大孔树脂纯化金毛狗脊叶黄酮的工艺研究

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1、大孔树脂纯化金毛狗脊叶黄酮的工艺研先摘要：比较4种大孔树脂纯化金毛狗脊叶总黄酮的性能及工艺，结果表明，DA-201树脂对金毛狗脊叶总黄酮有良好的吸附及解吸性能。其静态分离纯化工艺的最佳参数为DA—201大孔树脂与提取液的比例为1:5、提取液pH值为3、恒温振荡时间2h、解吸液为60%的乙醇。动态分离纯化工艺的最佳参数为吸附和解吸最佳流速均为1mL/min、解吸液体积为4倍柱体积。关键词：大孔树脂；金毛狗脊叶；总黄酮；纯化中图分类号：R284.2文献标识码：A文章编号:0439-811403-0583-04Studyonth

2、ePurificationofFlavonoidfromtheLeavesofCibotiumbarometzJ.Sm.byMacroporousResinLINYan—ru1,2，CAOQian—yAbstract：ThecharacteristiesandtechnologyoypesofmacroporousnswerecomparedtoseparatetotalflavonoidsextractedfromCibotiumbarometzJ.Sm.TheresultsshowedhatDA—201resinwit

3、hgoodabsorbabilityanddesorptionpropertieswasthebestforpurifyingthetotalflavonoidsinC.barometzJ.Sm.Thebesttechnica1parametersofitsstaticadsorptionwere：theraesinsandextractsat1:5，pHvalueat3，shakeaemperature2h，and60%alcoholase1uant.Indynamicdesorption，thebesttechnica

4、lparameterswere：boththeabsorptionanddesorptioneluantflowspeedwereat1mL/minandthevolumeoftheeluantwas4timesoftheresinbed.Keywords：macroporousresin;CibotiumbarometzJ.Sm.;flavonoid;purification金毛狗脊J.Sm.）又名金毛狗，为蚌壳蕨科金毛狗属植物，广泛分布在我国南方和西南地区，其根茎为常用中药狗脊［1］。据前人研究，金毛狗脊嫩叶具有清热凉

5、血、利尿通淋等功效，可治疗肠炎、痢疾等症［2］。金毛狗脊叶也含有丰富的活性物质，主要为黄酮类物质［3，4］。黄酮类化合物广泛分布于植物药中，其主要作用有抗菌、抗突变、降压、消热解毒、镇静、利尿、抗氧化、抗癌，以及降血糖、降血脂、抗病毒、抗衰老等［5］。但金毛狗脊叶却常常被丢弃，造成资源浪费，为了更好地开发金毛狗脊叶的药用价值，笔者对金毛狗脊叶总黄酮的分离纯化工艺进行了初步研究。大孔吸附树脂是近十几年来发展起来的一类有机高分子聚合物吸附剂，它的物理化学稳定性高，吸附选择性独特，不受无机物存在的影响，再生简便，解吸条件温和，使

6、用周期长，易于构成闭路循环，节省费用等被广泛用于生化物质的分离纯化［6，7］。本试验选择了4种大孔吸附树脂对金毛狗脊叶中总黄酮粗提物进行静态吸附解吸，从中筛选出选择性好、吸附率高、易解吸的适合金毛狗脊叶总黄酮粗提物分离纯化的大孔树脂，并对其纯化的方法和条件做了进一步的研究，为今后工业化研宄和开发金毛狗脊叶黄酮类产品奠定了基础。1材料与方法1.1材料1.1.1金毛狗脊叶与试剂金毛狗脊叶采于潮州市西湖山上，洗净，自然晾干，60°C烘干，粉碎，备用。芦丁对照品；FL—1、FL—3、AB—8、DA—201大孔吸附树脂；其他试剂均为

7、分析纯。1.1.2主要仪器设备752S紫外可见分光光度计；格兰仕电脑型烧烤微波炉；BT-100B数显恒流泵;ET—Q型气浴恒温振荡器；PHS—3C精密酸度计。1.2方法1.2.1标准曲线的绘制参照文献［8］中的方法，以吸光值为纵坐标，芦丁质量浓度为横坐标，绘制标准曲线，得到芦丁质量浓度与吸光值关系曲线的回归方程为A=8.4541C+0.0095,r=0.9988o1.2.2树脂的预处理［9］新购吸附剂含有未聚合单体、致孔剂、分散剂等残留的杂质成分，使用前必须加以处理。具体操作如下：用足量的95%乙醇浸泡24h，抽滤，再用大

8、量去离子水洗涤至无乙醇味即可。处理完毕后装入广口瓶中，用去离子水浸泡，备用。1.2.3金毛狗脊叶总黄酮粗提液的制备及含量测定称取5.0g金毛狗脊叶样品，加入20.0mL去离子水，微波1min后，冷却至室温，加入110.0mL去离子水及90.0mL95%乙醇，混合均匀后，于90°C恒温槽中回流1h。得到萃