果蝇综合大实验设计

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1、果蝇综合大实验设计一、实验目的1、了解果蝇的生活史及其饲喂方法2、理解和验证分离定律3、了解两对不连锁基因的杂交方法，验证自由组合定律；4、正确认识伴性遗传的正、反交的差别，验证伴性遗传规律；5、理解连锁和交换的原理，学习实验结果的数据处理和重组值的计算方法，并绘制遗传学图。实验材料1、果蝇品种：遗传学实验室饲喂和保存的6号和26号品系品系体色刚毛翅形眼色6灰卷sn（1）短m（1）白w（1）26黑檀e（3）直长红实验器具与药品用具：解剖镜、麻醉瓶、毛笔、培养瓶、白瓷板、死蝇瓶，恒温箱，标签药品：乙醚，玉米粉蔗糖

2、、琼脂、丙酸、酵母粉、酒精玉米粉培养基：琼脂糖和玉米粉，加上酵母使其发酵，加入丙酸，目的是一来防止霉菌生长，二来果蝇偏好丙酸的味道试验原理分离定律：一对基因在杂合状态中保持相对独立性，而在形成配子时，又按原样分离到不同的配子中去。理论上配子分离比是1：1-子二代基因型分离比是1：2：1。若显性完全，子二代表型分离比为3：１。自由组合定律位于非同源染色体上的两对基因，它们所决定的两对性状在杂种第二代是自由组合的。根据孟德尔第二定律，一对基因的分离与另一对基因的分离是独立的，所以一对基因所决定得到性状在杂种第二代是

3、3：1之比．而两对不相互连锁的基因所决定的性状，在杂种第二代就表现为９:３:３:１的比例分离定律与自由组合定律验证：考察性状:体色眼色（基因位于不同染色体上）正交:♀黑檀体(aaX+X+)×♂三隐性(AAXWY)F1♀♂灰体红眼(AaX+XW,AaX+Y)F2(灰红9:灰白3:黑檀红3:黑檀白1)分离定律与自由组合定律验证世代统计日期正交:♀黑檀体(aaX+X+)x♂三隐性(AAXwY)反交：♀三隐性(AAXwXw)x♂黑檀体(aaX+Y)灰红灰白黑红黑白灰红灰白黑红黑白F2总计实际观察个数理论比例理论个数卡方

4、值P反交三隐性（AAXWXW)×♂黑檀体(aaX+Y)F1:♀灰体红眼:♂灰体白眼(AaX+XW:AaXWY)F2:灰红:灰白:黑檀红:黑檀白比例？伴性遗传考察性状:眼色，性别正交:黑檀体(X+X+)×三隐性(XwY)反交:三隐性(XwXw)×黑檀体(X+Y)配子X+Xw,YXwX+,YF1X+Xw×X+YXwX+×XwYF2X+X+X+YX+XwXwYXwXwX+YX+XwXwY红眼与白眼的比例为3:1红眼与白眼的比例为1:1,雌雄各占一半没有白眼雌蝇.隔代遗传交叉遗传伴性遗传的特点：一、正交反交不一样二、隐

5、性基因在雌雄个体上的分配不同三、交叉遗传和隔代遗传伴性遗传的验证世代统计日期正交：♀(黑檀体)X+X+×♂(三隐性)XwY反交：♀(三隐性)XwXw×♂(黑檀体)X+Y雌雄雌雄红白红白红白红白F2总计实际观察个数理论比例理论个数卡方值P验证连锁遗传规律，基因定位，计算单交换，双交换的数据，及基因间的距离。测交后代的表现型第1次统计个数第2次统计个数总计第3次统计个数根据测交后代的表现型推知F1配子种类交换类别红长直白短卷红长卷白短直红短卷白长直红短直白长卷连锁遗传（考察性状：眼色，刚毛，翅形）三点测验的原理三点

6、测验是可以通过一次杂交实验同时确定3个连锁基因在同一染色体上的相对位置。其方法是：先将含3个待测基因的三隐性纯合体与野生型果蝇杂交，得到F1三杂合体，再以F1杂合体与相应的三隐性纯合体测交。由于测交后代的表现型反映的实际上是F1代的配子类型，因而可以根据测交结果统计发生交换的个体数，推算出交换值，以确定基因间距离和相对顺序，绘制连锁图。在连锁图上，基因的距离以m．u．(geneticmapunit)或cM(centMorgan)表示。交换值为1％，即表示基因间距离为1m．U。含有三个待测基因的三隐性纯合体与野生

7、型果蝇杂交得到F1三体杂合体，再以F1杂合体与相应的三隐性纯合体测交得到的测交后代中多数个体表型与亲本相同，同时也会出现少量与亲本不同的个体，称重组型。重组型是基因间发生交换的结果下图为杂交后8种配子的形成示意图测交后代表型观察数基因是否重组m-sn1m-ww-sn总计重组值实验步骤1.在杂交前19－20天按杂交组合数量，计划和培养好亲本。2.收集处女蝇：一般选择在晚上9点钟把亲本(种蝇)全部活的成虫转出处死（一个都不能剩），第二天9点钟前（12小时内，最好8－10小时内）把培养瓶里羽化的成虫转出，并按♀、♂分

8、开培养，所得的♀蝇即为处女蝇。3.按各杂交组合需选的果蝇品系，每瓶放入3－5对，塞好瓶塞，贴好标签，置于25℃恒温培养箱中培养。4.过6－7天，可见到F1幼虫出现，即除去亲本成虫（成虫一定要除干净）。5.再过4－5天，观察各杂交组合F1成蝇的性状，观察时要注意所有用具都要消毒（用于培养F2），并做好记录。6.分别把各杂交组合F1果蝇适度麻醉，然后选3－5对移入新的培养基中继续培养（无需