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时间:2018-12-03
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1、ELISA检测Torch的方法学探讨摘要:目的探讨ELISA检测TorchIgG和IgM的临床价值,指导临床对筛查指标的选择。方法回顾性分析2014年1〜9月来我院就诊的早孕妇女或待孕妇女的torch检测结果,评估torch各检测项目的阳性检出率。结果ToRCH-IgG检测阳性率分别为RUB-IgG86.84%、HSV2-lgG86.22%、CMV-IgG73.43%、HSVl-IgG23.58%、HSVl-IgG1.38%;ToRCH-IgM则无1份阳性结果。结论ELISA法检测TorchIgM阳性率低,可能不适用于临床进行torch的诊断筛查。关键词:torch;igM;igG从Tor
2、ch概念的提出至今已近半个世纪,Nahmia将复杂的围产期感染综合后称之为torch,即弓形虫(Toxoplasmosis,To)、风疹(Rubella,R)、巨细胞病毒(Cytomegalovirus,C)、单纯痗疹病毒1型或2型(HerpesSimplexVirus,H)。近年来,随着超声诊断和核磁共振等技术的引进和发展,发现越来越多的胎儿先天畸形与torch感染有关。然而,妊娠期4种病原微生物抗体筛查实验应不应该做?怎样做?至今在医学界仍存在较大争议。基于此,本研究回顾性分析2014年1〜9月我室检测的Torch结果,对ELISA法检测Torch的临床价值进行探讨。1资料和方法1.1
3、试齐IJTorchIgG、TorchIgM试剂盒(贝尔生物技术有限公司,北京),质控品(上海临检中心)。1.2仪器BioTekELX808酶标仪(美国)。1.3标本2014年1月〜9月来我院就诊的早孕妇女或待孕妇女共2274例。1.4方法严格按TorchIgG、TorchIgM试剂盒说明书操作,同时进行室内质控。室内质控在控后出具检测报告。1.5检测结果检测结果所示,2014年1〜9月送检至我室的标本中未检出ToRCH-IgM阳性标本,ToRCH-IgG检测阳性率分别为RUB-IgG86.84%、HSV2-lgG86.22%、CMV-IgG73.43%、HSVl-IgG23.58%、HSV
4、l-IgG1.38%,见表1。2讨论经典的torch感染在围产医学中称为torch综合征,是一组以胎儿中枢神经系统受损为主,多器官受累的临床症候群。包括小头畸形、脑积水、脑内钙化,迟发性中枢神经系统障碍,耳聋、自内障、视网膜脉络膜炎、先天性心脏病、肝脾肿大、骨髓抑制、胎儿宫内发育迟缓等。torch在临床诊断上通常检测针对相应病原的IgM或IgG。特异IgM在感染早期出现,以后逐渐被IgG取代。IgM阳性,尤其是高滴度的特异IgM抗体,提示可能有相应病原体的急性感染;病程中IgG增高4倍及4倍以上,代表近期感染或继发活动感染;IgG检测单项阳性则表明被检者有过既往感染或接种过疫苗,具备一定的
5、免疫力[1,2]。以巨细胞病毒(CMV)感染为例,CMV是宫内感染最常见的原因,在活产儿中发病率为0.2%〜2.2%,初次感染和复发感染的孕妇宫内垂直传播和胎儿感染的风险明显不同,前者为30%〜40%、后者仅为1%[3]。但是,CMVIgM抗体在初发感染和复发感染的孕妇血清中均可出现[4],妊娠期初次感染的血清学诊断主要依据血清转化现象(之前血清反应阴性的孕妇出现特异性IgG抗体,即IgM阳性+IgG定量检测上升,15d后转为阳性发生血清转化=初次感染),或检出病毒特异性IgM抗体并伴随低亲和力IgG抗体[3]。因此,ELISA法为定性检测项目,仅用ELISA法进行CMV感染的初筛,无法确
6、诊孕妇何时感染。从成本效益出发,ELISA法用于抗体检测因其特异性强、敏感性高、操作简单的特点,广泛应用于临床实验室。我室2014年1〜9月torch检测结果表明,elisa法检测torchigG具有较局的敏感性,但检测TorchigM的敏感性极低。这一方面可能是筛选人群的因素,即人群中确实是此种现象;另一方面也可能是ELISA法自身缺陷造成,如易受类风湿因子、抗核抗体的干扰,产生假阳性或假阴性结果。研宄结果和William等认为IgG检测的敏感性和特异性很高,而IgM敏感性低的观点一致[1]目前,国内检测torch的诊断方法多用elisa法且诊断试剂盒品牌繁多,但试剂盒质量的差异也很大,
7、即试剂的灵敏度有较大差异:不同试剂间不仅检测的s/co值差异明显,而且数据的离散程度也不相同;即使用同一家试剂检测同一份样本,s/co值有的达10倍以上的差异[6,8]。TorchIgM阳性率低除了试剂因素外、检测人员的操作及环境因素都可影响结果的准确性。综上所述,ELISA法检测TorchIgM阳性率低,不能判断初发感染和复发感染,且检测耗费大量人力财力,ELISA法并不适合临床进行Torch的诊断筛查。参考文献:[1
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