tgfβ1与smad23在乳腺癌组织中的表达及意义

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1、TGF31与Smad23在乳腺癌组织中的表达及意义［摘要］目的研宄TGF01与Smad2/3在乳腺癌组织中的表达，揭示其在乳腺癌中的信号转导通路。方法应用免疫组化SABC法检测62例乳腺癌组织中TGFM与Smad2/3的表达情况，利用SPSS19.0统计学软件分析TGF31与Smad2/3的差异性及相关性。结果TGFP1与Smad2/3在乳腺癌组织中呈高表达，阳性表达率依次为69.35%(43/62)和40.32%(25/62)。TGFP1与Smad2/3在乳腺癌组织中的表达与年龄无关，TGF31与Smad2/3在组织学分级、

2、病理学分类、TNM分期方面差异均有统计学意义(P［关键词］乳腺癌；TGF31；Smad2/3；相关性［中图分类号］R737.9［文献标识码］A［文章编号］1673-9701(2015)17-0011-03转化生长因子3(transforminggrowthfactorbeta,TGFP)是一族能引起细胞产生表型变化、具有多种生物学功能的蛋白多肽，可调节多种正常细胞或瘤细胞的生长分化。目前研究［1，2］表明：TGF0/Smads信号途径不仅在细胞及生物体生长和发育过程中起重要作用，而且与人体肿瘤的发生、发展有密切关联。TGF/S

3、mads信号转导途径中一旦发生异常就可引起信号转导紊乱，从而导致肿瘤的发生［3］。所以探讨TGF31与Smad2/3在乳腺癌组织中的表达，有利于揭示其在乳腺癌中的信号转导通路。1资料与方法1.1一般资料选取阜新市中心医院2004〜2014年间62例乳腺癌存档标本。患者年龄27〜78岁，平均49岁。组织学分级按照Elston等［4］提出的Bloom-Richardson分级（即Nottingham分级），对每例乳腺癌组织从腺管形成、核分裂数和癌细胞异型性3个方面进行评分，按所得总分进行分级:3〜5分为I级，6〜7分为II级，8〜

4、9分为III级，I级14例，II级25例，III级23例。病理学分类方法参照WHO1981年制定的乳腺癌分类［5］：导管内癌8例、浸润性导管癌48例、浸润性小叶癌4例、浸润性特殊癌2例。根据国际抗癌联盟（UICC）关于TNM分期方法［6］进行临床分期：I期8例，II期14例，III期32例，IV期8例。1.2试剂及方法1.2.1主要试剂鼠抗人TGF01多克隆抗体，鼠抗人Smad2/3多克隆抗体（美国，SantaCruz）,SABC免疫组化染色试剂盒，DAB显色盒（武汉博士德生物工程有限公司）。1.2.2方法应用免疫组织化学染色

5、SABC法观察TGF01与Smad2/3在乳腺癌中的表达分布情况。切片常规脱蜡至水，浸入枸橼酸盐缓冲液，然后微波加热15min,室温冷却后PBS冲洗3次；用3%H2O2室温(10min)灭活内源性酶，PBS冲洗3次；湿盒内滴加5%BSA封闭液，室温(20min)甩去多余液体，不洗；滴加稀释度为1:100的一抗，4°C过夜，PBS冲洗3次；滴加生物素化山羊抗兔IgG，37°CT30min,PBS冲洗3次；滴加试剂SABC，37°C下30min，PBS冲洗4次(以上PBS浓度均为0.01mol八)；DAB显色，室温控制反应，蒸馏水

6、充分洗涤；苏木素轻度复染，梯度酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封片，显微镜下观察。每次染色流程均设有对照作为染质量控制标准。阳性对照用SantaCruz公司已证实的阳性TGF31与Smad2/3切片为对照，以PBS代替一抗作为阴性对照，至少由2名有经验的病理医师独立观察切片。1.2.3结果判定在200倍视野下随机选取5个视野，记数每个视野中肿瘤上皮细胞的染色情况，取平均值。TGF01与Smad2/3阳性着色位于细胞质中呈弥漫或散在的棕黄色颗粒。根据瘤组织中阳性细胞的有无及数量，将其分为阴性(-):未见阳性细胞；弱阳性(+)：阳性

7、细胞少于10%;阳性(++)：阳性细胞11%〜30%;强阳性(+++)：阳性细胞多于30%［7］。1.3统计学处理采用SPSS19.0统计学软件包进行数据分析，采用x2检验或Fisher精确概率法分析TGFP1与Smad2/3在乳腺癌中阳性表达的差异性，Spearman相关分析TGFP1与Smad2/3在乳腺癌中阳性表达的相关性。P0.05),TGF01与Smad2/3在组织学分级、病理学分类、TNM分期组中的表达差异均有统计学意义(P3讨论乳腺癌的发生是由多种异常癌基因和抑癌基因共同作用的积累。癌基因的激活和抑癌基因的失活导

8、致宿主代谢发生改变，细胞信号转导失常，从而导致细胞异常分裂诱导癌变，这是肿瘤发生的根本原因［8］。TGF3至少有6种异构体形式，TGF31>TGF32和TGF03，有60%〜80%的序列同源［9］。各种异构体在许多生物反应中表现出相似的作用，其中TGF31最为重要，是人体内主