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时间:2018-12-07
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1、色谱技术在中药指纹图谱中的应用李婵娟(佛山市中医院广东佛山528000)【摘要】在中药质量控制现代化的今天,利用先进的色谱技术来监测和控制中药材和中成药的质量,建立色谱中药指纹图谱,成为了一条可行、可靠的道路。木文就近年来不同的色谱法在中药指纹图谱的应用进行总结,展开探索。【关键词】色谱技术中药指纹图谱质量评价【中图分类号】R319【文献标识码】A【文章编号]2095-1752(2012)14-0034-02中药是一个复杂的未知混合体,具有多组分和多靶点的特点,成分种类繁多,含量差异大,虽然疗效大多已确证,但作用机制和活性成分还没完全明了。单味药材的检测存在准
2、确性和专属性差,而以“君臣佐使”相互制约和协调的复方制剂,无法用单一成分的检测模式来评价和控制其质量。另一方面,中医理论强调辨证论治,从整体上发挥作用,多半不是针对某个靶点,也不是若干成分的简单加合,因此现行药典中单靠一两个指标性成分的鉴别与含量检测不能代表中药的整体功效,也不能反映中药的内在质量。在现阶段以现代分析技术为依托,利用先进有效的分析手段和方法,运用综合的、宏观的、非线性的分析观念,是中药质量控制的必然趋势,而“中药指纹图谱”便因此引起药学界的极大关注。1中药色谱指纹图谱的发展状况中药指纹图谱是指中药经适当处理后,采用一定的分析手段,得到的能够标示
3、其特性的共有峰的图谱。中药指纹图谱是一种综合的、可量化的化学(不包括生物学)鉴定手段,可以鉴别真伪,评价原料药材、半成品和成品质量的均一性和稳定性,体现了中药作用的整体性和模糊性[1]。根据检测时采用的分析手段不同,中药指纹图谱可分为:生物技术指纹图谱和化学成分指纹图谱。其中化学成分指纹图谱分为色谱和光谱。化学指纹图谱通过主要特征峰的峰位,面积或比例,反映出化学成分的种类及数量的特征性,有效地判别真伪,评价优劣。虽然不同物质的光谱图有不同的特征,但光谱指纹图谱很难像色谱指纹图谱那样表达中药作为复杂化合物群的情形,所以中药质量标准实现指纹图谱技术的主流方法还是色
4、谱技术⑵。色谱具有分离和鉴别两种功能,加上量化的数据,提供的质量信息一般较光谱要丰富,本文就目前的中药色谱指纹图谱研究状况进行综述。2色谱技术在中药指纹图谱中的应用2.1薄层色谱法(TLC)TLC具有快速、经济、可靠、操作简单、适应范围广、展开剂灵活多样、直观性等优点[3],应用在中药鉴别频率最高。但其缺点为色谱展距局限在10cm-20cm,“柱效”相对较低,对于复杂组分分离度不高,难以提取到特征性信息。由于展开系统为开放性,受温度、湿度等外界因素影响较人,使得重现性受到限制。但对于一些化学成分比较单一、专属性较高的中药,还是可以采用。杨先国等⑷对10批玉竹样
5、品中黃酮类成分进行薄层分析,建立由10个特征荧光斑点构成的玉竹黄酮类成分的薄层指纹图谱,解决玉竹的专属性鉴别,并为其质量控制提供依据。2.2气相色谱法(GC)GC是封闭性色谱,受外界影响较少,快速,分离效能高,灵敏度高,稳定性好,特别适合于药材和制剂中挥发性成分指纹图谱的研究。GC能提供保留值信息,与质谱连用,还可以提供更丰富的化学结构信息。钱浩泉等⑸用GC-MS联用的方法对道地药材高良姜及不同地区收集的市场商品进行鉴别,发现高良姜的近缘植物草豆寇、红豆寇、益智及距花山姜的指纹特征明显不同,各自的特有的色谱构成相应品种指纹特征的唯一性。2.3高效液相色谱法(H
6、PLC)HPLC以经典液相色谱法为基础,引入气相色谱的理论与实验方法,发展而成的分离分析方法。其具有分离效能高、分析速度快、应用范围广等优点,因此成为指纹图谱中应用最多,技术最成熟的一类。如运用二极管阵列检测器(PDA),可得到三维图谱,对色谱峰进行纯度分析,排除不同组分对同一峰的干扰,可以解决指纹图谱与化学成分之间相关性不足的问题,因而适用于成分比较复杂紫外光区有吸收的药物的分析。尤其对成分差别较细微的单味药材及成分较为复杂的复方制剂,其分离与鉴定能力大大优于TLC。周浓等⑹肉桂酸作为指标成分,建立不同产地玄参药材的HPLC图谱,对不同产地药材进行相似度比较
7、,有助于玄参药材的标准化种植及质量控制。2.4高效毛细管电泳色谱法(HPCE)HPCE是以高压电场为驱动力,以毛细管为分离通道,依据样品中各织分之间的浓度和分配行为的差异而实现分离的一类液相分离技木⑺,具有分析速度快、分辨力强、重现性好等特点,能结合与之适应的的紫外、荧光、电化学、质谱、拉曼光谱等多种检测器。但其缺点为重现性差,在某种程度上制约了HPCE在指纹图谱中的广泛应用。胡平等⑻提取了菟丝子种子植物蛋白,用HPCE法进行生药鉴定。实验表明,同属不同种菟丝子的碱溶性或酸溶性蛋白在成分和含量上均有显著性差异,根据其种子槓物的蛋白电泳图谱可有效地鉴别菟丝子的来
8、源。2.5超临界流体色谱法(SFC)S
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