损失具有重要的理论和实践意义。本研究运用eDNA—AFLP技术，通过比较龙眼正常成花和成花逆转花芽的RNA水平上的表达差异，寻找与龙眼成花逆转紧密相关的cDNA差异片段，以期为今后克隆龙眼成花逆转相关基因奠定基础。本研究以龙眼正常成花花芽和成花逆转花芽为研究对象，分别提取总RNA并进行逆转录，合成双链cDNA后进行AFLP

7、(Amplifiedfragmentlengthpolymorphism)分析。eDNA—AFLP操作中选择识别6个识别位点的EcoRI和4个识别位点的MseI对双链cDNA进行限制性酶切，得到两种粘末端分别连接上两种人工接头，预扩增一次后将扩增后的模板稀释90倍，再用64对2+2选择性引物扩增并在6％聚丙烯酰胺凝胶电泳后用银染方法染色进行指纹图谱分析。经分析共获得差异条带25条，二次扩增后送生物公司测序，获得差异片段序列14条。数据库同源性分析，较强同源性的序列有7条，较弱同源性的有6条，有一条没有匹配结果。同源性较强的序列中有3条推

8、测与龙眼成花逆转相关，分别为TDF331，为龙眼EGases基因；TDFll2，NfMArelatedproreinkYnases基因；TDF313chitinase基因。其中TDF331和TDF313期上