基因功能分析策略

《基因功能分析策略》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、基因功能分析（AnimalGeneticEngineering）第十二章主要内容第一节转基因第二节基因敲除第三节动物克隆技术第四节RNAi技术第一节转基因技术（Transgenictechnology）1转基因与转基因动物转基因超级鼠1982年，英国的《自然》杂志发表了一篇文章：有两个美国实验小组利用转基因技术，将大鼠生长激素重组基因导入到小鼠受精卵中,培育出具快速生长效应的“转基因超级鼠”。转基因鼠比与它同胎所生的小鼠生长速度快2～3倍，体积大一倍。概念转基因：1）将人工分离和修饰过的基因导入到生物体基因组中

2、，由于导入基因的表达，引起生物体的性状的可遗传的修饰，称之为转基因技术。2）转基因技术就是指利用分子生物学技术，将某些生物的基因转移到其它物种中，改造生物的遗传物质，使遗传物质得到改造的生物在性状、营养和消费品质等方面向人类需要的目标转变。转基因动物：所谓转基因动物就是指以实验方法将外源基因导入动物染色体基因组内稳定整合并能遗传给后代的一类动物。ProducingtransgenicanimalsDirecttransfectionorretroviralinfectionofembryonicstemcell

3、sfollowedbyintroductionofthesecellsintoanembryoattheblastocyststageofdevelopmentRetrovialinfectionofearlyembryoDirectmicroinjectionofDNAintooocytes,zygotesorearlyembryocellsSperm-mediatedtransferTransferintounfertilisedovaPhysicaltechniquessuchasbiolisticsor

4、electrofusionNucleartransfer转基因动物由于“外源DNA”导入而产生了可以遗传的改变。这些可遗传的改变包括：外源DNA片段至少整合到一条染色体的一个位点上；外源DNA的插入使基因组中任何一个基因的结构发生改变；外源DNA的插入使染色体发生重排；导入可以持久存在的遗传实体，例如，一条人工染色体或者可以自我复制并传递给子细胞的非染色体元件。IntroducingClonedGenesintoCulturedMammalianCellsIntroductionofmethodsDNATran

5、sfectionMediatedbyLipofectionCalcium-phosphate-mediatedTransfectionofEukaryoticCellswithPlasmidDNAsCalcium-phosphate-mediatedTransfectionofCellswithHigh-molecularweightGenomicDNATransfectionMediatedbyDEAE-Dextran:High-efficiencyMethodDNATransfectionUsingPoly

6、breneDNATransfectionbyElectroporation转基因的方法1、显微注射法：将DNA注射到胚胎的细胞核内，再把注射过DNA的胚胎移植到动物体内，使之发育成正常的幼仔。2、体细胞核移植方法：先在体外培养的体细胞中进行基因导入并筛选。然后将带转基因体细胞移植到去掉细胞核的卵细胞中，生产重构胚胎。Microinjection用显微注射针将外源基因直接注入实验动物受精卵的原核，使外源基因基因整合入动物基因组中，从而得到转基因动物。是目前常用的转基因方法。导入基因的速度快，操作简单，对DNA大小

7、无限制。Pronuclearmicroinjection3．逆转录病毒感染法：最早用来得到转基因小鼠的方法，利用逆转录载体将遗传信息以RNA分子的形式，在逆转录整合酶和逆转录基因组末端的特异性核酸序列的作用下，反转录并整合到宿主基因组中去，最终得到转基因小鼠。4．胚胎干细胞法：将转染的胚胎干细胞注射入受体囊胚腔，可参与嵌合体的形成，将来出生的动物的生殖系统就有可能整合上外源基因，通过杂交繁育得到纯合目的基因的个体，即为转基因动物。转基因的方法转基因动物的应用前景1、研究基因的结构与功能，了解动物生命现象的内在本

8、质。2、建立多种疾病的动物模型，研究发病机理及治疗方法。3、改善动物生产性能，提高动物育种效率。4、作为医用或食用蛋白的生物反应器。可以通过家畜乳腺分泌大量安全、高效、廉价的人体药用蛋白。四个主要国家转基因作物种植面积占全球９９％。美国占６６％，达３９００万公顷，转基因作物产量也居世界第一，美国种植的７５％的大豆、３４％的棉花和７１％的玉米都是转基因作物。阿根廷占２３％，达１３５０万公