常见革兰阳性球菌的检验诊断

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1、常见革兰阳性球菌的检验诊断杨金新(黑龙江省大庆市油田总医院检验科163001}【中图分类号】R978【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2012)50-0152-02球菌是细菌中的一大类。对人类有致病性的病原性球菌(主要引起化脓性炎症，乂称为化脓性球菌，其中革兰阳性菌主要包括葡萄球菌、链球菌、肺炎球菌；革兰阴性菌括脑膜炎球菌和淋球菌等。1葡萄球菌葡萄球菌属是一群革兰阳性球菌，因常堆聚成葡萄串状。多数为条件致病菌，少数可导致疾病。金黄色葡萄球菌是最常见的化脓性球菌，是医院感染的重要来源。1.1生物学性状1.1.1形态染色球形或稍呈椭园形，直径1.0μm左右

2、，排列成葡萄状。葡萄球菌无鞭毛，不能运动。无芽胞，除少数菌株外一般不形成荚膜。革兰染色为阳性。其衰老、死亡或被白细胞吞噬后，以及耐药的某些菌株可被染成革兰阴性。1.1.2培养特性营养要求不高，在普通培养基上生长良好，在含有血液的培养基中生长更佳，需氧或兼性厌氧，少数专性厌氧。28〜38°C均能生讼,致病菌最适温度为37°C,pH为4.5〜9.8,最适为7.4。在肉汤培养基中24h后呈均匀混浊生长，在琼脂平板上形成圆形凸起，边缘整齐，表面光滑，湿润的菌落。金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上形成的菌落较大，多数菌株产生β溶血。1.1.3生化反应触酶阳性，能发酵葡萄球。根据

3、生化反应和产生色素不同，可分为金黄色葡萄球菌、中间型葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌三种。1.1.4葡萄球菌凝固酶和凝聚因子试验葡萄球菌凝固酶试验被广泛地用于常规鉴定金黄色葡萄球菌与其他葡萄球菌。试管法凝固酶试验称为葡萄球菌凝固酶，玻片法为检测凝聚因子。1.2微生物学诊断不同病型采取不同检材如脓汁、血液、可疑食物、呕吐物及粪便等。1.2.1直接涂片镜检取标本涂片，革兰染色后镜检，根据细菌形态，排列和染色性可作出初步诊断。1.2.2分离培养与鉴定临床标本中最常见是金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、溶血葡萄球菌、中间葡萄球菌等。首先用凝固酶试验将其分为凝固酶阳性的金黄色

4、葡萄球菌（包括中间和猪葡萄球菌）和凝固酶阴性的葡萄球菌，然后用新生霉素敏感试验区分凝固酶阴性葡萄球菌。葡萄球菌属种间细菌的鉴定常用生化试验。2肺炎链球菌肺炎链球菌。常寄居于正常人的鼻咽腔中。仅少数有致病力，是社区获得性肺炎的主要病原菌。2.1生物学性状本菌呈矛头状，成双排列，又名肺炎双球菌，在咳痰或脓汗中，有单个存在，成双或短链状排列，在液体培养基因常呈短链。在机体内形成荚膜，革兰染色阳性。兼性厌氧，营养要求高。在含有血的培养基中才能生长。最适温度37.5°C,最适pH为7.4〜7.8.初次培养需要C02培养箱。在血琼脂平板上可形成细小，灰色，有光泽的“脐窝状”扁平菌落，

5、菌落周围有草绿色溶血环。肺炎球菌抵抗力较弱。对一般消毒剂敏感。荚膜菌株干燥力较强，在干痰中可存活1〜2月。对青霉素、红霉素、林可霉素等敏感。但亦有耐药菌株出现。2.2微生物学检查不同病种采取不同的标本，如痰、脓液、血液、脑脊液等。涂片经革兰染以后镜检，根据典型的革兰色阳性具冇荚膜的双球菌存在，即可作出初步诊断。痰或脓液直接划线接种于血琼脂平板上，37°C孵育24h后，挑取α溶血的可疑菌落，作菊糖发酵试验、胆汁溶菌和Optochin敏感试验进行鉴别。发酵菊糖、被胆汗溶解，对optochin敏感者，则多数为肺炎球菌。脑脊液标本须先经血清肉汤增菌后，再接种于血平板。

6、3脑膜炎球菌和淋球菌3.1脑膜炎球菌脑膜炎球菌的学名是脑膜炎奈瑟菌，为流行性脑脊髓膜炎(流脑)的病原菌。3.1.1生物学性状为革兰阴性双球菌，在急性期或早期患者脑脊髓液中，大多位于中性粒细胞内，呈肾形成双排列，凹面相对。培养条件要求较高，普通培养基上不生长，在含有血清或血液的培养基上方能生长，如巧克力培养基。本菌为专性需氧菌，但初次培养时，在5%〜10%CO2低氧环境中生长最旺盛，最适pH7.0〜7.4，最适温度37°C，培养24〜72h后，菌落呈圆形、光滑、湿润、透明、微带灰兰色。在血清肉汤中均匀生长。本菌抵抗力弱，对寒冷、日光、热力、干燥、紫外线及一般消毒剂均敏感。对

7、磺胺、青霉素、链毒素敏感，但容易产生耐药性。3.1.2微生物诊断流脑流行期间，根据典型症状和体征不难诊断。对散发的或不典型病例，可采取瘀斑中血液、外周血液或脑脊液送检。带菌者可用末端2cm处弯曲的棉拭，深入口腔，直达悬雍垂后鼻咽腔部，小心旋转采取分泌物送检。(1＞涂片镜检将脑脊液(离心)、咽拭等标本作革兰染色，本菌呈典型形态，如发现白细胞内典型细菌则意义更大。结合临床表现，涂片阳性对诊断奋重要意义。(2)分离培养接种标本于巧克力及血平板上，咽、鼻拭标本可接种于双抗(含多粘菌素B、万古霉素)卵黄平板。35°C,5%〜10%CO2