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时间:2019-10-25
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1、实验步骤(一)果蝇的采集将腐烂的香蕉皮或其他含糖量高的水果装在广口瓶内,用一层白纸封口,在纸上开几个小洞,吸引果蝇进入。若将广口瓶置水果摊附近,更易采到果蝇。(二)果蝇的饲养将采集到的果蝇转入含有玉米粉饲料的广口瓶内(注意雌雄果蝇至少3对),室温下培养,观察并记录果蝇的生活史。(三)果蝇的雌雄识别1、果蝇麻醉:将果蝇成虫转至一个新的广口瓶内,在棉塞上滴几滴乙醚后迅速盖上,注意摇动广口瓶使乙醚在瓶内充分扩散。果蝇对乙醚很敏感,易麻醉。麻醉程度因需要而异,当翅膀外展45°表示已死亡。2、成虫观察:腹部特
2、征肉眼即可看到,性梳(♂)可在低倍境下观察。(四)果蝇的杂交目的:验证孟德尔定律(一、二)和伴性遗传规律。过程:1、原种选择—纯合亲本,处女蝇挑选(成虫8h内)2、杂交:麻醉,3~5对,20℃~25℃培养3、根据生活史计算F1、F2的性状的数量,统计分析。(五)果蝇唾腺染色体的制备1、取一头三龄幼虫至干净的载玻片上,加一滴生理盐水,若虫体带有少量培养基则将其洗净。幼虫具一钝尾和带黑色口器的尖头端。三龄幼虫是最大的幼虫,行动迟缓,贴壁,或在培养基表面爬行。2、两手各握一把解剖针,左手的解剖针压住幼虫的
3、后端1/3-1/2处,固定幼虫。右手的解剖针按住幼虫的头部,用力向右拉,把头部从身体拉开,唾腺随之而出,唾腺是1对透明的棒状腺体。显微镜下,唾腺呈透明状态,由几十个单层细胞构成,细胞形状不规则,轮廓清晰,细胞核大。与脂肪体伴生存在。3、在载玻片上除去幼虫其他组织部分,最好把唾腺周围的白色脂肪体剥离干净。生命与环境科学学院实验报告果蝇的雌雄识别果蝇的饲养果蝇的采集实验课名称遗传学实验实验名称果蝇综合实验成绩______________实验原理及目的实验目的1、掌握果蝇采集和饲养方法,了解果蝇的生活史;
4、2、掌握雌雄果蝇成虫的特征及性别鉴定方法;3、掌握果蝇唾腺染色体的制备方法,熟悉其结构特征,理解其形成原因。实验原理1、生物学特征果蝇(Drosophilamelanogaster),昆虫纲,双翅目,果蝇属,2n=2x=8果蝇雌雄异体,幼虫期区分较难,成虫区别容易。雄性的腹部环纹5节,末端钝而圆,颜色深。第一对跗节前端表面有性梳。雌虫腹部环纹7节,末端尖,附节前端无性梳。生活史(完全变态):卵→幼虫→蛹→成虫。2、唾腺染色体的特征双翅目类昆虫(摇蚊、果蝇等)幼虫形成后,唾腺细胞数目不变,但染色体进行
5、核内有丝分裂,染色单体数量增加,幼虫越大增加的量越大,最多一条染色体有5000条染色单体,所以称为多线染色体。多线染色体处于间期,未高度螺旋化,经染色后,出现深浅不同、密疏各异的横纹,这些横纹的数目和位置往往是恒定的,代表着果蝇等昆虫的种的特征。如染色体的缺失、重复、倒位、易位等,容易在唾腺染色体上识别。实验材料、仪器及试剂仪器:广口瓶(带棉塞、一个含有果蝇玉米粉饲料),解剖针,镊子,载玻片及盖坡片若干、显微境材料:用于采集果蝇的水果(皮),采集后、自己饲养的果蝇试剂及其他:乙醚,1%醋酸洋红,生理
6、盐水,果蝇玉米粉饲料姓名王大锤实验报告系列年级学号组别时间温度图1雌雄果蝇对比果蝇的杂交果蝇唾腺染色体的制备4、在干净的唾腺上加一滴醋酸洋红染色液,固定并染色10~15min后,盖上干净盖玻片,用滤纸先轻轻压下,以吸去多余的染液。然后放在平的桌子上,用带有橡皮的铅笔或木夹子等反复轻击打(注意不能使盖玻片移动),直至染色体散开。5、在低倍境下找到唾腺组织,在油镜下观察多线染色体特征。实验结果abcde图2果蝇综合实验图片(a.雄蝇性梳(40×)b.c.d.果蝇幼虫唾腺(1000×)e.果蝇幼虫唾腺染色
7、体(1000×))分析讨论1.以图显示,雌雄果蝇的背部形态特征及前足的性梳。如图1,雄蝇末端钝而圆,颜色深。第一对跗节前端表面有性梳;雌蝇末端尖,附节前端无性梳。如图2,第一对跗节前端表面有性梳,大约为10节。2.麻醉果蝇时应注意哪些事项?在棉塞上滴几滴乙醚后迅速盖上,注意摇动广口瓶使乙醚在瓶内充分扩散,麻醉时注意实验室保持通风麻醉程度的判断,当翅膀外展45°表示已死亡。3.果蝇唾腺染色体有哪些主要特征?(1)形状为带状;(2)核不分裂,由于染色体不断复制,形成了多线性染色体,宽度增加,同时长度也增
8、加,成为巨型染色体;(3)带的全长几乎都有明显的嗜碱性的横纹,横纹的宽度有大有小,密度有疏有密,但是它的数目,位置等等对于同源染色体来说却都是同样的;(4)各条染色体在异染色质多的着丝粒附近互相靠拢,与核仁一起在核的中央形成一个染色中心。唾腺染色体的一条或几条横纹常显著膨起。4.观察果蝇唾腺染色体在遗传学研究上有什么意义?唾腺染色体是遗传分析的理想材料,唾腺染色体存在于双翅目昆虫幼虫消化管(尤其是唾腺)中的巨大的、可见的染色体,要比一般的染色体大,易于观察;巨大而伸展
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