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1、衰变加速因子在胃癌中的表达浅析山东省济宁市第一人民医院检验科272000摘要：目的检测衰变加速因子(decayacceleratingfactor,DAF,CD55)在胃癌组织中的表达情况，分析DAF高表达在促进肿瘤细胞增殖、转移，进肿瘤血管牛长，逃避免疫监视的作用，探讨DAF高表达与肿瘤病理分期及临床转移的关系。方法免疫组化法检测132例胃癌和76例癌旁组织病例切片中DAF表达情况。结果免疫组化结果显示132例胃癌切片标木中，共有103例表达,DAF阳性率为78.1%；76例癌旁组织中,共有19例表达，DAF
2、阳性率为25.0%，肿瘤组织显著高于癌旁对照组，P<0.05o30例1~11期胃癌患者中，15例DAF表达阳性，阳性率为50.0%；56例山~IV期患者中，53例DAF表达阳性，阳性率为94.6%,ni期和IIMV期两者有显著差异,P<0.05oDAF高表达与胃癌lll・VI病理分期显著相关，可能与胃癌的恶性程度相关。关键词：胃癌；衰变加速因子(DAF,CD55)；免疫逃逸DAF是一种补体调节蛋白，表达于与血清补体蛋白紧密连接的细胞、血管外周细胞以及肿瘤细胞，可以抑制自身补体级联式激活的蛋白质。它被
3、认为可以保护细胞免受补体介导的细胞溶解作用，通过干扰C3转化酶(C4b2a和C3bBb)和C5转化酶(C4b2a3b和C3bBb3b)来制止补体级联反应升级，抑制C3b沉积,阻止抗原递呈细胞的吞噬，耐受NK细胞的杀伤作用⑴。SchmittCA在研究胃肠道肿瘤时指出，CD55保护肿瘤细胞免受有活性的补体攻击，其高表达也许是肿瘤的免疫逃逸机制［2］。肿瘤发生发展机制复杂，近年的研究表明，DAF不仅是一种补体调节因子，它在肿瘤的发牛过程中起着不容低估的作用。我们通过免疫组化技术检测病理组织切片，分析DAF高表达在促进
4、肿瘤细胞增殖，转移，逃避免疫监视中的作用以及DAF高表达与肿瘤病理分期的临床意义，为揭示胃癌发牛过程中的免疫逃逸机制提供新的理论和实验依据。1材料与方法1.1一-般资料本试验的研究对象为2013年12月至20014年9月在济宁市第一人民医院住院胃癌患者132例，均经手术治疗，病理诊断为胃癌，其中男性65例，女性57例，患者年龄36-73岁，平均45.6岁。同吋收集癌旁对照76例，其中男性41例，女性35例。年龄38-73岁，平均47.8岁1.2材料兔抗人CD55一抗，购自eBioscience公司；免疫组化检测
5、试剂盒，购自北京中杉金桥生物技术有限公司。1.3免疫组化染色方法分别滴加1：100稀释的兔抗人CD55.VEGF一抗，小鼠抗人PCNA—抗，4°C过夜。PBS(pH7.6)洗5分钟，洗3次。分别滴加羊抗小鼠、羊抗兔HRP标记的二抗,37°C30分钟。PBS(pH7.6)洗2分钟，洗3次。重复步骤以上两步骤。苏木素染色液复染。然后甘油缓冲液封片，镜下观察。1.4结果判断标准：结果为胞浆或胞膜表达，出现黄色反应为阳性，对照组相同部位不出现黄色为阴性。根据显色强度和阳性细胞数两项指标判断阳性等级。按显色强度分为：无色
6、、黄色、浅黄色、棕黄色，分别计分为0、1、2、3；按阳性细胞占同类细胞的比例分为：0、&It;1/3>1/3-2/3>>2/3,分别计分为0、1>2、3o两项计分相加，确定0分为•,1・2分为+,3・4分为++,5・6分为+++。1.5统计学处理方法实验数据采用SPSS11.5软件包进行处理，根据资料类型选择x2检验，相关分析等统计方法分析实验结果。2实验结果2.1肿瘤组织中表达DAF的细胞类型。2.2DAF在胃癌患者肿瘤组织和癌旁组织中的表达阳性率32例胃癌患者肿瘤组织DAF的阳性表达率为78.1%,2
7、0例癌旁对照组DAF的阳性表达率为25.0%,肿瘤组织显著高于癌旁对照组，P<0.05o2.3DAF高表达与胃癌病理分期的关系12例1~11期胃癌患者中，6例DAF表达阳性,阳性率为50.0%；20例lll~IV期患者中,19例DAF表达阳性,阳性率为95.0%,Ml期和lll~IV期两者有显著差异，P<0.05o3讨论近年研究证明，DAF保护肿瘤细胞免受有活性的补体攻击，DAF在消化道肿瘤细胞转录和翻译水平上存在过表达现象，其表达量可为正常细胞的4J00倍,而II与肿瘤的不良预后相关。DAF在肿瘤
8、和淋巴瘤白血病细胞表面呈过度表达,显著高于正常细胞。DAF也许可作为肿瘤细胞上的信号分子，促进肿瘤细胞生长。Niehans等，最近在多种癌细胞上检测到补体抑制蛋白CD46(MCP)、CD55(DAF)及CD59(Protectin)的表达，能协助I因子加速对C3b的灭活，避免C3b沉积在癌细胞表面，从而使红细胞不能通过其CR1受体与癌细胞发生免疫粘附，这可能是肿瘤免疫逃逸的机制之一。D
