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1、乳腺浸润性导管癌论文：乳腺浸润性导管癌中paxillin和caspase-3的表达及临床意义【中文摘要】与背景乳腺癌是严重危害女性生命健康的最常见恶性肿瘤之一,近年来其患病率已跃居中国女性恶性肿瘤之首,乳腺浸润性导管癌(InvasiveDuctalCarcinoma,IDC)是乳腺癌中最大的一组异型肿瘤,恶性程度极高。针对乳腺癌发生机制及其浸润转移特点的研究已成为当今肿瘤研究的热点。桩蛋白(paxillin)是细胞骨架上的一种磷酸蛋白,可以结合粘着斑蛋白(vinculin),调节细胞移动和播散等功能,在整合素介导的细胞信号转导途径中发挥重要作用。在乳腺癌细胞的黏附、增殖、迁移和恶性转化过
2、程中paxillin发挥着关键作用,有可能成为乳腺癌的预后评估指标。天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(cysteinylaspartatespecificprotease-3,Caspase-3)作为caspase家族中重要的凋亡执行者之一,其介导的信号传导途径在细胞凋亡过程中发挥着独特的作用,caspase-3的表达异常通过对细胞凋亡过程的影响可能与恶性肿瘤的发生发展密切相关。caspase-3表达的降低在肿瘤的发生发展过程中起着重要作用。同时,paxillin可以作为caspase-3的裂解底物在细胞信号通路中发挥一定程度作用,预示两者在肿瘤发生发展中存在内在联系。本实验采用免疫组化
3、链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接(streptavidin-perosidase,SP)法主要研究两种蛋白之间及其与乳腺浸润性导管癌临床病理特征的关系,为乳腺癌的临床治疗和预后评估提供新的靶点。1材料与方法1.1临床资料随机选择2006年1月至2007年12月郑州大学第一附属医院乳腺外科手术切除的原发性乳腺浸润性导管癌标本60例(选取癌组织中央非坏死组织),另从中随机选择25例距癌灶约5cm经病理证实的正常乳腺组织作为对照。所有患者均为女性,年龄为25～71岁女性,中位年龄45岁；临床分期按国际抗癌联盟(UICC)规定的TNM分期标准进行划分,Ⅰ期19例,Ⅱ期26例,Ⅲ期15例；组织学
4、分级按世界卫生组织(WHO)乳腺癌组织学分类一书进行划分,Ⅰ级16例,Ⅱ级20例,Ⅲ级24例；腋窝出现淋巴结转移41例,无淋巴结转移19例。ER、PR及Her-2表达状态均以郑州大学第一附属医院病理科免疫组化结果为准。所有患者术前均未接受放、化疗和内分泌治疗,且均施行了乳腺癌根治术或改良根治术,术后常规病理证实为浸润性导管癌,所取乳腺组织均立即浸泡于10%中性福尔马林液中固定备用。1.2主要试剂鼠抗人paxillin单克隆抗体购自美国NeoMarkers公司,兔抗人caspase-3单克隆抗体购自武汉博士德生物工程有限公司,SP免疫组化超敏试剂盒和显色试剂盒(DABkit)均购自北京中杉
5、金桥生物技术有限公司。1.3免疫组化检测paxillin和caspase-3在所有标本中的表达。鼠抗人paxillin单克隆抗体和兔抗人caspase-3单克隆抗体的工作浓度分别为1：100和1：400,阴性对照用磷酸盐缓冲液(PBS)代替一抗。1.4统计学处理采用SPSS17.0统计软件进行数据处理。以x2检验及Spearman等级相关进行数据分析,检验水准α=0.05。2结果2.1Paxillin在乳腺浸润性导管癌组织和正常组织中的表达paxillin蛋白在乳腺IDC组中的阳性表达率为65.00%(39/60),paxillin在乳腺正常组织组中的表达率为40.00%(10/25),
6、paxillin在两组间的的表达差异有统计学意义(P<0.05),paxillin在乳腺癌组织中的表达强于乳腺正常组织。paxillin蛋白的表达与年龄、绝经与否、TNM分期、ER和PR表达均无明显相关性,paxillin蛋白的表达与组织学分级和淋巴结转移与否均具有相关性(P<0.05),paxillin的表达与Her-2状态具有相关性(P<0.05)。2.2Caspase-3在乳腺浸润性导管癌组织和正常组织中的表达Caspase蛋白在乳腺IDC组中的阳性表达率为45.00%(27/60),在乳腺正常组织组中的表达率为72.00%(18/25),caspase-3在两组间的的表达差异有统
7、计学意义(P<0.05),caspase-3在乳腺癌组织中的表达弱于乳腺正常组织。Caspase-3蛋白的表达与年龄、绝经与否、TNM分期、ER和PR表达均无明显相关性,caspase-3蛋白的表达与组织学分级和淋巴结转移与否均具有相关性(P<0.05)。2.3paxillin和caspase-3之间的关系经Spearman等级相关分析,在乳腺浸润性导管癌组织的表达中,paxillin和caspase-3蛋白表达呈负相关(r=-0.
