医学毕业论文乳腺癌组织和癌旁组织mgmt和gstπ蛋白表达的流式细胞术分析

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1、乳腺癌组织和癌旁组织MGMT和GSTit蛋白表达的流式细胞术分析姓名：2014年6月25日乳腺癌组织和癌旁组织MGMT和GST7T蛋白表达的流式细胞术分析作者：左文述，魏玲，宋现让，王兴武于志勇，毕晔【摘要】目的研究乳腺癌组织和癌旁组织06甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶（MGMT）和谷胱苷肽S转移酶7T（GSTtt）蛋白表达的临床意义。方法应用流式细胞术（FCM）分析MGMT和GSTtt蛋白表达。结果乳腺癌组织MGMT和GST7T表达显著高于癌旁组织（P0.05）。2种耐药相关蛋白在不同年龄、不同肿瘤大小、不同病理类型、不同临床

2、分期和雌、孕激素受体阴性与阳性患者间的表达均无显著差异（P0.05）。冇淋巴结转移组患者MGMT与无淋巴结转移组患者比较无显著差异（P0.05）。但GST7C表达在奋淋巴结转移组患者敁著高于无淋巴结转移组患者（P0.05）。和关分析敁示，MGMT与GSTti表达间无显著相关性（P0.05）。结论初步研究结果提示，MGMT蛋白表达可能与乳腺癌预•无关，不能作为乳腺癌的一个预肜指标。GST71表达与淋巴结转移状况冇关，冇可能成为预测乳腺癌预后的指标之一。【关键词】MGMT；GST7E；乳腺肿瘤；流式细胞术TheAnalysiso

3、fMGMTandGSTnProteinExpressionDetectedbyFlowCytometryinBreastCarcinomaTissuesandCorrespondingParaCarcinomaTissuesKeywords:MGMT;GSTn;Breasttumor;Flowcytometry06甲基鸟嗯呤DNA甲基转移酶（06methylguanineDNAmethyltransferase,MGMT）是从细菌到哺乳类机体中存在的一种独特的DNA修复蛋白，它可修复由烷化剂诱导而形成的06烷基鸟嘌呤DNA加

4、合物，减轻细胞DNA烷基化损伤，导致细胞对烷化剂类化疗药物产生耐药性。谷胱苷肽S转移酶71（GST兀）是GSTs家族的主耍成员，研究发现GSTtt高表达与肿瘤耐药关系密切，可能是多药耐药标志之一。迄今尚未见放用流式细胞术（FCM）同时定量检测乳腺癌屮MGMT和GSTK蛋白表达的研究报道。为进一步明确MGMT和GST7E在乳腺癌巾的表达意义，本研究检测了其在乳腺癌组织巾的表达情况，并探讨与患者临床病理特征等因素间的关系。1资料与方法1.1临床资料118例乳腺癌患者均为山东省肿瘤医院2002年10月〜2004年12月外一科住院病

5、例。患者女性，年龄21〜74岁，中位年龄51.6岁，全部行乳腺癌改良根治术或根治术治疗。肿瘤直径〉1.5cm,留取癌组织和距癌边缘lcm以上的癌旁腺体组织。患者全部经病理证实且术前未接受任何放、化疗治疗及其他治疗。组织学分类按照WHO（2003年）分类，包括浸润性导管癌95例，其他类型23例（浸润性小叶癌16例、髓样癌5例、粘液癌2例）。临床分期根据UICC（1997年）分期标准：I、II期92例，III期26例。冇腋淋巴结转移者82例，无腋淋巴结转移36例。1.2细胞免疫荧光染色的样品制备用组织搓网法制成单细胞悬液，70%

6、冷乙醇4°C固定24h，用含1%牛血清白蛋白（BSA）的PBS洗涤2次，调浓度为lxl06/ml。二步法进行免疫荧光染色，100…细胞悬液先加MGMT单抗（Chemicon,1:40）或GSTn单抗（BDPharmingen，1:10）10^1。室温避光反应30min后加二抗FITCIgGl（BDPharmingen，1:10）5（il,室温避光反应30mind.机检测。1.3FCM条件BD公句FACSCalibur型流式细胞仪，蛋白表达以相对荧光强度（RFI）表示。RFI=加单抗管细胞平均荧光强度/同型对照管细胞平均災光强

7、度。1.4统计学分析采用SPSS10.0软件，组织耐药相关蛋白表达呈非正态分介，表达用中位数（Median），比较用秩和检验。相关性采用Pearson相失分析。2结果2.1乳腺组织中MGMT和GSTk蛋白表达乳腺癌组织MGMT和GST兀表达分别为1.00〜8.26和0.12〜18.38，中位数分别为2.84和1.07;相应癌旁组织2种蛋0表达分别为0.67〜2.15和0.28〜1.34,中位数分别为1.24和0.68。经秩和检验，乳腺癌组织耐药相关蛋白表达与相应癌旁组织比较差异均宥显著意义（P0.05）,见图1、2。表1MG

8、MT蛋白表达与乳腺癌临床病理因索的关系屮表1和表2可见，2种耐药相关蛋白在不同年龄、不同肿瘤大小、不同病理类型、不同临床分期和雌、孕激素受体阴性与阳性患者间的表达均无敁著差异（P0.05）。有淋巴结转移组患者MGMT与无淋巴结转移组患者比较无显著差异（P0.05）。但GST71表达在冇淋巴