核仁素和ki-67在乳腺浸润性导管癌、乳腺纤维囊性变中的表达及意义

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1、核仁素和Ki-67在乳腺浸润性导管癌、乳腺纤维囊性变中的表达及意义李运千蒙国照张起通（广西桂林医学院附属医院病理科广西桂林541001）【摘要】目的探讨核仁素（Nucleolin,C23）和ki-67在乳腺浸润性导管癌、乳腺纤维囊性变屮的表达情况，研宄核仁素在乳腺癌发病屮的临床意义。方法在组织芯片上采用免疫组织化学Maxvision二步法检测40例乳腺浸润性导管癌、40例乳腺纤维囊性变屮核仁素及Ki-67的表达。采用SPSS12.0进行统计分析。结果核仁素在纤维囊性变的表达部位为细胞核，在乳腺浸润性导管癌屮除了细胞核外还有部分细胞的胞浆和胞膜亦有表达；Ki-67在乳腺浸润

2、性导管癌、纤维囊性变屮均为细胞核表达。核仁素和ki-67在乳腺浸润性导管癌、纤维囊性变屮的表达有显著差异（P<0.05）。结论核仁素在乳腺浸润性导管癌的发生、发展过程屮，其表达会有明显增高且从细胞核转移到胞浆，其与Ki-67可以作为细胞增殖的一个指标。【关键词】核仁素/NucleolinKi-67浸润性导管癌乳腺纤维囊性变乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤，近10年來，我国乳腺癌发病率明显上升，且呈年轻化趋势。近年来，随着分子生物学技术的发展，发现了一些和肿瘤发生相关的重要分子，其屮，核仁素（Nucleolin,C23｝是近年来研宂较多的一种核蛋白质，是真核细胞核仁屮最主要的一

3、种蛋白质［1］。它在调控核糖体的合成、细胞增殖生长、胚胎发生、染色质复制与核仁发生等方面发挥着重要作用。在大部分细胞，尤其是静止细胞，核仁素只表达于细胞的核仁内。最近研宄表明，在多种肿瘤细胞内核仁素过度表达，而丑表达于细胞胞浆及胞膜［2］。Ki-67抗原（简称Ki-67）是一种己经研究较多的与细胞周期相关的增殖细胞核抗原，在肿瘤的诊治与预后监测等方面均显示出重要临床价值。但核仁素在乳腺癌的表达及其与Ki-67的表达的关系还研究较少。组织芯片将近百个不同个体的组织标本集成在一张病理玻片上，实现了高通量、大样本的研究，达到提高研究效率以及避免不冋批次间操作差异的作用。1材料与

4、方法1.1组织标本乳腺疾病的组织芯片购自桂林泛谱生物技术公司，芯片上包含40例乳腺浸润性导管癌、20例导管上皮轻度增生的乳腺纤维囊性变、20例导管上皮中一重度增生的乳腺纤维囊性变的组织切片，病变的诊断均经病理医师认定。1.2主要试剂兔抗人核仁素单克隆抗体购自NOVUSBiotechnology公司，Ki-67小鼠抗人单克隆抗体、免疫组化Maxvision二步'法检测试剂盒及•他免疫组化配套试剂购自福州迈新生物公司。1.3免疫组化方法及结果判断免疫组化操作步骤采用Maxvision二步法，操作严格按照说明书进行。实验中每组均设置对照：以PBS代替一抗作为阴性对照，以已知结果

5、阳性的肝癌组织作为阳性对照。结果的判断：光镜下核仁素阳性表达表现为细胞核、胞浆或者胞膜出现棕色颗粒，K-i67阳性表达表现为细胞核出现棕色颗粒。半定量评分标准：每个组织片随机选取5个不重复的高倍视野(×400)。计数视野内阳性细胞的个数，阳性率=阳性细胞数/总细胞数×100%。<5%为0分，<25%为1分，25%-50%为2分，>50%为3分;基本不着色者为0分，着色淡者为1分，着色适中者为2分，着色深者为3分。以两种评分的乘积判定阳性等级：1分为阴性(-),2-3分为弱阳表达(+＞，4-6分为中阳表达(++)，＞6分为强阳表达(

6、+++)o1.4统计学处理釆用SPSS12.0进行统计分析。组间阳性率比较采用X2检验，各组组织病理分级比较采用Mann-WhitneyU检验，两者相关性采用Sperman检验。检验水准(α)为0.05。2结果2.1核仁素和Ki-67的表达情况核仁素在乳腺纤维囊性变的表达部位为细胞核，在乳腺浸润性导管癌中除了细胞核外还奋部分细胞的胞浆和胞膜表达;Ki-67在乳腺浸润性导管癌、纤维囊性变中均为细胞核表达，见图。2.2核仁素和Ki-67在乳腺纤维囊性变和乳腺浸润性导管癌表达冇显著差异（P<0.05），核仁素在导管上皮轻度增生乳腺纤维囊性变、导管上皮中-重度增生乳腺

7、纤维囊性变、乳腺浸润性导管癌的表达统计结果显示表达依次增高，差异均有显著性（P<0.05）。而Ki-67在导管上皮轻度增生乳腺纤维囊性变、导管上皮中-重度增生乳腺纤维囊性变之间的表达差异无显著性。见表1。表1核仁素和Ki-67在3种乳腺病变中的表达情况2.3核仁素和Ki-67的相关性经Sperman相关分析，核仁素和Ki-67在乳腺纤维囊性变和乳腺浸润性导管癌表达的阳性率分布呈正相关（P<0.05）。3讨论现有的研究表明，核仁素在肿瘤细胞及K•它快速分裂的细胞中表达量相对增高，在非分裂细胞或分裂慢的细胞中表达却非常低，因此，核