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1、2】卷第8期MedJChinPAPF,Vo1.2l,No.8,August,2010681人前脂肪细胞的体外培养李卫华,孙志成,王文【摘要】目的建立人前脂肪细胞培养及其在药物诱导下向脂肪细胞分化的细胞模型。方法取成人的腹部纯脂肪颗粒,采用消化法进行人前脂肪细胞的原代培养,并在培养液中加入胰岛素和地塞米松对细胞进行诱导。对培养细胞进行形态学研究,测定生长曲线,并用油红O染色法对前脂肪细胞向脂肪细胞的分化进行定性、定量研究。结果培养m的人前脂肪细胞呈梭形,成分均一,增殖旺盛。经胰岛素和地塞米松诱导后,通过油红0脂肪染色法测定,证明前脂肪细胞已向脂肪细胞分化。结论在成熟的脂肪组织中存在着可
2、以增殖,并可以分化成脂肪细胞的前脂肪细胞,经诱导后可以分化成成熟的脂肪细胞。【关键词】人前脂肪细胞;脂肪细胞;生物学特征;细胞培养【中国图书分类号】R318.1ThecultureofhumanpreadipocytesinvitroLIWeihua,SUNZhicheng,andWANGWen.DepartmentofBurnandPlasticSurgery,theAfiliatedHospitalofMedicalCollegeofChinesePeuple~ArmedPoliceForces,Tianjin300162,China【Abstact】0bjectiveToest
3、ablishthecellcultureofhumanpreadipocytesinvitroanditsapplicationindrug—induceddiffer—entiation.MethodsPureadulthumanabdominalfatparticlesweredigestedbycollagenase.ThepreadipocyteswerecollectedcentfiGugally.The(:ellsweremixedintheculturemediumwithinsulinanddexamethasone.Cultured(:ellsweremorphol
4、ogicallystudiedtode—tenninethegrowthcuiveandthedeterminationofcelldifferentiationwascarriedoutbyoilredOstaining,inwhichthefatdropsdepos—itedincellsweredetectedqualitativelyandquantitativelywithanenzynle—linkedimmunosorbentdetector.ResultsThepreadipo—eytesexhibitedthespindle—likecharacteristicsw
5、ithauniformcompositionandstrongproliferation.Inducedbyinsulinanddexametha—sone.thecellswerestaineddarkredby0i1redO.suggestingthatthefatparticlesweredepositedincells.ConclusionPreadipocytesexistinmatureadiposetissue.which(:anbeinducedtodifferentiateintolipocytesinvitro.【keywords】humanpreadipocyt
6、es;lipocytes;biologicalcharacteristics;cellculture脂肪组织中存在着组织特有的前体细胞,并美国GIBCO公司生产,胶原蛋白酶、胰岛素、地塞米能分化演变成各种各样的细胞,这些前体细胞称松、DMSO、油红O等均南美国SIGMA公司生产。为“前脂肪细胞”。在脂肪组织工程中,前脂肪细倒置相差显微镜由日本OLYMPUS公司生产,酶联胞是被公认的种子细胞,它是一类具有增殖分化免疫检测仪由美国BICKMAN公司生产。能力的特异化前体细胞,与脂肪移植成活率有密1.2标本采集本组10例标本取自腹部吸脂术患切关系。脂肪细胞的增殖分化能力对体外构建脂者的脂肪
7、组织。患者无结缔组织疾病或可能影响结肪组织起着非常重要的作用,获取足够多的组织缔组织代谢的疾病,无高血压、糖尿病、高血脂等慢并使获得的细胞有较强的增殖能力,是众多研究性疾病。3个月内未使用过类固醇、青霉胺、抗肿瘤者期待解决的问题。本实验应用体外细胞培养技药物等,未服用过减肥药等影响脂肪代谢的药物。术,研究了人前脂肪细胞培养的方法及促其向脂本组男1例,女9例,年龄21~45岁。肪细胞分化的可行性。1.3方法1.3.1前脂肪细胞的收集与培养将吸脂术后获1材料和
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