脱氢表雄酮对内皮细胞no, et论文

《脱氢表雄酮对内皮细胞no, et论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、脱氢表雄酮对内皮细胞NO,ET论文周娟，杨予白，奥沛源，雷立权【关键词】内皮缩血管肽【Abstract】AIM:ToinvestigatetheinfluenceofdehydroepiandrosteroneonthesynthesisofNO,secretionofET1andtheexpressionofICAM1inendothelialcells.METHODS:TheculturedhumanumbilicalveinendothelialcellsECV304ediumetricmethodandradioimmunoassa

2、y.ThesurfaceexpressionofICAM1oncellsmunohistochemically.RESULTS:Inparisonediumdecreasedfrom(387±12)to(242±11)μmol/L(P0.05),buttheconcentrationofET1inmediumincreasedfrom(397±13)to(626±29)ng/L(P0.05)alongediumofcontrolgroupilarateverytimepoint（P0.05）,butDHEAtimedependentlyde

3、creasedthecontentofNO(P0.05).TheconcentrationofET1inmediumtimedependentlyincreasedbothincontrolgroupandinDHEAgroup(P0.05),anditenttime,DHEAdidnotaffecttheICAM1expression.CONCLUSION:DHEAcanadjustthefunctionofvesselsbyregulatingtheproductionofNOandET1ofendothelialcells.【Keyo

4、lecule1【摘要】目的：观察脱氢表雄酮对内皮细胞NO合成、ET1分泌及细胞表面ICAM1表达的影响.方法：培养的人脐静脉内皮细胞系ECV304经不同浓度和不同作用时间DHEA处理后，采用硝酸还原酶及放免法分别测定培养液中NO及ET1水平,用SABC免疫组化法观察细胞表面ICAM1的表达.结果：与对照组相比,随着DHEA浓度的增加，培养液中NO的含量从(387±12)降至(242±11)μmol/L(P0.05),而ET1的浓度却从(397±13)增至(626±29)ng/L(P0.05).随着时间的延长，各对照组培养液中NO含量均无明显

5、变化（P0.05），而DHEA组NO生成量却逐渐降低(P0.05).freela公司；NO含量试剂盒购自南京建成生物工程研究所,ET1含量试剂盒购自解放军总医院科技开发中心放免所，SABC免疫酶标试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司，其他相关试剂均为国产分析纯.1.2方法1.2.1细胞培养细胞经2g/L胰蛋白酶与0.2g/LEDTA的消化液消化后，用含100mL/L新生小牛血清的RPMI1640培养液制成细胞悬液，接种在培养瓶内，置于50mL/LCO2的培养箱中37℃培养，每2～3d更换培养液，生长融合的细胞，经消化后进行传代培养.1.2.

6、2NO及ET1水平的测定生长良好的内皮细胞经消化后，以5×107个/L接种于放有盖玻片的12孔培养板，待细胞贴壁，弃去旧培养液，用无血清培养液冲洗2遍，加入各种实验用液,继续培养相应时间后，收集上清，采用硝酸还原酶法测NO含量，放免法测ET1含量.1.2.3细胞表面ICAM1的表达收集完上清，取出附着有细胞的盖玻片，PBS冲洗3次，40g/L多聚甲醛固定，按SABC免疫酶标法进行.细胞中呈现棕褐色或棕黑色颗粒者为阳性细胞，每张切片选取5个视野，计算200个细胞中的阳性细胞数,取其均值.1.2.4实验分组1.2.4.1不同浓度DHEA对内皮细

7、胞功能的影响对照组为无血清培养基组,实验组为含终浓度分别为1，10，100，1000nmol/LDHEA的无血清培养基组，作用时间为24h.1.2.4.2不同作用时间DHEA对内皮细胞功能的影响对照组为无血清培养基组,实验组为加入终浓度10nmol/L的DHEA，作用时间分别为12，24和36h.统计学处理：数据以x±s表示，SPSS11.0统计软件分析，不同浓度DHEA对内皮细胞功能影响的结果采用单因素方差分析；不同作用时间DHEA对内皮细胞功能影响的结果采用重复测量方差分析，P0.05为有统计学意义.2结果2.1不同浓度DHEA对内皮细

8、胞功能的影响与对照组相比，DHEA可明显抑制细胞NO的合成，同时促进ET1的分泌(P0.05)，并呈浓度依赖.但各种浓度的DHEA对细胞表面ICAM1的表达均无影响(Tab1).