人前列腺上皮源性ets转录因子在胃癌中的表达研究

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1、人前列腺上皮源性Ets转录因子在胃癌中的表达研究白瑞珍秦艳周心一冯静洁吴玉玉（通讯作者）（无锡市第四人民医院病理科214062）【摘要】研究PDEF在胃癌中的表达情况。方法：釆用RT-PCR的方法检测人胃癌细胞株AGS、人正常胃粘膜上皮细胞株GES及人胃癌组织、癌旁组织中PDEF的表达。采用免疫组化的方法检测人胃癌组织及癌旁组织中PDEF的表达。结果：人胃癌细胞株AGS及胃癌组织中可见PDEF基因扩增条带。人正常胃粘膜上皮细胞株GES及胃癌癌旁组织未见明显PDEF扩增条带。免疫组化结果显示PDEF在胃癌组织中高表达，尤其在分化差的腺癌中，癌旁组织中低表达或无表达。结论：PDEF在胃癌组

2、织中高表达，可能是一个预后的分子标记。【关键词】PDEFEts侵袭转移【中图分类号】R730【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2012）32-0216-02全世界每年约有90万胃癌新发患者，同时约有70万人死于胃癌。近年来胃癌的诊断和治疗取得了较大的进展，但其发病率和死亡率仍无明显下降，五年生存率不到24%。胃癌预后差的原因主要是肿瘤对周围组织的侵袭，以及在肿瘤早期就可发生邻近组织和远端组织的转移。因此寻找胃癌预后的相关基因，揭示其促进胃癌发生发展的机制，只有深远的意义。人前列腺上皮源性Ets转录因子（humanprostate-derivedEtstranscripti

3、onfactor,PDEF｝是由oettgen等发现的Ets转录家族新成员，其定位于6号染色体短臂（6P21.3）上［2］。PDEF在多种肿瘤组织中高表达，但还未见在胃癌中有报道，我们希望通过木研究，能够发现PDEF基因在胃癌中的表达情况，为进一步研宄胃癌的侵袭转移提供基础。1材料与方法培养人胃黏膜上皮细胞GES、人胃癌细胞株AGS（ATCC）,提取总RNA。标木库提取胃癌病人的新鲜冰冻组织20例（胃癌组织及相应的癌旁组织），同样的方法提取总RNAo采用RT-PCR一步法kit扩增细胞株及组织中的PDEF,根据文献，扩增PDEF所用的引物为：5’-ATGGGCAGCGCCA

4、GCCCGGGTC-30(forward)5’-TCAGATGGGGTGCACGAACTGGT-3’(reverse)全长共1008bp。免疫组化方法采用SP两步法，评分标准根据文献，根据核染色的密度和百分比所得分值的平均值来评估。>10%细胞核强染色，为3+>15%细胞核中等着色，为2+>30%细胞核弱阳性，为1+低于以上限值，定位PDEF表达阴性。同吋，选取乳腺癌为阳性对照。2结果(1)RT-PCR法基因扩增情况(见图1)。人胃癌细胞株AGS及胃癌组织中可见PDEF基因扩增条带(Lane3,Lane4)。人正常胃粘膜上皮细胞株GES及胃癌癌旁组织未见明显PD

5、EF基因扩增条带(Lanel,Lane2)。MarkerLanelLane2Lane3Lane4图1:RT-PCR扩增的人PDEFcDNALanel：GEScell,Lane2：人胃癌癌旁组织Lane3：AGScell,Lane4：人胃腺癌组织(2)PDEF在胃癌组织中高表达，尤艿在分化差的腺癌中，表达率为75%癌旁组织中低表达或无表达，表达率为15%。(见图2,3)图2:免疫组化分析PDEF表达A：癌旁组织B:高分化胃腺癌C:低分化胃腺癌D:乳腺癌图3:PDEF在胃癌及癌旁组织中的表达率3讨论Ets转录因子家族参与细胞增殖、分化和凋亡等过程，在肿瘤发生发展过程中起着重要作用。PDEF

6、作为Ets家族新成员，在乳腺癌、前列腺癌、结肠癌、脑癌、卵巢癌组织中高表达[4,5】。但未见PDEF在胃癌中有报道。本研究从基因和蛋白二个水平，体内和体外二个方面证明PDEF在胃癌组织高表达。提示，PDEF与胃癌密切相关。有研究显示，高表达PDEF的乳腺癌患者更容易出现淋巴结转移。高表达PDEF的乳腺癌患者比低表达PDEF的患者预后差。在体外，PDEF能显著提高乳腺癌细胞株MCF-10A侵袭能力。将PDEF导入MCF-10A细胞株中表达能显著加快荷瘤小鼠肿瘤生长。这些研究提示PDEF是与肿瘤侵袭转移相关的基因，是肿瘤的一个预后分子标记。我们研究发现，PDEF基因在胃癌组织中高表达，尤其

7、在低分化腺癌中。因此我们猜想，PDEF基因可能是胃癌预后的一个分子标记，其在胃癌的侵袭转移中的具体作用及其机制，还有待进-步研究。参考文献[1]Hou,Q.,etal.,IntegrativegenomicsidentifiesRAB23asaninvasionmediatorgeneindiffuse-typegastriccancer.CancerRes,2008.68(12):p.4623-30.[2]Oettgen,P.,etal.,P