大孔树脂纯化杠板归总黄酮的工艺研究

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1、大孔树脂纯化杠板归总黄酮的工艺研究　　　　摘要：目的：研究大孔树脂纯化杠板归总黄酮的最佳工艺参数条件。方法：用紫外分光光度法测定，以杠板归总黄酮的吸附率和解吸附率为考察指标，考察杠板归总黄酮在3种不同类型大孔吸附树脂（D101，AB-8，NKA-9）上的吸附和解吸附行为，通过动态吸附试验考察不同上样浓度、不同体积分数的乙醇、pH值对洗脱效果的影响等因素选择其工艺参数。结果：在实验条件下，最佳纯化工艺为在pH=6条件下，以AB-8型大孔树脂为吸附剂，体积分数为70%的乙醇为洗脱剂，上样浓度为mg?mL-1。结论；该

2、方法简便易操作，纯化工艺的效果比较好。下载论文网/3/　　关键词：杠板归；总黄酮；大孔树脂；纯化工艺　　中图分类号：文献标识码：A文章编号：1006-8937（2016）14-0165-02　　1概述　　杠板归是蓼科蓼属植物杠板归PolygonumperfoliatumL.的干燥地上部分[1]，又名贯叶蓼、蛇不过、河白草、梨头刺、蛇倒退等[2]，具有清热解毒、利水消肿、散瘀止血、止咳祛痰、抗氧化、抗炎抗菌、抗肿瘤、护肝、降血压等功效[3]。有研究报道杠板归中的主要成分是槲皮素为主的黄酮类化合物[4]，黄酮类化合物

3、能预防和治疗老年人的高血压和脑溢血，且有治疗冠心病和心绞痛的作用[5]，药用价值高。有效分离纯化杠板归中的黄酮类物质，对开发和利用杠板归的资源有比较重大的意义。　　本论文应用大孔树脂进行纯化工艺的研究，对杠板归中的总黄酮进行纯化，应用静态吸附-解吸附试验在3种不同类型的大孔树脂中进行筛选，优选出最佳的大孔树脂的型号―AB-8型，并采用动态吸附试验选择AB-8型大孔吸附树脂的适宜工艺条件，为其相关大生产应用提供理论的参数和依据。　　2材料和仪器　　材料　　杠板归（浙江中医药大学第二门诊部提供，经浙江医学高等专科学校

4、陶锋副教授鉴定为蓼科植物杠板归的干燥地上部分），AB-8，D101，NKA-9型大孔树脂，其余试剂均为分析纯。　　仪器　　SartoriusBP110S电子天平（德国）紫外分光光度计。　　3方法与结果　　标准曲线　　精密准确地称取芦丁对照品20mg，放置在100mL的容量瓶中，加适量60%的乙醇溶解后，振荡，定容，即获得芦丁的标准对照液（200μg/mL）。依次精密移取0、、、、、mL芦丁对照液于25ml的容量瓶中，补充60%的乙醇达6ml，再依次精密加入5%亚硝酸钠溶液ml，摇匀后放置6min；再精密加入10%

5、硝酸铝溶液ml，摇匀后放置6min；精密加入10mL4%氢氧化钠溶液10ml，以60%的乙醇定容，摇匀；静置15min后，以第1瓶为空白调零，测定各瓶溶液的吸光度的值。并以芦丁的浓度C为x，测得吸光度A为y，得到以下回归方程：　　A=+，r2=　　表明芦丁在～μg/mL的范围内其线性关系较良好。　　大孔树脂筛选　　大孔树脂的预处理　　取3种类型的树脂适量，用95%的乙醇将其浸润24h，使其充分溶解膨胀，倒出乙醇和杂物后湿法装柱，用95%的乙醇反复冲洗，不定时的检查其流出的液体，至其与水混合后不出现白色浑浊为止。接

6、着用大量的蒸馏水反复冲洗，直到没有醇味，待用。　　粗提液的制备　　将杠板归粉碎至粗粉，并用60%的乙醇25倍量，于70℃萃取5min，取滤液；相同的方法再重复操作一次，两次提取液放一起，回收乙醇，得到浓缩至mg?mL-1的杠板归粗提液。　　样品的含量测定　　用移液管精确移取样品mL，放置在10mL的容量瓶中，用纯化水定容；精确移取对照品mL，放置在10mL的容量瓶中，用纯化水定容，于500nm波长下测定其吸光度，以对照品计算其黄酮的含量。　　静态吸附与解吸附　　精密称取gD101、AB-8、NKA-9三种型号的树

7、脂在50mL的具塞锥形瓶中，加入mg?mL-1浓缩液10ml置于摇床中，在30℃的条件下震摇24h，过滤，得滤液1，测定其黄酮浓度（C1）。　　取出饱和的树脂，在树脂中加入50%乙醇10mL，相同情况下震摇24h，再过滤，得滤液2，测定其总黄酮的浓度（C2）。　　吸附率=（C0-C1）×100%/C0（1）　　吸附量=（C0-C1）×V/C0（2）　　解吸率=C2×100%/（C0-C1）（3）　　式中：C0为原液的浓度（mg?mL-1）；　　C1为吸附后剩余溶液的浓度（mg?mL-1）；　　C2为洗脱液浓度（m

8、g?mL-1）；　　V为洗脱液体积（mL），结果见表1。　　结果表明：采用AB-8型号的吸附率和解吸附率最好，纯化效果最强。　　AB-8树脂的纯化工艺条件优选　　上样浓度的选择　　精确称量已经预处理的湿树脂10g，湿法装入层析柱中。将3种不同浓度的样品液，，mg?mL-1分别依次上柱，进行动态吸附试验，接取流出液，水洗至无色后，用50%的乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩干燥后成