合浦珠母贝c型凝集素2的序列特征和表达分析

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1、合浦珠母贝c型凝集素2的序列特征和表达分析摘要：构建了合浦珠母贝的cDNA文库，并通过EST序列筛选和重新测序获得了一个新的C型凝集素基因的cDNA序列，命名为PoLEC2，其长度为1659bP，5’端非编码区为39bp,3'端非编码区为45bp，开放阅读框为1575bp，可编码524个氨基酸；PoLEC2蛋白的分子量约58.0kD,等电点为5.2;P0LEC2蛋白包含一个信号肽序列、一个MAM-2结构域和一个C型凝集素的糖识别结构域。同源性分析结果表明，PoLEC2与其他物种C型凝集素的糖识别结构域序列的同源

2、性在26.5%〜33.6%,相似性在45•1%〜55.6%。组织表达分析表明，PoLEC2基因在肝胰脏、鳃、外套膜、性腺及肠组织中均有表达，经溶藻弧菌刺激后8h在肠组织中的表达量显著上调。关键词：合浦珠母贝；C型凝集素；序列特征；表达分析中图分类号：S917.4文献标识码：A文章编号:0439—811419—4026-05SequenceandExpressionAnalysisofaNovelC—typeLectinGenefromPearl0ysterPinctadafucataHUYu-tingl，2，Z

3、HANGDian—changl，JIANGian—fengl，CUI0Hua—yangl,2,ng1Shi—guil，SUTShu-gel，3，GUCHENMing-qiaAbstract：ThecDNAlibrarywasconstructedfromthepearloyster.AC—typelectingene,namedasPoLEC2，wasobtainedbyscreeningandsequencingusingESTsequences.ThelengthofPoLEC2cDNAsequencewa

4、s1659bp.SequenceanalysisshowedthattheopenreadingframeofPoLEC2genewas1575bp.The5’-UTR1engthwas39bpand3’-UTRlengthwas45bp.ThePoLEC2geneencodedaproteincontaining524aminoacids,andthepredictedmolecularweightofPoLEC2proteinwasabout58.0kDwiththeisoelectricpointof5.

5、2.TheproteinsequenceofPoLEC2genecontainedasignalpeptidesequeneewith16aminoacids，aMAM—2domainandacarbohydraterecognitiondomainofC—typelectin.SequenceanalysisshowedthattheidentityandsimilarityofthecarbohydraterecognitiondomainofPoLEC2genesbetweentheP.fucataand

6、otherorganismswere26.5%〜33.6%and45.1%〜55.6%respectively.TissueexpressionanalysisshowedthatthePoLEC2genewasexpressedinalltissuesofP.fucata，andtherewasmaximumexpressionintheintestineafter8hoursofthebacterialinfection.Keywords：Pinctadafucata；C—typelectin；sequen

7、cefeatures；expressionanalysisc型凝集素为一类钙离子依赖活性的糖蛋白，具有至少一个糖识别结构域，能够识别和结合细胞膜表面的糖基，其结合糖基具有专一性，即一种凝集素只能结合一种糖基［1，2］。C型凝集素是一种模式识别受体蛋白，主要有Man型配体和Ga1型配体，Man型配体与D—甘露糖、D—葡萄糖结合，Gal型配体与D—半乳糖及其衍生物结合［2］。PRR蛋白能识别病原微生物引起宿主的免疫应答，在无脊椎动物免疫防御中发挥着重要作用［1，2］。合浦珠母贝又称马氏珠母贝，是我国海水珍珠的主要种

8、类，由其所产的珍珠即为举世闻名的“南珠”。近年来，由于养殖技术落后、养殖环境污染和种质退化，致使养殖合浦珠母贝出现了生长缓慢、病害频发及死亡率高等现象［3］，严重影响了合浦珠母贝养殖业的发展。因此，必须加强合浦珠母贝免疫防御分子机制的研宄，为其免疫防治策略的制定提供理论依据。目前在栉孔扇贝、海湾扇贝及长牡蛎等［4一8］软体动物中初步开展了免疫防御分子机制的研宄，发现在扇贝中存在多种C型