临床医学毕业论文血红素加氧酶1在远端缺血预适应心肌梗死大鼠心肌中的表达

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1、血红素加氧酶1在远端缺血预适应心肌梗死大鼠心肌中的表达姓名:2014年6月25日作者:张冬会赵晓云康素娴卢亚敏邢邯英【摘要】目的观察血红素加氧酶1(HO1)及其产物在肾缺血预适应后的心肌梗死大鼠心肌中表达,探讨其在缺血预适应后心肌梗死大鼠心肌中的作用。方法实验分为2大组:心梗组及其假手术组和肾缺血预适应组及其假手术组。心梗组和肾缺血预适应组又分2、4、6、12h组;假手术组实验结束即处死;取12h组用伊文思蓝和TTC染色检测心肌梗死而积。用全自动生化仪检测血清屮肌酸激酶的同工酶(CKMB)和胆红素。用放免法检测血清屮的铁蛋白;用

2、逆转录多聚酶链反应(RTPCR)检测心肌组织中HO1基因的表达。结果肾缺血预适应组心肌梗死面积比心梗组明显降低;血清中各时间点铁蛋白和总胆红素的含量比心梗组明显升高;而CKMb含量比心梗组明显降低;心肌组织中HO1的表达比心梗组明显升高。结论肾缺血预适应能够减小心肌梗死而积,对心肌损伤具有保护作用。【关键词】肾;血红素加氧酶1;缺血预适应;急性心肌梗死【Abstract】ObjectiveToobservetheexpressionofhemeoxygenase1(HO1)mRNAinmyocardiumofacutemyoca

3、rdialinfarction(AMI)ratwithremoteischemicpreconditioning(IP)byrenalandexploreitseffectonischemicmyocardium.MethodsHealthymaleSDratswererandomlydividedintotwogroups:AMIandshamgroup;renalischemicpreconditioning(RIP)andshamgroup.AMIandRIPgroupsweredividedinto2,4,6,12hgr

4、oups.Ratsshamgroupsweresacrificed.MyocardialinfarctionareaweredetectedbyEvansblueandTTCin12hgroups.Thelevelsoftotalbilirubin(TB)andCKMbinserumweremeasuredwithautomaticbiochemistryanalyzer.Thequantityofserumferritin(SF)wasmeasuredwithradioimmunoassay.RTPCRwasusedtoinv

5、estigatetheexpressionlevelofHO1mRNA.ResultsComparedwithAMIgroup,themyocardialinfarctareawasdecreased,thelevelofTBandSFinserumwereincreased,theactivityofCKMbinserumwasdecreasedandtheexpressionofHO1mRNAwasincreasedsignificantlyinRIPgroup.ConclusionsRIPcandecreasethemyo

6、cardialinfarctareaandprotecttheinfarctedmyocardial.【Keywords】Renal;HO1;Ischemicpreconditioning;Acutemyocardialinfarction(AMI)1986年Murry等〔1〕首次报道了短暂心肌缺血再灌注可使随后发生的持续缺血心肌损伤明显减轻,并提出缺血预适应(IPC)的概念。Melo等〔2)发现转染血红素加氧酶1(hemeoxygenase1,HO1)基因可使结扎冠状动脉后的大鼠左室心梗面积缩小75%以上,并伴有心肌脂质过氧化

7、减轻、促凋亡的Bax减少、促炎症的IL1B减少和抗凋亡的bcl2增加,显示HO1具有抗心肌缺血坏死的功能。何洁等〔3)研究发现,心肌缺血预适应可导致HO1活性升高,但其在肾缺血预适应中的作用未见报道。本研宄R在阐述HO1在肾缺血预适应后对心肌梗死人鼠心肌的作用,探讨心肌梗死的防治途径。1材料与方法1.1材料逆转录酶(AMVRT)、核糖核酸酶抑制剂(RNasin),dNTP,TaqDNA聚合酶,随机引物,琼脂糖均购&美国Promega公司。铁蛋白(SF)的检测试剂购自北京原子高科试剂有限公司;胆红素(TB)和肌酸激酶的同工酶(CK

8、MB)检测试剂由美国贝克曼公司提供。1.2实验动物分组与模型制作健康雄性SD大鼠,体重240〜260g,由河北省实验动物屮心提供。实验大鼠随机分为2大组:(1)急性心肌梗死(AMI)组和假手术(As)组:开胸并暴露大鼠心脏,留线不结扎左冠状动脉前降支(LAD)为

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