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时间:2018-12-07
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1、体外培养细胞的种类和命名体外培养细胞的名称,随培养细胞技术的发展和细胞种类的增多而演变。最早采用的名称为细胞株(Cellstrain),以后又出现细胞系(CellLine)一词,两者曾一度混用致概念不明确,导致文献中也很混乱。我W也曾有类似情况,在我国尚未制定出统一名词前,本书用的名词基本参考Schaeffer,W.I.(1979)和国内有关会议、以及国内外杂志常用名词为准。(一)初代培养初代培养又称原代培养,即直接从体内取出的细胞、组织和器官进行的第一次的培养物。一旦已进行传代培养(Subculture)的细胞,便不再称为初代培养,而改称为细胞系。(二)细胞系初代培养物开始第一次传代培
2、养后的细胞,即称之为细胞系。如细胞系的生存期有限,则称之为有限细胞系(FiniteCellLine);己获无限繁殖能力能持续生存的细胞系,称连续细胞系或无限细胞系(InfiniteCellLine)o无限细胞系大多已发生异倍化,具异倍体核型,有的可能已成为恶性细胞,因此本质上已是发生转化的细胞系。无限细胞系有的只有永生性(或不死性),但仍保留接触抑制和无异体接种致癌性;有的不仅有永生性,异体接种也有致瘤性,说明已恶性化。这两种不同性质的无限细胞系,在国内外文献屮对这些名词的应用上也常不十分严格。为概念上的明确,本书中对有恶性的无限细胞系釆用“恶性转化细胞系”一词表示可能更妥。而对那些只具
3、永生性而无恶性的细胞系,则用无限细胞系或转化细胞系即可。当前流传的NIH3T3、Rat-1、10T1/2等均属这类细胞系。由某一细胞系分离出来的、在性状上与原细胞系不同的细胞系,称该细胞系的亚系(Subline)。(三)克隆细胞株从一个经过生物学鉴定的细胞系用单细胞分离培养或通过筛选的方法,由单细胞增殖形成的细胞群,称细胞株。再由原细胞株进一步分离培养出与原株性状不同的细胞群,亦可称之为亚株(Substrain)(四)二倍体细胞细胞群染色体数目具有与原供体二倍细胞染色体数相同或基本相同(2n细胞占75°%或80%以上)的细胞群,称二倍体细胞培养。如仅数目相同,而核型不同的即染色体形态有改
4、变者为假二倍体。二倍体细胞在正常情况下具有限生命期,故属有限细胞系。但随供体年龄和组织细胞的不同,二倍体细胞的寿命长短各异。人胚肺成纤维细胞可传50代土10代,人胚肾只有8〜10代,人胚神经胶质细胞15〜30代;如从老龄个体取可传50则细胞生存期更短。由不同年龄供体取材建立的二倍体细胞系可供研究衰老之用。为保持二倍体细胞能长期被利用,一般在初代或2〜5代即大量冻存作为原种(StockCells),用时再进行繁殖,用后再继续冻存,可供长期使用或延缓细胞的衰老。(五)遗传缺陷细胞从有先天遗传缺陷者取材(主要为成纤维细胞)培养的细胞,或用人工方法诱发突变的细胞,都属遗传缺欠细胞。这类细胞可能具
5、有二倍体核型,也可呈异倍体。(六)肿瘤细胞系或株这是现有细胞系中最多的一类,我国己建细胞系主要为这类细胞。肿瘤细胞系多由癌瘤建成,多呈类上皮型细胞,常已传几十代或百代以上,并具有不死性和异体接种致瘤性。对已建成的各种细胞系或细胞株惯上都给以名称;细胞的命名无严格统一规定,大多采用有一定意义缩写字或代号表示。但不论什么形式,均不宜太长,以便记忆和了解,今别举以下几种代表性的细胞名称供参考:HeLa:力供体患者的姓名(来源于宫颈癌)CHO:巾国地鼠卵巢细胞(ChineseHamsterOvary)宫-743:宫颈癌上皮细胞,1974年3月建立NIH3T3:美国国立卫生研究所(National
6、InstituteofHealth)建立;每3天传代,每次接种3x105细胞/毫升。二、建立细胞系(或株)的要求关于什么样的体外培养细胞群,可被确认为是己被鉴定的细胞(CertifiedCells),国际上也尚无统一的规定,一般依具体情况而定。在只用作初代培养细胞,只要供体性别、年龄等均一,取材部位及组织种类等条件稳定,做鉴定的项0无需很多,有儿项能说明细胞的相关性状的即可。如能长期保存并可供其它研宄室使用,特别是做反复传代的细胞,习惯上有以下一些要求,并在刊物上报道时应加以说明。(-)组织来源应说明细胞供体所属物种,来自人体,动物或其它;供体的年龄、性别、取材的器官或组织;如系肿瘤组织
7、,应说明临床病理诊断,组织来源,以及病例号等。(二)细胞生物学检测应了解细胞一般和特殊的生物学性状,如细胞的一般形态、特异结构、细胞生长曲线和分裂指数、倍增时间、接种率;特异性,如为腺细胞有否特殊产物包拈分泌蛋白或激素等;如为肿瘤细胞,应力求证明细胞确系来源于原肿瘤组织而非其它,并仍保持性性,为此需做软琼脂培养、异体动物接种致瘤性和对正常组织浸润力等实验。(三)培养条件和方法各种细胞都有自己比较适应的生存环境,W此应指明使用的培养基
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