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1、流式细胞术检测食管癌细胞DNA含量的临床意义作者：凌雨田许沈华朱赤红【摘要】目的了解食管癌细胞DNA指数（DI）、S期细胞百分率(SPF)、细胞增殖指数(PI)的临床意义。方法应用流式细胞仪检测64例食管癌手术标本的癌细胞和距癌远端食管切缘粘膜细胞DI、SPF、PI值，并结合随访资料进行临床病理分析。结果根据DI值，研究对象分为二倍体组(0.90～1.10），亚二倍体组(1.11～1.20）和异倍体组(>1.20)，分别占53.1%(34/64),21.9%(14/64),25.0%(16/34)。异倍体癌细胞DI、
2、SPF、PI值高于二倍体组（P<0.01）。食管癌异倍体组I～II期病例占18.8%(3/16),低于二倍体组52.9%（18/34）（P<0.05）。食管癌异倍体组无淋巴结转移病例占25.0%(4/16),低于二倍体组55.9%（19/34）（P<0.05）。异倍体组与亚二倍体组同时SPF>10%的患者中无淋巴结转移例数占29.4%(5/17),低于二倍体组无淋巴结转移例数52.9%（18/34），有统计学差异（P<0.05）。结论食管癌细胞DI值与临床分期、淋巴结转移密切相关。与食管癌患者
3、生存无显著相关，同时癌细胞的SPF值与淋巴结转移密切相关。【关键词】食管癌DNA指数S期细胞百分率存活率FCM【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheclinicalsignificanceofDNAindex(DI),S-phasefraction(SPF),cellproliferationindex(PI)inesophagealcarcinomacells.MethodsDNAcontentanalysisbyFCMedincancercellsandmucosalcellsindis
4、talsurgicalmarginisolatedfrom64operativetissuesamplestodeterminetheDI,SPF,PIvaluesinesophagealcarcinomacells,informationsonfolloakeaclinicalpathologicalananlysis.ResultsReserachsubjectsapatientsapatientsphnodemetastasisapatientsphnodemetastasis,harboringmorethan10
5、%SPFapatientsphnodemetastasis,paringhypodiploidorneardiploidcancercellsapatientsacellsiscolselyrelatedtostaging,lymphnodemetastasisandisnotsignificantlyrelatedtosurvival.SPFvalueisclosedrelatedtolymphnodemetastasis.【Key)食管癌是我国高发恶性肿瘤之一，其预后差，病死率高，严重威胁人类生命健康。应用流式细胞术（
6、FCM）来检测肿瘤细胞DI、SPF、PI为临床提供诊断、疗效评价，预后评估在国内外已被广泛接受。但目前国内检测食管癌细胞DI、SPF、PI报道不多［１～３］。作者用FCM检测64例食管癌细胞DI、SPF、PI值，并结合随访资料进行临床病理分析如下。1资料与方法1.1一般资料取1998年12月至2000年9月在浙江省肿瘤医院胸外科住院的食管癌病人手术标本，应用FCM检测64例食管癌组织和距癌远端切缘正常食管粘膜细胞DI、SPF、PI值。男51例，女13例；年龄39～72岁。肿瘤部位：食管中上段8例、中段28例、中下段28例；
7、肿瘤大体类型为溃疡型：29例，髓质型：30例，其他型5例；肿块大小：≤3cm10例、3～6cm37例、≥6cm17例；病理类型：高分化15例，中分化42例，低分化7例；有淋巴结转移33例，无淋巴结转移31例；临床分期：Ⅰ～Ⅱ期29例，Ⅲ～Ⅳ期35例。2006年3月1日获得随访资料55例，失访9例。1.2试剂碘化丙啶（PI），美国SIGMA化学公司产品。1.3方法取食管癌和距癌远端切缘食管黏膜,用机械方法分离成单细胞。200目尼龙网过滤，调整细胞数为1×106/ml的单细胞悬液。800r/min离心，去上清液后加PBS2ml
8、，混匀离心洗涤2次，弃上清液，边震荡边滴入70%乙醇固定，离心，去上清液后，每只试管内加PI染料100μl（50μg/ml），4℃反应30min后过滤，各加0.5ml固定液,上机检测。流式细胞仪(FACSCalibur美国BD公司)采集窗内10,000个细胞，用ModfitLT2.0软件分析DNA直方图
